| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第13页 |
| 第一章 猪繁殖与呼吸综合征病毒研究进展 | 第13-31页 |
| 1.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)病原学特征 | 第14-16页 |
| 1.1.1 PRRSV的分类地位 | 第14页 |
| 1.1.2 PRRSV的形态结构 | 第14-15页 |
| 1.1.3 病毒的培养特性 | 第15页 |
| 1.1.4 病毒的抵抗力 | 第15页 |
| 1.1.5 病毒的血凝特性 | 第15-16页 |
| 1.2 猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究 | 第16-22页 |
| 1.2.1 PRRSV的基因组结构 | 第16页 |
| 1.2.2 PRRSV的非结构蛋白 | 第16-18页 |
| 1.2.3 PRRSV的主要囊膜蛋白：M和GP5 | 第18-20页 |
| 1.2.4 PRRSV的次要囊膜蛋白 | 第20-22页 |
| 1.2.5 N蛋白 | 第22页 |
| 1.3 猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究进展 | 第22-25页 |
| 1.3.1 弱毒活疫苗 | 第22-24页 |
| 1.3.2 灭活疫苗 | 第24页 |
| 1.3.3 其他PRRS疫苗的发展 | 第24-25页 |
| 1.3.4 PRRS疫苗的研究前景展望 | 第25页 |
| 1.4 PRRSV细胞受体研究进展 | 第25-30页 |
| 1.4.1 硫酸乙酰肝素(HS) | 第26-27页 |
| 1.4.2 唾液酸粘附素(Sn) | 第27页 |
| 1.4.3 清道夫受体CD163 | 第27-28页 |
| 1.4.4 CD151和波形蛋白(Vimentin) | 第28-29页 |
| 1.4.5 非肌肉肌球蛋白Ⅱ型重链A | 第29-30页 |
| 1.5 本研究的背景 | 第30页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第30-31页 |
| 试验研究 | 第31页 |
| 第二章 NMHC Ⅱ-A羧基端(PRA)基因的克隆与真核表达载体的构建 | 第31-39页 |
| 2.1 试验材料 | 第31-33页 |
| 2.1.1 菌株 | 第31页 |
| 2.1.2 主要试剂及载体 | 第31-32页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第32页 |
| 2.1.4 主要试剂配制 | 第32-33页 |
| 2.2 试验方法 | 第33-36页 |
| 2.2.1 融合HA标签PRA基因的扩增 | 第33-34页 |
| 2.2.2 重组质粒的构建和鉴定 | 第34-36页 |
| 2.3 试验结果 | 第36-37页 |
| 2.3.1 融合HA标签PRA基因的扩增结果 | 第36页 |
| 2.3.2 重组质粒的构建和鉴定结果 | 第36-37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-38页 |
| 2.5 小结 | 第38-39页 |
| 第三章 稳定表达PRA的MARC-145细胞系的建立 | 第39-52页 |
| 3.1 试验材料 | 第39-41页 |
| 3.1.1 细胞、质粒与抗体 | 第39页 |
| 3.1.2 主要试剂与耗材 | 第39-40页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第40页 |
| 3.1.4 主要试剂配制 | 第40-41页 |
| 3.2 试验方法 | 第41-47页 |
| 3.2.1 稳定表达PRA的MARC-145细胞系的建立 | 第41-44页 |
| 3.2.2 稳定表达PRA的MARC-145细胞系的鉴定 | 第44-47页 |
| 3.2.3 稳定表达PRA对NMHC Ⅱ-A表达的影响 | 第47页 |
| 3.3 试验结果 | 第47-50页 |
| 3.3.1 嘌呤霉素致死MARC-145细胞的最低浓度的确定 | 第47页 |
| 3.3.2 稳定表达PRA的MARC-145细胞系的建立 | 第47-48页 |
| 3.3.3 稳定表达PRA的MARC-145细胞系的鉴定 | 第48-50页 |
| 3.3.4 稳定表达PRA对NMHC Ⅱ-A表达的影响测定 | 第50页 |
| 3.4 讨论 | 第50-51页 |
| 3.5 小结 | 第51-52页 |
| 第四章 MARC-145细胞稳定表达PRA对PRRSV感染的影响 | 第52-65页 |
| 4.1 试验材料 | 第52-53页 |
| 4.1.1 细胞、病毒和抗体 | 第52-53页 |
| 4.1.2 主要试剂与耗材 | 第53页 |
| 4.1.3 主要仪器 | 第53页 |
| 4.1.4 主要试剂配制 | 第53页 |
| 4.2 试验方法 | 第53-58页 |
| 4.2.1 复苏细胞 | 第53-54页 |
| 4.2.2 PRRSV SD-16毒株的增殖培养 | 第54页 |
| 4.2.3 半数细胞培养物感染量(50% tissue culture infective dose,TCID_(50))的测定 | 第54-55页 |
| 4.2.4 稳定表达PRA对PRRSV感染的影响测定 | 第55-57页 |
| 4.2.5 免疫共沉淀试验检测与PRA相互作用的蛋白 | 第57-58页 |
| 4.3 试验结果 | 第58-63页 |
| 4.3.1 稳定表达PRA对PRRSV感染的影响测定结果 | 第58-62页 |
| 4.3.2 免疫共沉淀试验检测结果 | 第62-63页 |
| 4.4 讨论 | 第63页 |
| 4.5 小结 | 第63-65页 |
| 全文总结 | 第65-66页 |
| 论文创新点 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-79页 |
| 致谢 | 第79-81页 |
| 作者简介 | 第81页 |
