| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 前言 | 第12-14页 |
| 1 材料与方法 | 第14-31页 |
| 1.1 实验仪器 | 第14页 |
| 1.2 主要试剂配制 | 第14-16页 |
| 1.3 所需材料 | 第16-17页 |
| 1.4 构建质粒 | 第17-22页 |
| 1.5 细胞复苏 | 第22-23页 |
| 1.6 细胞传代和铺板 | 第23页 |
| 1.7 细胞转染 | 第23-24页 |
| 1.8 细胞冻存 | 第24页 |
| 1.9 盐析法从细胞中抽提基因组DNA | 第24-25页 |
| 1.10 Western blot | 第25-27页 |
| 1.11 筛选荧光单克隆细胞 | 第27-28页 |
| 1.12 RNA提取和CDNA的反转录 | 第28-29页 |
| 1.13 细胞衰老 Β-半乳糖苷酶染色实验 | 第29-31页 |
| 2 实验结果 | 第31-41页 |
| 2.1 构建小鼠Hsf4 CRISPR/Cas9 guide RNA质粒 | 第31-32页 |
| 2.2 构建小鼠Hsf4融合片段质粒 | 第32-33页 |
| 2.3 在小鼠晶状体上皮细胞系中敲除Hsf4基因 | 第33-35页 |
| 2.4 在mLEC细胞库中筛选Hsf4敲除的单克隆细胞系 | 第35-37页 |
| 2.5 mLEC细胞中敲除Hsf4导致细胞衰老 | 第37-39页 |
| 2.6 Hsf4敲除导致衰老相关分子P21表达量上升 | 第39-40页 |
| 2.7 老年晶状体中Hsf4表达水平下降， p21表达水平上升 | 第40-41页 |
| 3、讨论 | 第41-43页 |
| 结论 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-47页 |
| 综述 | 第47-57页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57-59页 |
| 在读期间参加学术活动及研究成果、奖励 | 第59-60页 |
