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间充质干细胞对血管内皮前体细胞分化影响的研究

中文摘要第5-7页
Abstract第7-8页
英文缩略语表第11-12页
前言第12-14页
第一部分:间充质干细胞促进血管内皮细胞向内皮细胞分化第14-27页
    1 实验材料第14-15页
        1.1 主要仪器和试剂第14页
        1.2 实验动物第14-15页
        1.3 主要溶液的配置第15页
    2 方法第15-22页
        2.1 小鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)的分离和培养第15-16页
        2.2 小鼠血管内皮前体细胞(BM-EPCs)的分离和培养第16页
        2.3 共培养实验第16页
        2.4 细胞形态学观察第16页
        2.5 免疫荧光实验检测CD31、vWF的表达第16-17页
        2.6 实时定量PCR(RT-PCR)检测上述各组中细胞CD31、vWF的mRNA表达第17-19页
        2.7 Western blotting检测上述各组中细胞CD31、vWF蛋白表达水平第19-22页
        2.8 统计学方法第22页
    3 结果第22-26页
        3.1 MSCs促进EPCs分化为ECs第22-23页
        3.2 VEGF在MSCs促进EPCs分化为ECs的过程起着重要的作用第23-26页
            3.2.1 EPCs单独培养组、MSCs & EPCs共培养组、VEGF组细胞形态学的变化第23页
            3.2.2 免疫荧光显示三组细胞内皮细胞特异性表面标记的表达情况第23页
            3.2.3 RT-PCR显示CD31和v WF mRNA的表达第23-24页
            3.2.4 Western blot显示ECs特异性标志的蛋白表达情况第24-26页
    4 讨论第26-27页
第二部分:血管内皮生长因子促进血管内皮细胞向内皮细胞分化第27-40页
    1 实验材料第27页
        1.1 主要仪器和试剂第27页
        1.2 实验动物第27页
    2 方法第27-34页
        2.1 小鼠骨髓间充质干细胞的分离和培养以及血管内皮前体细胞的分离和培养方法同第一部分实验第27页
        2.2 EPCs单独培养组、共培养组以及VEGF组中细胞培养上清液的提取第27页
        2.3 MSC条件培养基(MSCCM)的提取第27页
        2.4 ELISA法检测EPCs单独培养组、共培养组以及VEGF组中细胞培养上清液中VEGF的含量第27-29页
        2.5 ELISA法检测MSCCM中VEGF的含量第29-30页
        2.6 MSCCM对EPCs分化的影响第30页
        2.7 免疫荧光检测四组细胞CD31、vWF的表达第30-31页
        2.8 RT-PCR检测四个不同组别细胞CD31、vWF的mRNA表达情况第31页
        2.9 Western blotting检测四个不同组别细胞细胞CD31、vWF蛋白表达水平第31-34页
        2.10 统计学方法第34页
    3 结果第34-38页
        3.1 共培养组VEGF的含量较对照组上调第34-35页
        3.2 MSCs分泌VEGF第35页
        3.3 VEGF抗体抑制EPCs的分化第35-38页
            3.3.1 免疫荧光显示四组细胞内皮细胞特异性表面标记的表达情况第35-36页
            3.3.2 RT-PCR显示CD31和vWF mRNA的表达第36页
            3.3.3 Western blot显示ECs特异性标志的蛋白表达情况第36-38页
    4 讨论第38-39页
    5 结论第39-40页
参考文献第40-44页
文献综述 内皮祖细胞的分化潜能及影响其分化的因素第44-51页
    参考文献第48-51页
致谢第51-52页
作者简介第52-53页
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表第53页

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