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人胚胎多能干细胞的分离鉴定和向软骨细胞分化诱导的研究

中文摘要第4-7页
Abstract第7-8页
英文缩略词表第12-16页
第1章 绪论第16-39页
    1.1 软骨组织和软骨相关疾病第16-18页
        1.1.1 软骨组织第16-18页
        1.1.2 软骨相关疾病第18页
    1.2 软骨疾病的治疗和组织工程第18-27页
        1.2.1 软骨相关疾病的治疗第18-21页
        1.2.2 干细胞和临床应用第21-27页
    1.3 环腺苷酸(CYCLIC ADENOSINE MONOPHOSPHATE,CAMP)及其信号途径对细胞的作用第27-36页
    1.4 3-8 周胚胎发育的关键第36-37页
    1.5 立题依据第37-39页
第2章 hECSCs 的分离培养和鉴定第39-52页
    2.1 材料第39-41页
        2.1.1 主要器材和设备第39页
        2.1.2 主要试剂第39-40页
        2.1.3 试剂配制第40-41页
        2.1.4 实验标本取材第41页
    2.2 实验方法第41-46页
        2.2.1 hECSCs 的分离第41-42页
        2.2.2 hECSCs 的原代培养和继代培养第42页
        2.2.3 hECSCs 细胞的冻存与复苏第42-43页
        2.2.4 hECSCs 细胞周期分析第43页
        2.2.5 hECSCs 细胞表面标志鉴定第43-44页
        2.2.6 hECSCs 细胞的 RT-PCR 检测第44-46页
    2.3 实验结果第46-49页
        2.3.1 hECSCs 的培养第46-47页
        2.3.2 hECSCs 的细胞周期分析第47-48页
        2.3.3 hECSCs 的细胞免疫标志分析第48-49页
        2.3.4 hECSCs 的 RT-PCR 结果第49页
    2.4 讨论第49-52页
第3章 hECSCs 的多向分化潜能的鉴定第52-76页
    3.1 实验材料第52-56页
        3.1.1 主要器材和设备第52-53页
        3.1.2 主要试剂第53-54页
        3.1.3 试剂配制第54-55页
        3.1.4 RT-PCR 引物序列第55-56页
    3.2 实验方法第56-64页
        3.2.1 hECSCs 向脂肪细胞诱导及检测第56-58页
        3.2.2 hECSCs 向骨细胞诱导及检测第58-59页
        3.2.3 hECSCs 向神经细胞诱导及检测第59-61页
        3.2.4 hECSCs 向胰岛细胞诱导及检测第61-62页
        3.2.5 hECSCs 向软骨细胞诱导及检测第62-64页
    3.3 实验结果第64-74页
        3.3.1 hECSCs 向脂肪细胞诱导结果第64-66页
        3.3.2 hECSCs 向骨细胞诱导结果第66-68页
        3.3.3 hECSCs 向神经细胞诱导结果第68-70页
        3.3.4 hECSCs 向胰岛细胞诱导结果第70-71页
        3.3.5 hECSCs 向软骨细胞诱导结果第71-74页
    3.4 讨论第74-76页
第4章 Bt_2CAMP 诱导不同组织来源的胚胎多能干细胞向软骨细胞分化第76-88页
    4.1 实验材料第76-78页
        4.1.1 主要器材和设备第76-77页
        4.1.2 主要试剂第77页
        4.1.3 RT-PCR 所用引物第77-78页
        4.1.4 细胞来源第78页
    4.2 实验方法第78-79页
        4.2.1 Bt_2cAMP 诱导 hECSCs 向软骨细胞分化第78-79页
        4.2.2 Bt_2cAMP 诱导 hEHSCs 向软骨细胞分化第79页
        4.2.3 Bt_2cAMP 诱导 hEASCs 向软骨细胞分化第79页
    4.3 实验结果第79-86页
        4.3.1 Bt_2cAMP 对细胞诱导的剂量依赖关系第79-80页
        4.3.2 阿尔新蓝染色结果第80-82页
        4.3.3 Ⅱ型胶原免疫组织化学结果第82-85页
        4.3.4 qPCR 结果第85-86页
        4.3.5 hEHSCs 诱导后的 RT-PCR 结果第86页
    4.4 讨论第86-88页
第5章 结论第88-89页
创新点第89-90页
参考文献第90-102页
攻读学位期间发表的学术论文第102-103页
致谢第103页

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