| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-19页 |
| 1 肿瘤血管生成 | 第11-14页 |
| ·肿瘤血管生成及生物学机制 | 第11-13页 |
| ·抑制血管生成策略 | 第13-14页 |
| 2 proEMAPⅡ/p43背景简介 | 第14-16页 |
| ·p43的结构 | 第14-15页 |
| ·p43的生物学功能 | 第15-16页 |
| 3 干扰素诱导蛋白10(IP10)简介 | 第16-17页 |
| 4 IFNγ与JAK-STAT途径 | 第17-19页 |
| 第1章 重组人proEMAPⅡ/p43抑制新生血管生成与细胞凋亡关系研究 | 第19-36页 |
| 1 实验主要材料 | 第19-22页 |
| ·p43蛋白与细胞株 | 第19-20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要试剂的配制 | 第20-21页 |
| ·主要仪器 | 第21-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-28页 |
| ·细胞培养 | 第22页 |
| ·HUVEC细胞管腔形成实验 | 第22页 |
| ·细胞周期分析 | 第22-23页 |
| ·胞内总caspase活性检测 | 第23-24页 |
| ·实时定量PCR | 第24-27页 |
| ·DNA片段化检测 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-34页 |
| ·p43蛋白对HUVEC细胞管腔形成的抑制作用 | 第28页 |
| ·p43蛋白作用于HUVEC细胞的细胞周期分析 | 第28-30页 |
| ·胞内总caspase活性检测 | 第30-31页 |
| ·qPCR检测caspase3、caspase7的mRNA水平变化 | 第31-33页 |
| ·DNA片段化检测 | 第33-34页 |
| 4. 结论 | 第34页 |
| 5. 讨论 | 第34-36页 |
| 第2章 重组人proEMAPⅡ/p43对IP-10的上调作用 | 第36-48页 |
| 1 实验主要材料 | 第37-38页 |
| ·细胞株与蛋白 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要溶液的配制 | 第37-38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| 2 主要实验方法 | 第38-41页 |
| ·细胞培养 | 第38-39页 |
| ·实时定量PCR | 第39-40页 |
| ·ELISA检测相关因子 | 第40-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-46页 |
| ·RNA提取及质量质量评估 | 第41-42页 |
| ·引物特异性检验 | 第42-43页 |
| ·P43蛋白对IP10基因表达的调控 | 第43-44页 |
| ·ELISA方法检测IFNγ、TNFα及IL1β的表达量变化 | 第44-45页 |
| ·p43蛋白对stat1基因水平的影响 | 第45-46页 |
| 4 结论 | 第46页 |
| 5 讨论 | 第46-48页 |
| 第3章 RNAi对p43基因的抑制作用 | 第48-57页 |
| 1 实验主要材料 | 第48-50页 |
| ·细胞、质粒、菌株及蛋白 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·培养基和主要试剂配制 | 第48-49页 |
| ·主要仪器 | 第49-50页 |
| 2 实验方法 | 第50-54页 |
| ·RNAi片段设计 | 第50页 |
| ·火 | 第50-51页 |
| ·质粒双酶切 | 第51页 |
| ·胶回收 | 第51-52页 |
| ·目的基因与载体的连接 | 第52页 |
| ·转化与扩增 | 第52页 |
| ·质粒提取 | 第52-53页 |
| ·测序 | 第53页 |
| ·细胞培养 | 第53页 |
| ·转染 | 第53-54页 |
| ·qPCR检测RNAi效率 | 第54页 |
| 3 结果 | 第54-55页 |
| ·p43 RNAi寡核苷酸链的设计 | 第54页 |
| ·真核表达构建载体及测序 | 第54-55页 |
| 4 结论 | 第55页 |
| 5 讨论 | 第55-57页 |
| 第4章 总结 | 第57-58页 |
| ·本研究主要获得的结果 | 第57页 |
| ·本研究的创新之处 | 第57页 |
| ·需要进一步解决的问题 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第64页 |
