| 致谢 | 第5-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-28页 |
| 1.1 引言 | 第12页 |
| 1.2 酶的结构与功能研究 | 第12-18页 |
| 1.2.1 结构生物学简介 | 第12-14页 |
| 1.2.2 X-ray衍射晶体学 | 第14页 |
| 1.2.3 蛋白质结晶与结构解析 | 第14-18页 |
| 1.3 蛋白质结构的研究意义 | 第18页 |
| 1.4 脂肪酶结构与功能的研究 | 第18-22页 |
| 1.4.1 脂肪酶简介与分类 | 第18-20页 |
| 1.4.2 脂肪酶催化机理 | 第20-21页 |
| 1.4.3 脂肪酶的结构 | 第21-22页 |
| 1.4.4 脂肪酶的应用 | 第22页 |
| 1.5 2-卤代酸脱卤酶结构与功能的研究 | 第22-27页 |
| 1.5.1 脱卤酶简介与分类 | 第23-24页 |
| 1.5.2 2-卤代酸脱卤酶催化机理 | 第24-26页 |
| 1.5.3 2-卤代酸脱卤酶的结构 | 第26页 |
| 1.5.4 脱卤酶的应用 | 第26-27页 |
| 1.6 本论文研究思路 | 第27-28页 |
| 第二章 脂肪酶PaL结构与功能研究 | 第28-57页 |
| 2.1 引言 | 第28页 |
| 2.2 实验材料 | 第28-31页 |
| 2.2.1 常用试剂 | 第28页 |
| 2.2.2 培养基及常用试剂的配制 | 第28-30页 |
| 2.2.3 常用仪器 | 第30页 |
| 2.2.4 菌种与质粒 | 第30-31页 |
| 2.3 实验方法 | 第31-37页 |
| 2.3.1 PaL相关突变体的构建 | 第31-33页 |
| 2.3.2 脂肪酶PaL母体蛋白与PaL_(L297M)硒代蛋白的表达 | 第33页 |
| 2.3.3 脂肪酶PaL的纯化 | 第33-34页 |
| 2.3.4 蛋白浓度的确定 | 第34页 |
| 2.3.5 脂肪酶PaL的晶体生长 | 第34-36页 |
| 2.3.6 冷冻保护剂的筛选 | 第36页 |
| 2.3.7 PaL衍射数据的收集 | 第36页 |
| 2.3.8 数据处理及结构解析 | 第36页 |
| 2.3.9 水解对映体的活力测定方法 | 第36-37页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第37-55页 |
| 2.4.1 PaL母体蛋白的制备、结晶和衍射 | 第37-41页 |
| 2.4.2 PaL_(L297M)硒代蛋白的制备、结晶和衍射 | 第41-44页 |
| 2.4.3 PaL的结构解析 | 第44-47页 |
| 2.4.4 PaL结构评价 | 第47-48页 |
| 2.4.5 PaL的整体结构 | 第48-49页 |
| 2.4.6 PaL的复合物结构解析 | 第49-52页 |
| 2.4.7 基于PaL结构的功能验证 | 第52-55页 |
| 2.5 本章小结 | 第55-57页 |
| 第三章 脱卤酶DehDⅣ-R的晶体结构解析 | 第57-73页 |
| 3.1 引言 | 第57页 |
| 3.2 实验材料 | 第57-58页 |
| 3.2.1 常用试剂 | 第57页 |
| 3.2.2 培养基及常用试剂的配制 | 第57-58页 |
| 3.2.3 常用仪器 | 第58页 |
| 3.2.4 菌种与质粒 | 第58页 |
| 3.3 实验方法 | 第58-60页 |
| 3.3.1 脱卤酶DehDⅣ-R母体蛋白与硒代蛋白的表达 | 第58页 |
| 3.3.2 脱卤酶DehDⅣ-R的纯化 | 第58-59页 |
| 3.3.3 蛋白浓度的确定 | 第59页 |
| 3.3.4 脱卤酶DehDⅣ-R的晶体生长 | 第59-60页 |
| 3.3.5 冷冻保护剂的筛选 | 第60页 |
| 3.3.6 脱卤酶DehDⅣ-R衍射数据的收集 | 第60页 |
| 3.3.7 数据处理及结构解析 | 第60页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第60-72页 |
| 3.4.1 DehDⅣ-R母体蛋白的制备、结晶与衍射 | 第60-68页 |
| 3.4.2 DehDⅣ-R硒代蛋白的制备、结晶 | 第68-70页 |
| 3.4.3 脱卤酶DehDⅣ-R的结构解析 | 第70-72页 |
| 3.5 本章小结 | 第72-73页 |
| 第四章 结论与展望 | 第73-75页 |
| 4.1 结论 | 第73页 |
| 4.1.1 脂肪酶PaL | 第73页 |
| 4.1.2 脱卤酶DehDⅣ-R | 第73页 |
| 4.2 展望 | 第73-75页 |
| 4.2.1 脂肪酶PaL | 第73-74页 |
| 4.2.2 脱卤酶DeDⅣ-R | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-78页 |
