摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
1 文章综述 | 第9-18页 |
1.1 斜带石斑鱼 | 第9-10页 |
1.2 哈维氏弧菌研究进展 | 第10-14页 |
1.2.1 哈氏弧菌生物学特性 | 第10页 |
1.2.2 哈维氏弧菌致病性与机制研究 | 第10-13页 |
1.2.3 T6SS及TssJ | 第13-14页 |
1.3 鱼用疫苗种类 | 第14-16页 |
1.3.1 灭活疫苗 | 第14-15页 |
1.3.2 活疫苗 | 第15页 |
1.3.3 亚单位疫苗 | 第15页 |
1.3.4 化学疫苗 | 第15-16页 |
1.3.5 DNA疫苗 | 第16页 |
1.4 研究的目的和意义 | 第16-18页 |
2 哈维氏弧菌亚单位疫苗rTssJ构建及免疫效应分析 | 第18-27页 |
2.1 引言 | 第18页 |
2.2 实验材料 | 第18-21页 |
2.2.1 菌株及其培养条件 | 第18页 |
2.2.2 主要试剂材料及仪器 | 第18-21页 |
2.3 实验方法 | 第21-23页 |
2.3.1 tssJ基因的诱导表达 | 第21页 |
2.3.2 SDS-PAGE分析 | 第21页 |
2.3.3 tssJ基因表达产物大量诱导表达及提取 | 第21-22页 |
2.3.4 亚单位疫苗免疫斜带石斑鱼 | 第22-23页 |
2.4 实验结果 | 第23-25页 |
2.4.1 目的蛋白的提取 | 第23页 |
2.4.2 免疫指标结果 | 第23-25页 |
2.4.3 攻毒结果 | 第25页 |
2.5 讨论 | 第25-27页 |
3 哈维氏弧菌DNA疫苗pCTssJ构建及免疫保护效应分析 | 第27-39页 |
3.1 引言 | 第27页 |
3.2 实验材料 | 第27-28页 |
3.2.1 菌株及其培养条件 | 第27页 |
3.2.2 主要试剂材料及仪器 | 第27-28页 |
3.3 实验方法 | 第28-34页 |
3.3.1 pT1-tssJ载体构建 | 第28-32页 |
3.3.2 真核表达载体的构建 | 第32-33页 |
3.3.3 DNA疫苗免疫斜带石斑鱼 | 第33-34页 |
3.4 实验结果 | 第34-37页 |
3.4.1 tssJ基因的扩增 | 第34页 |
3.4.2 pT1-tssJ载体构建与检测 | 第34页 |
3.4.3 pCTssJ真核表达载体的构建与检测 | 第34-35页 |
3.4.4 血清免疫指标测定 | 第35-36页 |
3.4.5 DNA水平检测 | 第36-37页 |
3.4.6 攻毒结果 | 第37页 |
3.5 讨论 | 第37-39页 |
4 益生菌传递DNA疫苗pCTssJ/F3构建及免疫保护效应分析 | 第39-46页 |
4.1 引言 | 第39页 |
4.2 实验材料 | 第39-40页 |
4.2.1 菌株 | 第39页 |
4.2.2 主要试剂材料及实验仪器 | 第39-40页 |
4.3 实验方法 | 第40-41页 |
4.3.1 pCN_3和pCTssJ质粒提取 | 第40页 |
4.3.2 乳酸乳球菌F3感受态制备 | 第40页 |
4.3.3 电击与转化 | 第40页 |
4.3.4 重组pCN3/F3、pCTssJ/F3的筛选与鉴定 | 第40页 |
4.3.5 益生菌传递DNA疫苗免疫斜带石斑鱼 | 第40-41页 |
4.4 实验结果 | 第41-44页 |
4.4.1 电转结果 | 第41-42页 |
4.4.2 血清免疫指标结果 | 第42-44页 |
4.4.3 攻毒结果 | 第44页 |
4.5 讨论 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-55页 |
作者在读期间论文发表情况 | 第55-56页 |
致谢 | 第56页 |