摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩写与符号 | 第12-13页 |
第一章 绪论 | 第13-26页 |
1.1 油菜在农业生产中的重要地位 | 第13页 |
1.2 植物分枝发育的研究 | 第13-17页 |
1.2.1 植物分枝的产生 | 第14-15页 |
1.2.2 植物分枝调控分子机制 | 第15-17页 |
1.3 植物表皮蜡质的研究 | 第17-21页 |
1.3.1 VLCFA的合成及相关基因 | 第17-18页 |
1.3.2 植物表皮蜡质合成相关基因 | 第18-19页 |
1.3.3 植物表皮蜡质运输基因 | 第19页 |
1.3.4 植物表皮蜡质合成调控相关基因 | 第19-21页 |
1.4 AP2/ERF转录因子 | 第21-23页 |
1.4.1 AP2/ERF转录因子的结构 | 第21页 |
1.4.2 AP2/ERF转录因子调节植物蜡质合成 | 第21-22页 |
1.4.3 AP2/ERF转录因子调节植物生长发育 | 第22-23页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第23页 |
1.6 主要研究内容及技术路线 | 第23-26页 |
1.6.1 主要研究内容 | 第23-25页 |
1.6.2 技术路线 | 第25-26页 |
第二章 油菜少分枝sfz表型统计分析 | 第26-34页 |
2.1 实验材料和试剂 | 第26页 |
2.2 实验方法 | 第26-28页 |
2.2.1 油菜sfz分枝高度、分枝数的统计 | 第26页 |
2.2.2 油菜sfz种子千粒重、种子粒数统计 | 第26-27页 |
2.2.3 油菜sfz种子脂肪酸组成成分检测 | 第27页 |
2.2.4 油菜sfz叶片核盘菌处理 | 第27-28页 |
2.3 实验结果与分析 | 第28-33页 |
2.3.1 油菜sfz一次分枝数减少 | 第28-29页 |
2.3.2 油菜sfz有效分枝高度增高 | 第29-30页 |
2.3.3 油菜sfz其它农艺性状 | 第30-31页 |
2.3.4 油菜sfz种子脂肪酸组成成分含量无差异 | 第31页 |
2.3.5 油菜sfz核盘菌抗病性差 | 第31-33页 |
2.4 总结与讨论 | 第33-34页 |
第三章 油菜sfz蛋白质组表达分析 | 第34-47页 |
3.1 实验材料和试剂 | 第34-37页 |
3.1.1 实验材料 | 第34页 |
3.1.2 实验仪器 | 第34-35页 |
3.1.3 实验试剂及配制 | 第35-37页 |
3.2 实验方法与步骤 | 第37-41页 |
3.2.1 TCA(三氯醋酸)法提取叶片蛋白 | 第37-38页 |
3.2.2 Bradford法蛋白定量 | 第38页 |
3.2.3 第一向等电聚焦 | 第38-39页 |
3.2.4 第二向SDS-PAGE电泳 | 第39-40页 |
3.2.5 聚丙烯酰胺凝胶考染和脱色 | 第40页 |
3.2.6 图像处理及差异分析 | 第40-41页 |
3.2.7 蛋白点胶内酶解 | 第41页 |
3.3 实验结果与分析 | 第41-45页 |
3.3.1 Bradford法蛋白定量结果 | 第41-42页 |
3.3.2 油菜叶片二维电泳图谱 | 第42-43页 |
3.3.3 油菜sfz差异蛋白质谱鉴定结果分析 | 第43-45页 |
3.4 总结与讨论 | 第45-47页 |
第四章 油菜突变体sfz基因的克隆与分析 | 第47-60页 |
4.1 材料和试剂 | 第47-49页 |
4.1.1 实验植物 | 第47页 |
4.1.2 主要实验试剂与药品 | 第47-48页 |
4.1.3 实验基本溶液的配制 | 第48页 |
4.1.4 引物设计 | 第48-49页 |
4.2 实验方法 | 第49-55页 |
4.2.1 油菜突变体sfz的基因组提取 | 第49-50页 |
4.2.2 hiTAIL-PCR扩增侧翼序列 | 第50-52页 |
4.2.3 FPNI-PCR扩增特异序列 | 第52-53页 |
