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蜻蜓凤梨AfSBP7旳克隆及功能鉴定

摘要第4-5页
Abstract第5页
1. 前言第8-16页
    1.1 文献综述第8-12页
        1.1.1 蜻蜓凤梨第8页
        1.1.2 植物的开花及其调控第8-9页
        1.1.3 SPL是一类重要的转录因子第9-10页
        1.1.4 拟南芥中的SPL家族第10-11页
        1.1.5 SPL基因家族在其他物种中的重要作用第11-12页
    1.2 酵母单杂交实验原理第12-13页
    1.3 实时荧光定量PCR技术第13-14页
    1.4 研究的目的与意义第14-15页
    1.5 研究的技术路线第15-16页
2 材料和方法第16-33页
    2.1 材料第16页
        2.1.1 植物材料与菌种质粒第16页
        2.1.2 药品与试剂第16页
    2.2 方法第16-33页
        2.2.1 蜻蜓凤梨总RNA的提取第16-17页
        2.2.2 RACE拼接获得AfSBP7基因全长第17-22页
        2.2.3 AfSBP7的生物信息学分析第22页
        2.2.4 AfSBP7转录活性的验证第22-26页
        2.2.5 使用荧光定量对蜻蜓凤梨AfSBP7的表达量进行分析第26-28页
        2.2.6 CaMV35S::AfSBP7过表达载体的构建第28-30页
        2.2.7 将构建成功的过表达载体转化到农杆菌中第30-31页
        2.2.8 拟南芥的遗传转化第31-33页
3 结果与分析第33-46页
    3.1 蜻蜓凤梨总RNA的提取第33页
    3.2 蜻蜓凤梨AfSBP7编码区序列全长的获得第33-34页
    3.3. AfSBP7的生物信息学分析第34-36页
        3.3.1 阅读框第34页
        3.3.2 基因系统进化树分析、同源性比对分析和结构域分析第34-36页
    3.4 AfSBP7转录激活结构域的验证第36-38页
        3.4.1 酵母pGBKT7-AfSBP7表达载体的构建第36-37页
        3.4.2. 鉴定AfSBP7是否具有转录激活结构域第37-38页
    3.5 AfSBP7的组织特异性表达分析第38-42页
        3.5.1 溶解曲线分析第38-39页
        3.5.2 标准曲线制作结果第39页
        3.5.3 AfSBP7成株幼株昼夜节律表达分析第39-40页
        3.5.4 AfSBP7在组织器官里的表达分析第40页
        3.5.5 AfSBP7在不同时期里根、茎、叶的表达分析第40-41页
        3.5.6 AfSBP7成株幼株对乙烯的响应第41-42页
    3.6 AfSBP7基因的功能分析第42-46页
        3.6.1. CaMV35S::AfSBP7表达载体的构建第42-43页
        3.6.2 CaMV35S::AfSBP7转拟南芥植株的分子鉴定第43页
        3.6.3 CaMV35S::AfSBP7表型分析第43-46页
4 讨论第46-49页
    4.1 蜻蜓凤梨AfSBP7蛋白相关的生物信息学分析第46页
    4.2 AfSBP7转录激活结构域分析第46-47页
    4.3 AfSBP7组织特异性分析第47-48页
    4.4 AfSBP7基因的功能分析第48-49页
5 结论第49-50页
6 参考文献第50-56页
7 中英文缩略语第56-58页
8 附录第58-64页
    附录1 引物序列第58-59页
    附录2:实验中常用的培养基及药瓶配方第59-61页
    附录3:实验中所用到的实验设备第61-62页
    附录4:酵母单杂交结果第62-63页
    附录5:作者简历第63-64页
9. 致谢第64页

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