首页--农业科学论文--农作物论文--经济作物论文--油料作物论文--油菜籽(芸薹)论文

甘蓝型油菜少分枝突变体sfz基因的克隆和功能分析

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
缩写与符号第12-13页
第一章 绪论第13-26页
    1.1 油菜在农业生产中的重要地位第13页
    1.2 植物分枝发育的研究第13-17页
        1.2.1 植物分枝的产生第14-15页
        1.2.2 植物分枝调控分子机制第15-17页
    1.3 植物表皮蜡质的研究第17-21页
        1.3.1 VLCFA的合成及相关基因第17-18页
        1.3.2 植物表皮蜡质合成相关基因第18-19页
        1.3.3 植物表皮蜡质运输基因第19页
        1.3.4 植物表皮蜡质合成调控相关基因第19-21页
    1.4 AP2/ERF转录因子第21-23页
        1.4.1 AP2/ERF转录因子的结构第21页
        1.4.2 AP2/ERF转录因子调节植物蜡质合成第21-22页
        1.4.3 AP2/ERF转录因子调节植物生长发育第22-23页
    1.5 本研究的目的与意义第23页
    1.6 主要研究内容及技术路线第23-26页
        1.6.1 主要研究内容第23-25页
        1.6.2 技术路线第25-26页
第二章 油菜少分枝sfz表型统计分析第26-34页
    2.1 实验材料和试剂第26页
    2.2 实验方法第26-28页
        2.2.1 油菜sfz分枝高度、分枝数的统计第26页
        2.2.2 油菜sfz种子千粒重、种子粒数统计第26-27页
        2.2.3 油菜sfz种子脂肪酸组成成分检测第27页
        2.2.4 油菜sfz叶片核盘菌处理第27-28页
    2.3 实验结果与分析第28-33页
        2.3.1 油菜sfz一次分枝数减少第28-29页
        2.3.2 油菜sfz有效分枝高度增高第29-30页
        2.3.3 油菜sfz其它农艺性状第30-31页
        2.3.4 油菜sfz种子脂肪酸组成成分含量无差异第31页
        2.3.5 油菜sfz核盘菌抗病性差第31-33页
    2.4 总结与讨论第33-34页
第三章 油菜sfz蛋白质组表达分析第34-47页
    3.1 实验材料和试剂第34-37页
        3.1.1 实验材料第34页
        3.1.2 实验仪器第34-35页
        3.1.3 实验试剂及配制第35-37页
    3.2 实验方法与步骤第37-41页
        3.2.1 TCA(三氯醋酸)法提取叶片蛋白第37-38页
        3.2.2 Bradford法蛋白定量第38页
        3.2.3 第一向等电聚焦第38-39页
        3.2.4 第二向SDS-PAGE电泳第39-40页
        3.2.5 聚丙烯酰胺凝胶考染和脱色第40页
        3.2.6 图像处理及差异分析第40-41页
        3.2.7 蛋白点胶内酶解第41页
    3.3 实验结果与分析第41-45页
        3.3.1 Bradford法蛋白定量结果第41-42页
        3.3.2 油菜叶片二维电泳图谱第42-43页
        3.3.3 油菜sfz差异蛋白质谱鉴定结果分析第43-45页
    3.4 总结与讨论第45-47页
第四章 油菜突变体sfz基因的克隆与分析第47-60页
    4.1 材料和试剂第47-49页
        4.1.1 实验植物第47页
        4.1.2 主要实验试剂与药品第47-48页
        4.1.3 实验基本溶液的配制第48页
        4.1.4 引物设计第48-49页
    4.2 实验方法第49-55页
        4.2.1 油菜突变体sfz的基因组提取第49-50页
        4.2.2 hiTAIL-PCR扩增侧翼序列第50-52页
        4.2.3 FPNI-PCR扩增特异序列第52-53页
        4.2.4 PCR产物琼脂糖凝胶回收第53-54页
        4.2.5 连接T载体第54-55页
        4.2.6 制备大肠杆菌感受态细胞第55页
        4.2.7 重组载体转化感受态细胞第55页
        4.2.8 PCR鉴定转化片段第55页
        4.2.9 测序序列分析第55页
    4.3 结果与分析第55-58页
        4.3.1 hiTAIL-PCR扩增结果第55-57页
        4.3.2 FPNI-PCR扩增结果第57-58页
    4.4 总结与讨论第58-60页
第五章 BnSFZ候选基因的表达量及生物信息学分析第60-71页
    5.1 实验材料与试剂第60-61页
        5.1.1 实验材料第60页
        5.1.2 实验试剂第60-61页
        5.1.3 引物设计第61页
    5.2 实验方法第61-64页
        5.2.1 植物总RNA的提取第61-62页
        5.2.2 cDNA的制备第62-63页
        5.2.3 荧光定量PCR第63-64页
        5.2.4 保守结构域及二级结构分析第64页
        5.2.5 氨基酸组成及理化性质分析第64页
        5.2.6 序列比对和进化树分析第64页
    5.3 结果与分析第64-70页
        5.3.1 插入位点两端基因的表达量分析第64-65页
        5.3.2 候选基因保守结构域及二级结构分析第65-66页
        5.3.3 氨基酸组成和理化性质分析第66页
        5.3.4 亲/疏水性分析第66页
        5.3.5 信号肽及亚细胞定位分析第66-67页
        5.3.6 BnSFZ磷酸化、糖基化位点预测第67-68页
        5.3.7 候选基因BnSFZ序列同源性及进化树分析第68-70页
    5.4 总结与讨论第70-71页
第六章 互补实验验证候选基因第71-81页
    6.1 材料与试剂第71-73页
        6.1.1 植物材料、载体第71页
        6.1.2 实验试剂第71页
        6.1.3 基本溶液的配制第71-72页
        6.1.4 引物设计第72-73页
    6.2 实验方法第73-75页
        6.2.1 BnSFZ-OVER过表达载体构建第73-74页
        6.2.2 BnSFZ-RNAi的抑制表达载体构建第74-75页
        6.2.3 农杆菌感受态GV3101的制备第75页
        6.2.4 载体转化到农杆菌第75页
        6.2.5 油菜的遗传转化第75页
    6.3 实验结果与分析第75-79页
        6.3.1 BnSFZ基因的克隆第75-76页
        6.3.2 BnSFZ-PENTR转化株的鉴定第76-77页
        6.3.3 BnSFZ-pB2GW7.0 载体的鉴定第77页
        6.3.4 BnSFZ抑制表达载体的构建第77-79页
        6.3.5 油菜BnSFZ转基因植株的鉴定第79页
    6.4 总结与讨论第79-81页
第七章 目标区域GWAS分析第81-86页
    7.1 实验材料第81页
    7.2 实验方法第81-82页
        7.2.1 分枝数表型数据第81页
        7.2.2 基因分型第81-82页
        7.2.3 目标区域亲缘关系分析第82页
    7.3 实验结果第82-84页
        7.3.1 目标区域SNP位点第82-84页
        7.3.2 目标区段GWAS分析第84页
    7.4 总结与讨论第84-86页
第八章 总结与展望第86-88页
    8.1 主要工作总结第86页
    8.2 工作展望第86-88页
参考文献第88-96页
在学期间发表论文第96页
参加课题第96-97页
致谢第97-98页

论文共98页,点击 下载论文
上一篇:基本医疗保险支付方式改革研究--以东营市为例
下一篇:适应气候变化的农作物分布格局研究--以东北地区为例