4.2.4 PCR产物琼脂糖凝胶回收 | 第53-54页 |
4.2.5 连接T载体 | 第54-55页 |
4.2.6 制备大肠杆菌感受态细胞 | 第55页 |
4.2.7 重组载体转化感受态细胞 | 第55页 |
4.2.8 PCR鉴定转化片段 | 第55页 |
4.2.9 测序序列分析 | 第55页 |
4.3 结果与分析 | 第55-58页 |
4.3.1 hiTAIL-PCR扩增结果 | 第55-57页 |
4.3.2 FPNI-PCR扩增结果 | 第57-58页 |
4.4 总结与讨论 | 第58-60页 |
第五章 BnSFZ候选基因的表达量及生物信息学分析 | 第60-71页 |
5.1 实验材料与试剂 | 第60-61页 |
5.1.1 实验材料 | 第60页 |
5.1.2 实验试剂 | 第60-61页 |
5.1.3 引物设计 | 第61页 |
5.2 实验方法 | 第61-64页 |
5.2.1 植物总RNA的提取 | 第61-62页 |
5.2.2 cDNA的制备 | 第62-63页 |
5.2.3 荧光定量PCR | 第63-64页 |
5.2.4 保守结构域及二级结构分析 | 第64页 |
5.2.5 氨基酸组成及理化性质分析 | 第64页 |
5.2.6 序列比对和进化树分析 | 第64页 |
5.3 结果与分析 | 第64-70页 |
5.3.1 插入位点两端基因的表达量分析 | 第64-65页 |
5.3.2 候选基因保守结构域及二级结构分析 | 第65-66页 |
5.3.3 氨基酸组成和理化性质分析 | 第66页 |
5.3.4 亲/疏水性分析 | 第66页 |
5.3.5 信号肽及亚细胞定位分析 | 第66-67页 |
5.3.6 BnSFZ磷酸化、糖基化位点预测 | 第67-68页 |
5.3.7 候选基因BnSFZ序列同源性及进化树分析 | 第68-70页 |
5.4 总结与讨论 | 第70-71页 |
第六章 互补实验验证候选基因 | 第71-81页 |
6.1 材料与试剂 | 第71-73页 |
6.1.1 植物材料、载体 | 第71页 |
6.1.2 实验试剂 | 第71页 |
6.1.3 基本溶液的配制 | 第71-72页 |
6.1.4 引物设计 | 第72-73页 |
6.2 实验方法 | 第73-75页 |
6.2.1 BnSFZ-OVER过表达载体构建 | 第73-74页 |
6.2.2 BnSFZ-RNAi的抑制表达载体构建 | 第74-75页 |
6.2.3 农杆菌感受态GV3101的制备 | 第75页 |
6.2.4 载体转化到农杆菌 | 第75页 |
6.2.5 油菜的遗传转化 | 第75页 |
6.3 实验结果与分析 | 第75-79页 |
6.3.1 BnSFZ基因的克隆 | 第75-76页 |
6.3.2 BnSFZ-PENTR转化株的鉴定 | 第76-77页 |
6.3.3 BnSFZ-pB2GW7.0 载体的鉴定 | 第77页 |
6.3.4 BnSFZ抑制表达载体的构建 | 第77-79页 |
6.3.5 油菜BnSFZ转基因植株的鉴定 | 第79页 |
6.4 总结与讨论 | 第79-81页 |
第七章 目标区域GWAS分析 | 第81-86页 |
7.1 实验材料 | 第81页 |
7.2 实验方法 | 第81-82页 |
7.2.1 分枝数表型数据 | 第81页 |
7.2.2 基因分型 | 第81-82页 |
7.2.3 目标区域亲缘关系分析 | 第82页 |
7.3 实验结果 | 第82-84页 |
7.3.1 目标区域SNP位点 | 第82-84页 |
7.3.2 目标区段GWAS分析 | 第84页 |
7.4 总结与讨论 | 第84-86页 |
第八章 总结与展望 | 第86-88页 |
8.1 主要工作总结 | 第86页 |
8.2 工作展望 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-96页 |
在学期间发表论文 | 第96页 |
参加课题 | 第96-97页 |
致谢 | 第97-98页 |