摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
1. 前言 | 第8-16页 |
1.1 文献综述 | 第8-12页 |
1.1.1 蜻蜓凤梨 | 第8页 |
1.1.2 植物的开花及其调控 | 第8-9页 |
1.1.3 SPL是一类重要的转录因子 | 第9-10页 |
1.1.4 拟南芥中的SPL家族 | 第10-11页 |
1.1.5 SPL基因家族在其他物种中的重要作用 | 第11-12页 |
1.2 酵母单杂交实验原理 | 第12-13页 |
1.3 实时荧光定量PCR技术 | 第13-14页 |
1.4 研究的目的与意义 | 第14-15页 |
1.5 研究的技术路线 | 第15-16页 |
2 材料和方法 | 第16-33页 |
2.1 材料 | 第16页 |
2.1.1 植物材料与菌种质粒 | 第16页 |
2.1.2 药品与试剂 | 第16页 |
2.2 方法 | 第16-33页 |
2.2.1 蜻蜓凤梨总RNA的提取 | 第16-17页 |
2.2.2 RACE拼接获得AfSBP7基因全长 | 第17-22页 |
2.2.3 AfSBP7的生物信息学分析 | 第22页 |
2.2.4 AfSBP7转录活性的验证 | 第22-26页 |
2.2.5 使用荧光定量对蜻蜓凤梨AfSBP7的表达量进行分析 | 第26-28页 |
2.2.6 CaMV35S::AfSBP7过表达载体的构建 | 第28-30页 |
2.2.7 将构建成功的过表达载体转化到农杆菌中 | 第30-31页 |
2.2.8 拟南芥的遗传转化 | 第31-33页 |
3 结果与分析 | 第33-46页 |
3.1 蜻蜓凤梨总RNA的提取 | 第33页 |
3.2 蜻蜓凤梨AfSBP7编码区序列全长的获得 | 第33-34页 |
3.3. AfSBP7的生物信息学分析 | 第34-36页 |
3.3.1 阅读框 | 第34页 |
3.3.2 基因系统进化树分析、同源性比对分析和结构域分析 | 第34-36页 |
3.4 AfSBP7转录激活结构域的验证 | 第36-38页 |
3.4.1 酵母pGBKT7-AfSBP7表达载体的构建 | 第36-37页 |
3.4.2. 鉴定AfSBP7是否具有转录激活结构域 | 第37-38页 |
3.5 AfSBP7的组织特异性表达分析 | 第38-42页 |
3.5.1 溶解曲线分析 | 第38-39页 |
3.5.2 标准曲线制作结果 | 第39页 |
3.5.3 AfSBP7成株幼株昼夜节律表达分析 | 第39-40页 |
3.5.4 AfSBP7在组织器官里的表达分析 | 第40页 |
3.5.5 AfSBP7在不同时期里根、茎、叶的表达分析 | 第40-41页 |
3.5.6 AfSBP7成株幼株对乙烯的响应 | 第41-42页 |
3.6 AfSBP7基因的功能分析 | 第42-46页 |
3.6.1. CaMV35S::AfSBP7表达载体的构建 | 第42-43页 |
3.6.2 CaMV35S::AfSBP7转拟南芥植株的分子鉴定 | 第43页 |
3.6.3 CaMV35S::AfSBP7表型分析 | 第43-46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
4.1 蜻蜓凤梨AfSBP7蛋白相关的生物信息学分析 | 第46页 |
4.2 AfSBP7转录激活结构域分析 | 第46-47页 |
4.3 AfSBP7组织特异性分析 | 第47-48页 |
4.4 AfSBP7基因的功能分析 | 第48-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
6 参考文献 | 第50-56页 |
7 中英文缩略语 | 第56-58页 |
8 附录 | 第58-64页 |
附录1 引物序列 | 第58-59页 |
附录2:实验中常用的培养基及药瓶配方 | 第59-61页 |
附录3:实验中所用到的实验设备 | 第61-62页 |
附录4:酵母单杂交结果 | 第62-63页 |
附录5:作者简历 | 第63-64页 |
9. 致谢 | 第64页 |