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茶树中三个肌醇半乳糖苷合成酶(CsGS)基因的克隆、功能验证及表达特征分析

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
1 文献综述第10-15页
    1.1 植物中的肌醇半乳糖苷代谢第10-11页
        1.1.1 肌醇半乳糖苷第10-11页
        1.1.2 肌醇半乳糖苷合酶第11页
    1.2 棉子糖系列寡糖与抗逆性的研究第11-14页
        1.2.1 棉子糖系列寡糖与抗寒性第11-12页
        1.2.2 棉子糖系列寡糖与抗旱性第12-13页
        1.2.3 棉子糖系列寡糖与抗虫性第13页
        1.2.4 其他作用第13-14页
    1.3 茶树抗性育种第14-15页
        1.3.1 茶树抗寒育种第14-15页
        1.3.2 茶树抗旱育种第15页
        1.3.3 茶树抗虫育种第15页
2 引言第15-16页
    2.1 研究意义与目的第15页
    2.2 研究内容和技术路线第15-16页
        2.2.1 研究内容第15-16页
        2.2.2 技术路线第16页
3 材料与方法第16-25页
    3.1 试验材料与处理第16-17页
        3.1.1 实验材料第16页
        3.1.2 试验处理第16-17页
    3.2 主要试剂与仪器第17-18页
        3.2.1 主要试剂第17页
        3.2.2 主要仪器设备第17页
        3.2.3 实验中主要试剂配方第17-18页
    3.3 方法第18-25页
        3.3.1 茶树叶片总RNA提取第18页
        3.3.2 RNA的检测第18页
        3.3.3 cDNA第一链的合成第18-19页
        3.3.4 三个CsGS基因的cDNA全长克隆第19-20页
        3.3.5 PCR扩增产物胶回收纯化第20页
        3.3.6 纯化片段的克隆第20-21页
        3.3.7 CsGS基因的生物信息学分析第21页
        3.3.8 三个CsGS基因的原核表达第21-22页
        3.3.9 三个 CsGS 基因原核表达的酶活检测第22-23页
        3.3.10 三个CsGS基因表达特征的qRT-PCR分析第23-24页
        3.3.11 CsGS1的Northern blot分析第24-25页
4 结果与分析第25-46页
    4.1 三个CsGS基因的全长cDNA克隆与序列分析第25-33页
        4.1.1 三个CsGS基因的 3’-RACE克隆第25-26页
        4.1.2 三个CsGS基因的 5’-RACE克隆第26-27页
        4.1.3 三个CsGS基因的全长cDNA验证第27页
        4.1.4 三个CsGS基因的序列分析第27-30页
        4.1.5 茶树CsGS的序列同源比对和进化树分析第30-33页
    4.2 三个CsGS基因的原核表达第33-38页
        4.2.1 三个CsGS基因的ORF扩增第33-34页
        4.2.2 表达载体的构建第34页
        4.2.3 蛋白诱导表达第34-36页
        4.2.4 三个CsGS基因原核表达的酶活检测第36-38页
    4.3 三个CsGS基因的表达特征分析第38-46页
        4.3.1 三个CsGS基因qRT-PCR标准曲线的确定第38-39页
        4.3.2 CsGS1基因在低温、干旱逆境条件下表达特征的qRT-PCR分析第39-41页
        4.3.3 三个CsGS基因在茶树叶片经茶尺蠖取食诱导后表达特征的qRT-PCR分析第41页
        4.3.4 三个CsGS基因在茶树经激素处理后表达特征的qRT-PCR分析第41-43页
        4.3.5 三个CsGS基因在茶树中组织特异性表达特征的qRT-PCR分析第43-44页
        4.3.6 CsGS1基因表达特征的Northern blot分析第44-46页
5 讨论第46-48页
    5.1 茶树CsGS的结构特征及进化分类第46页
    5.2 原核表达及其条件优化第46-47页
    5.3 酶活测定第47页
    5.4 表达特征分析第47-48页
6 结论第48-49页
参考文献第49-55页
致谢第55页
作者简介第55页
成果清单第55页

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