| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第10-21页 |
| 1.1 植物抗逆生理生化研究 | 第10-12页 |
| 1.1.1 细胞膜系与植物抗逆性 | 第10页 |
| 1.1.2 抗氧化系统与植物抗逆性 | 第10-11页 |
| 1.1.3 渗透调节物质与植物抗逆性 | 第11-12页 |
| 1.2 植物抗逆相关WRKY转录因子 | 第12-18页 |
| 1.2.1 WRKY转录因子结构特点及其分类 | 第13-14页 |
| 1.2.2 WRKY转录因子的起源与进化 | 第14-15页 |
| 1.2.3 WRKY转录因子的生物学功能 | 第15-18页 |
| 1.2.4 橡胶树WRKY类转录因子研究现状 | 第18页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第18-20页 |
| 1.4 本研究的技术路线 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-44页 |
| 2.1 实验材料和试剂 | 第21-24页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第21页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第21页 |
| 2.1.3 引物 | 第21-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-44页 |
| 2.2.1 橡胶树总RNA的提取与质量检测 | 第24-25页 |
| 2.2.2 单链cDNA的合成 | 第25-26页 |
| 2.2.3 巴西橡胶树HbWRKY7和HbWRKY11基因的获得 | 第26-32页 |
| 2.2.4 不同处理下巴西橡胶树HbWRKY7和HbWRKY11的表达分析 | 第32-34页 |
| 2.2.5 HbWRKY7和HbWRKY11转化拟南芥表达载体的构建 | 第34-38页 |
| 2.2.6 HbWRKY7和HbWRKY11在拟南芥中的过表达 | 第38-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-90页 |
| 3.1 巴西橡胶树HbWRKY7和HbWRKY11基因的克隆 | 第44-48页 |
| 3.1.1 橡胶树总RNA的提取与质量检测 | 第44-45页 |
| 3.1.2 HbWRKY7和HbWRKY11 5'Race扩增结果 | 第45-46页 |
| 3.1.3 HbWRKY7和HbWRKY11全长cDNA的获得 | 第46页 |
| 3.1.4 HbWRKY7和HbWRKY11基因的ORF扩增 | 第46-47页 |
| 3.1.5 HbWRKY7和HbWRKY11内含于扩增结果及序列分析 | 第47-48页 |
| 3.2 巴西橡胶树HbWRKY7和HbWRKY11的生物信息学分析 | 第48-57页 |
| 3.2.1 HbWRKY7和HbWRKY11的基因序列及ORF预测 | 第48页 |
| 3.2.2 HbWRKY7和HbWRKY11蛋白质一级结构分析 | 第48-50页 |
| 3.2.3 蛋白质亚细胞定位、结构域分析及其功能预测 | 第50-52页 |
| 3.2.4 蛋白质的信号肽、疏水性及跨膜预测 | 第52-54页 |
| 3.2.5 HbWRKY7和HbWRKY11同源性分析 | 第54-57页 |
| 3.3 巴西橡胶树HbWRKY7和HbWRKY11的功能表达分析 | 第57-71页 |
| 3.3.1 HbWRKY7和HbWRKY11的组织特异性表达 | 第57-58页 |
| 3.3.2 HbWRKY7和HbWRKY11响应低温胁迫表达分析 | 第58-62页 |
| 3.3.3 HbWRKY7和HbWRKY11响应激素等诱导表达分析 | 第62-68页 |
| 3.3.4 HbWRKY7和HbWRKY11响应NaCl、PEG、干旱诱导表达分析 | 第68-71页 |
| 3.4 共转化拟南芥表达载体pXCS-HbWRKY11-HbWRKY7-HAStrep的构建 | 第71-74页 |
| 3.4.1 共表达载体pXCS-Dgene-HAStrep的构建 | 第71-73页 |
| 3.4.2 共表达载体pXCS-HbWRKY11-HbWRKY7-HAStrep的构建 | 第73-74页 |
| 3.5 HbWRKY7和HbWRKY11拟南芥过表达株系鉴定及抗性分析 | 第74-90页 |
| 3.5.1 转基因拟南芥PCR检测结果 | 第74-75页 |
| 3.5.2 共转化拟南芥中HbWRKY11和HbWRKY7的表达分析 | 第75-77页 |
| 3.5.3 转基因拟南芥纯系植株的Southern鉴定 | 第77-78页 |
| 3.5.4 转基因拟南芥响应低温诱导表达分析 | 第78-81页 |
| 3.5.5 转基因拟南芥响应SA和JA诱导表达分析 | 第81-88页 |
| 3.5.6 转基因拟南芥的生理指标测定 | 第88-90页 |
| 4 讨论 | 第90-94页 |
| 4.1 一种植物双基因共表达载体pXCS-HbWRKY11-HbWRKY7-HA | 第90-91页 |
| 4.2 HbWRKY7和HbWRKY11响应低温表达模式分析 | 第91-92页 |
| 4.3 HbWRKY7和HbWRKY11响应其它非生物胁迫表达模式分析 | 第92页 |
| 4.4 HbWRKY7和HbWRKY11在橡胶树抗逆育种中的应用 | 第92-94页 |
| 5 结论 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
