中文摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略语表 | 第11-12页 |
前言 | 第12-14页 |
第一部分:间充质干细胞促进血管内皮细胞向内皮细胞分化 | 第14-27页 |
1 实验材料 | 第14-15页 |
1.1 主要仪器和试剂 | 第14页 |
1.2 实验动物 | 第14-15页 |
1.3 主要溶液的配置 | 第15页 |
2 方法 | 第15-22页 |
2.1 小鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)的分离和培养 | 第15-16页 |
2.2 小鼠血管内皮前体细胞(BM-EPCs)的分离和培养 | 第16页 |
2.3 共培养实验 | 第16页 |
2.4 细胞形态学观察 | 第16页 |
2.5 免疫荧光实验检测CD31、vWF的表达 | 第16-17页 |
2.6 实时定量PCR(RT-PCR)检测上述各组中细胞CD31、vWF的mRNA表达 | 第17-19页 |
2.7 Western blotting检测上述各组中细胞CD31、vWF蛋白表达水平 | 第19-22页 |
2.8 统计学方法 | 第22页 |
3 结果 | 第22-26页 |
3.1 MSCs促进EPCs分化为ECs | 第22-23页 |
3.2 VEGF在MSCs促进EPCs分化为ECs的过程起着重要的作用 | 第23-26页 |
3.2.1 EPCs单独培养组、MSCs & EPCs共培养组、VEGF组细胞形态学的变化 | 第23页 |
3.2.2 免疫荧光显示三组细胞内皮细胞特异性表面标记的表达情况 | 第23页 |
3.2.3 RT-PCR显示CD31和v WF mRNA的表达 | 第23-24页 |
3.2.4 Western blot显示ECs特异性标志的蛋白表达情况 | 第24-26页 |
4 讨论 | 第26-27页 |
第二部分:血管内皮生长因子促进血管内皮细胞向内皮细胞分化 | 第27-40页 |
1 实验材料 | 第27页 |
1.1 主要仪器和试剂 | 第27页 |
1.2 实验动物 | 第27页 |
2 方法 | 第27-34页 |
2.1 小鼠骨髓间充质干细胞的分离和培养以及血管内皮前体细胞的分离和培养方法同第一部分实验 | 第27页 |
2.2 EPCs单独培养组、共培养组以及VEGF组中细胞培养上清液的提取 | 第27页 |
2.3 MSC条件培养基(MSCCM)的提取 | 第27页 |
2.4 ELISA法检测EPCs单独培养组、共培养组以及VEGF组中细胞培养上清液中VEGF的含量 | 第27-29页 |
2.5 ELISA法检测MSCCM中VEGF的含量 | 第29-30页 |
2.6 MSCCM对EPCs分化的影响 | 第30页 |
2.7 免疫荧光检测四组细胞CD31、vWF的表达 | 第30-31页 |
2.8 RT-PCR检测四个不同组别细胞CD31、vWF的mRNA表达情况 | 第31页 |
2.9 Western blotting检测四个不同组别细胞细胞CD31、vWF蛋白表达水平 | 第31-34页 |
2.10 统计学方法 | 第34页 |
3 结果 | 第34-38页 |
3.1 共培养组VEGF的含量较对照组上调 | 第34-35页 |
3.2 MSCs分泌VEGF | 第35页 |
3.3 VEGF抗体抑制EPCs的分化 | 第35-38页 |
3.3.1 免疫荧光显示四组细胞内皮细胞特异性表面标记的表达情况 | 第35-36页 |
3.3.2 RT-PCR显示CD31和vWF mRNA的表达 | 第36页 |
3.3.3 Western blot显示ECs特异性标志的蛋白表达情况 | 第36-38页 |
4 讨论 | 第38-39页 |
5 结论 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
文献综述 内皮祖细胞的分化潜能及影响其分化的因素 | 第44-51页 |
参考文献 | 第48-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
作者简介 | 第52-53页 |
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第53页 |