中文摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略词表 | 第12-16页 |
第1章 绪论 | 第16-39页 |
1.1 软骨组织和软骨相关疾病 | 第16-18页 |
1.1.1 软骨组织 | 第16-18页 |
1.1.2 软骨相关疾病 | 第18页 |
1.2 软骨疾病的治疗和组织工程 | 第18-27页 |
1.2.1 软骨相关疾病的治疗 | 第18-21页 |
1.2.2 干细胞和临床应用 | 第21-27页 |
1.3 环腺苷酸(CYCLIC ADENOSINE MONOPHOSPHATE,CAMP)及其信号途径对细胞的作用 | 第27-36页 |
1.4 3-8 周胚胎发育的关键 | 第36-37页 |
1.5 立题依据 | 第37-39页 |
第2章 hECSCs 的分离培养和鉴定 | 第39-52页 |
2.1 材料 | 第39-41页 |
2.1.1 主要器材和设备 | 第39页 |
2.1.2 主要试剂 | 第39-40页 |
2.1.3 试剂配制 | 第40-41页 |
2.1.4 实验标本取材 | 第41页 |
2.2 实验方法 | 第41-46页 |
2.2.1 hECSCs 的分离 | 第41-42页 |
2.2.2 hECSCs 的原代培养和继代培养 | 第42页 |
2.2.3 hECSCs 细胞的冻存与复苏 | 第42-43页 |
2.2.4 hECSCs 细胞周期分析 | 第43页 |
2.2.5 hECSCs 细胞表面标志鉴定 | 第43-44页 |
2.2.6 hECSCs 细胞的 RT-PCR 检测 | 第44-46页 |
2.3 实验结果 | 第46-49页 |
2.3.1 hECSCs 的培养 | 第46-47页 |
2.3.2 hECSCs 的细胞周期分析 | 第47-48页 |
2.3.3 hECSCs 的细胞免疫标志分析 | 第48-49页 |
2.3.4 hECSCs 的 RT-PCR 结果 | 第49页 |
2.4 讨论 | 第49-52页 |
第3章 hECSCs 的多向分化潜能的鉴定 | 第52-76页 |
3.1 实验材料 | 第52-56页 |
3.1.1 主要器材和设备 | 第52-53页 |
3.1.2 主要试剂 | 第53-54页 |
3.1.3 试剂配制 | 第54-55页 |
3.1.4 RT-PCR 引物序列 | 第55-56页 |
3.2 实验方法 | 第56-64页 |
3.2.1 hECSCs 向脂肪细胞诱导及检测 | 第56-58页 |
3.2.2 hECSCs 向骨细胞诱导及检测 | 第58-59页 |
3.2.3 hECSCs 向神经细胞诱导及检测 | 第59-61页 |
3.2.4 hECSCs 向胰岛细胞诱导及检测 | 第61-62页 |
3.2.5 hECSCs 向软骨细胞诱导及检测 | 第62-64页 |
3.3 实验结果 | 第64-74页 |
3.3.1 hECSCs 向脂肪细胞诱导结果 | 第64-66页 |
3.3.2 hECSCs 向骨细胞诱导结果 | 第66-68页 |
3.3.3 hECSCs 向神经细胞诱导结果 | 第68-70页 |
3.3.4 hECSCs 向胰岛细胞诱导结果 | 第70-71页 |
3.3.5 hECSCs 向软骨细胞诱导结果 | 第71-74页 |
3.4 讨论 | 第74-76页 |
第4章 Bt_2CAMP 诱导不同组织来源的胚胎多能干细胞向软骨细胞分化 | 第76-88页 |
4.1 实验材料 | 第76-78页 |
4.1.1 主要器材和设备 | 第76-77页 |
4.1.2 主要试剂 | 第77页 |
4.1.3 RT-PCR 所用引物 | 第77-78页 |
4.1.4 细胞来源 | 第78页 |
4.2 实验方法 | 第78-79页 |
4.2.1 Bt_2cAMP 诱导 hECSCs 向软骨细胞分化 | 第78-79页 |
4.2.2 Bt_2cAMP 诱导 hEHSCs 向软骨细胞分化 | 第79页 |
4.2.3 Bt_2cAMP 诱导 hEASCs 向软骨细胞分化 | 第79页 |
4.3 实验结果 | 第79-86页 |
4.3.1 Bt_2cAMP 对细胞诱导的剂量依赖关系 | 第79-80页 |
4.3.2 阿尔新蓝染色结果 | 第80-82页 |
4.3.3 Ⅱ型胶原免疫组织化学结果 | 第82-85页 |
4.3.4 qPCR 结果 | 第85-86页 |
4.3.5 hEHSCs 诱导后的 RT-PCR 结果 | 第86页 |
4.4 讨论 | 第86-88页 |
第5章 结论 | 第88-89页 |
创新点 | 第89-90页 |
参考文献 | 第90-102页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第102-103页 |
致谢 | 第103页 |