棉铃虫羧酸酯酶基因克隆及原核表达
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-22页 |
| 1.1 前言 | 第13页 |
| 1.2 棉铃虫分部与危害 | 第13-14页 |
| 1.3 羧酸酯酶概况 | 第14-16页 |
| 1.3.1 羧酸酯酶分类与命名 | 第14-15页 |
| 1.3.2 羧酸酯酶结构功能机水解机制 | 第15-16页 |
| 1.4 抗药性机理 | 第16-19页 |
| 1.4.1 代谢抗性的分子基础 | 第17页 |
| 1.4.2 羧酸酯酶的抗药性机制 | 第17-19页 |
| 1.5 棉铃虫羧酸酯酶与抗性的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.6 研究目的和意义 | 第20页 |
| 1.7 技术路线 | 第20-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-28页 |
| 2.1 供试材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第22页 |
| 2.1.2 菌种 | 第22页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.4 溶液配制及培养基 | 第22页 |
| 2.1.5 SDS-PAGE电泳试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.6 Ni-NTA亲和层析缓冲液配制 | 第23页 |
| 2.1.7 测定蛋白浓度试剂 | 第23页 |
| 2.2 试验方法 | 第23-28页 |
| 2.2.1 羧酸酯酶基因克隆 | 第23-25页 |
| 2.2.2 构建重组表达载体 | 第25-26页 |
| 2.2.3 原核表达 | 第26页 |
| 2.2.4 Ni~2+亲和柱层析 | 第26-27页 |
| 2.2.5 SDS-PAGE检测 | 第27页 |
| 2.2.6 Bradford法测定蛋白浓度 | 第27-28页 |
| 第三章 结果与分析 | 第28-34页 |
| 3.1 棉铃虫羧酸脂酶基因克隆和序列比对特征分析 | 第28-32页 |
| 3.2 重组表达载体的构建 | 第32-33页 |
| 3.3 诱导蛋白表达,纯化和检测 | 第33-34页 |
| 3.3.1 纯化蛋白SDS-PAGE检测 | 第33页 |
| 3.3.2 蛋白纯化后的浓度测定 | 第33-34页 |
| 第四章 问题与讨论 | 第34-35页 |
| 第五章 总结 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-39页 |
| 附录 | 第39-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 作者简介 | 第42页 |
