| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-24页 |
| 1.1 研究背景 | 第11-12页 |
| 1.2 菌核菌的研究进展 | 第12-19页 |
| 1.2.1 核盘菌的致病机理 | 第13-16页 |
| 1.2.2 菌核菌的防治 | 第16-19页 |
| 1.3 噬菌体展示技术综述 | 第19-21页 |
| 1.3.1 噬菌体展示技术的载体 | 第19页 |
| 1.3.2 丝状噬菌体展示技术的特点 | 第19-20页 |
| 1.3.3 丝状噬菌体展示技术的展示方式 | 第20页 |
| 1.3.4 噬菌体展示技术的局限性 | 第20-21页 |
| 1.4 scFv的研究进展 | 第21-24页 |
| 1.4.1 单链抗体的构建 | 第21-22页 |
| 1.4.2 单链抗体的表达 | 第22-23页 |
| 1.4.3 单链抗体的应用 | 第23-24页 |
| 1.5 本研究目的及意义 | 第24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-27页 |
| 2.1.1 动物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第24-25页 |
| 2.1.3 酶和试剂 | 第25页 |
| 2.1.4 一抗和酶标二抗 | 第25页 |
| 2.1.5 培养基及试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.6 引物 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-32页 |
| 2.2.1 质粒DNA提取 | 第27页 |
| 2.2.2 DNA片段回收 | 第27页 |
| 2.2.3 感受态细胞制备及转化 | 第27-28页 |
| 2.2.4 菌核菌抗原制备 | 第28-29页 |
| 2.2.5 动物免疫 | 第29页 |
| 2.2.6 抗体滴度测定 | 第29-30页 |
| 2.2.7 scFv文库的构建 | 第30-31页 |
| 2.2.8 噬菌体展示筛选文库 | 第31-32页 |
| 2.2.9 ELISA检测噬菌体单链抗体(Phage ELISA) | 第32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-45页 |
| 3.1 抗原的制备 | 第32-33页 |
| 3.2 抗体滴度检测 | 第33-35页 |
| 3.3 单链抗体文库的构建 | 第35-40页 |
| 3.3.1 分离总RNA和纯化mRNA | 第36页 |
| 3.3.2 合成cDNA以及扩增V_H、V_L片段 | 第36页 |
| 3.3.3 连接V_H和V_L片段构建scFv文库 | 第36-38页 |
| 3.3.4 单链抗体文库多样性检测 | 第38-40页 |
| 3.4 噬菌体展示 | 第40-45页 |
| 3.4.1 噬菌体展示文库的淘选 | 第40页 |
| 3.4.2 ELISA检测噬菌体单链抗体 | 第40-41页 |
| 3.4.3 单链抗体的序列 | 第41-45页 |
| 4 讨论 | 第45-48页 |
| 参考文献 | 第48-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
