| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 文献综述 | 第9-17页 |
| 1.1 石蒜简介 | 第9页 |
| 1.2 石蒜生物碱简介 | 第9-10页 |
| 1.2.1 生物碱种类及生理活性 | 第9-10页 |
| 1.2.2 生物碱分离检测 | 第10页 |
| 1.3 石蒜科植物组织培养的研究 | 第10-12页 |
| 1.3.1 培养条件的影响 | 第11页 |
| 1.3.2 诱导子对生长和生物碱积累的影响 | 第11-12页 |
| 1.4 石蒜生物碱合成的研究 | 第12-15页 |
| 1.4.1 化学合成生物碱 | 第12-13页 |
| 1.4.2 生物合成途径的研究 | 第13-15页 |
| 1.5 酪氨酸脱羧酶研究 | 第15-17页 |
| 2 引言 | 第17-19页 |
| 2.1 研究内容及意义 | 第17-18页 |
| 2.2 技术路线 | 第18-19页 |
| 3 材料和方法 | 第19-24页 |
| 3.1 材料 | 第19页 |
| 3.2 试剂与仪器 | 第19页 |
| 3.3 石蒜不定芽培养 | 第19-20页 |
| 3.4 石蒜酪氨酸脱羧酶基因克隆 | 第20-21页 |
| 3.4.1 石蒜不定芽总RNA提取 | 第20页 |
| 3.4.2 cDNA第一链合成 | 第20-21页 |
| 3.4.3 石蒜酪氨酸脱羧酶基因克隆 | 第21页 |
| 3.5 内参基因筛选 | 第21-22页 |
| 3.6 TYDC基因和内参基因荧光定量PCR | 第22-23页 |
| 3.7 酪氨酸脱羧酶活性测定方法 | 第23页 |
| 3.8 生物碱的提取与检测 | 第23页 |
| 3.9 数据处理与分析 | 第23-24页 |
| 4 试验结果与分析 | 第24-37页 |
| 4.1 石蒜不定芽总RNA提取检测 | 第24页 |
| 4.2 TYDC基因克隆 | 第24-25页 |
| 4.3 内参基因和TYDC基因扩增标准曲线 | 第25-28页 |
| 4.4 内参基因的选择 | 第28页 |
| 4.5 TYDC基因在石蒜不定芽中表达水平的变化 | 第28-31页 |
| 4.6 酪氨酸脱羧酶活性检测 | 第31-35页 |
| 4.6.1 酪胺标准曲线的建立 | 第31-32页 |
| 4.6.2 酪氨酸脱羧酶最适温度 | 第32-33页 |
| 4.6.3 最适pH值 | 第33页 |
| 4.6.4 不同处理酪氨酸活性检测 | 第33-35页 |
| 4.7 生物碱含量检测 | 第35-37页 |
| 4.7.1 添加酪氨酸对石蒜碱，力克拉敏和加兰他敏积累的影响 | 第35页 |
| 4.7.2 添加MeJA对石蒜碱，力克拉敏和加兰他敏积累的影响 | 第35-37页 |
| 5 讨论 | 第37-41页 |
| 5.1 实时定量PCR内参基因的筛选 | 第37-38页 |
| 5.2 荧光定量的方法 | 第38页 |
| 5.3 酪氨酸脱羧酶活性检测方法建立和前体物与诱导子对其活性的影响 | 第38-39页 |
| 5.4 石蒜酪氨酸脱羧酶基因表达与生物碱积累的相关性分析 | 第39-41页 |
| 6 结论 | 第41-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 附录及缩略词 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |
| 在学期间发表论文及科研成果 | 第50页 |
