| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1.绪论 | 第11-25页 |
| 1.1 研究目的与意义 | 第11-12页 |
| 1.2 国内外研究进展 | 第12-20页 |
| 1.2.1 植物的抗盐性 | 第12-16页 |
| 1.2.1.1 盐胁迫的作用机理 | 第12页 |
| 1.2.1.2 盐胁迫对植物的影响 | 第12-13页 |
| 1.2.1.3 植物应对盐胁迫的机制 | 第13-16页 |
| 1.2.2 植物的抗旱性 | 第16-20页 |
| 1.2.2.1 干旱胁迫的作用机理 | 第16-17页 |
| 1.2.2.2 干旱胁迫对植物的影响 | 第17-18页 |
| 1.2.2.3 植物的抗旱性机制 | 第18-20页 |
| 1.3 Why的概述 | 第20-22页 |
| 1.4 本研究的主要研究内容和技术路线 | 第22-25页 |
| 1.4.1 本研究的主要研究内容 | 第22-23页 |
| 1.4.1.1 Why转化拟南芥的研究 | 第22页 |
| 1.4.1.2 转Why甘蓝型油菜的获取 | 第22页 |
| 1.4.1.3 转Why拟南芥的抗盐抗旱性研究 | 第22-23页 |
| 1.4.2 技术路线图 | 第23-25页 |
| 2. Why转化拟南芥和油菜的研究 | 第25-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-27页 |
| 2.1.1 菌种 | 第25页 |
| 2.1.2 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.3 所用培养基 | 第25-26页 |
| 2.1.3.1 菌用培养基 | 第25页 |
| 2.1.3.2 植物组织培养基 | 第25-26页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第26页 |
| 2.1.5 缓冲液 | 第26页 |
| 2.1.6 所用仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.2 实验方法 | 第27-42页 |
| 2.2.1 构建p CAMBIA2300- Why植物表达载体 | 第27-31页 |
| 2.2.1.1 目的基因Why的获取 | 第27-28页 |
| 2.2.1.2 p CAMBIA2300质粒的获取 | 第28页 |
| 2.2.1.3 PCR产物Why与提取质粒的胶回收 | 第28页 |
| 2.2.1.4 Why与p CAMBIA2300质粒的双酶切与连接 | 第28-29页 |
| 2.2.1.5 感受态细胞的制备及重组质粒的转化 | 第29-30页 |
| 2.2.1.6 转化农杆菌 | 第30-31页 |
| 2.2.2 转Why油菜苗的获得 | 第31-34页 |
| 2.2.2.1 油菜无菌苗的培养 | 第31页 |
| 2.2.2.2 外植体预培养 | 第31页 |
| 2.2.2.3 农杆菌浸染 | 第31-32页 |
| 2.2.2.4 诱导培养 | 第32页 |
| 2.2.2.5 筛选培养 | 第32页 |
| 2.2.2.6 生根培养 | 第32页 |
| 2.2.2.7 练苗培养 | 第32-33页 |
| 2.2.2.8 PCR检测获得阳性的油菜苗 | 第33-34页 |
| 2.2.3 转Why拟南芥的获取与检测 | 第34-37页 |
| 2.2.3.1 拟南芥的种子消毒，铺板及植株培养 | 第34-35页 |
| 2.2.3.2 花序浸染法转化拟南芥 | 第35页 |
| 2.2.3.4 转Why拟南芥的RNA提 取 | 第35-36页 |
| 2.2.3.5 反转录获得c DNA | 第36页 |
| 2.2.3.6 实时荧光定量PCR | 第36-37页 |
| 2.2.4 转Why拟南芥的抗盐性和抗旱性的研究 | 第37-42页 |
| 2.2.4.1 盐胁迫和干旱胁迫对转Why拟南芥种子萌发和幼苗根长的影响 | 第37-38页 |
| 2.2.4.2 盐胁迫和干旱胁迫对转Why拟南芥生理生化的影响 | 第38-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-75页 |
| 3.1 构建p CAMBIA2300- Why植物表达载体的构建与农杆菌转化 | 第42-44页 |
| 3.1.1 构建p CAMBIA2300- Why植物表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.1.2 转化农杆菌EHA105和GV3103 | 第43-44页 |
| 3.2 农杆菌介导法获得转Why的油菜 | 第44-50页 |
| 3.2.1 获得油菜无菌苗 | 第44-45页 |
| 3.2.2 外植体预培养 | 第45-46页 |
| 3.2.3 外植体共培养 | 第46-47页 |
| 3.2.4 外植体的诱导培养 | 第47页 |
| 3.2.5 筛选培养 | 第47-48页 |
| 3.2.6 生根培养与炼苗移植 | 第48-49页 |
| 3.2.7 转基因油菜的PCR检 测 | 第49-50页 |
| 3.3 花序浸染法获得转Why的拟南芥 | 第50-54页 |
| 3.3.1 转Why拟南芥培养体系 | 第50-51页 |
| 3.3.2 Kan抗性筛选浓度的确定 | 第51页 |
| 3.3.3 Kan抗性筛选获得抗性植株 | 第51-53页 |
| 3.3.4 转Why拟南芥的PCR检测 | 第53页 |
| 3.3.5 转Why T_代拟南芥的实时定量PCR检 测 | 第53-54页 |
| 3.4 转Why拟南芥的抗盐性 | 第54-65页 |
| 3.4.1 盐胁迫下转Why拟南芥的种子萌发与幼苗的相对根长 | 第54-56页 |
| 3.4.2 盐胁迫下转Why拟南芥的生理生化的分析 | 第56-65页 |
| 3.4.2.1 盐胁迫下拟南芥相对含水量的变化 | 第56-57页 |
| 3.4.2.2 盐胁迫下拟南芥相对电导率的变化 | 第57-58页 |
| 3.4.2.3 盐胁迫下拟南芥丙二醛（MDA）含量的变化 | 第58-59页 |
| 3.4.2.4 盐胁迫下拟南芥叶片可溶性糖含量的变化 | 第59页 |
| 3.4.2.5 盐胁迫下拟南芥叶片脯氨酸含量的变化 | 第59-60页 |
| 3.4.2.6 盐胁迫下拟南芥叶片可溶性蛋白含量的变化 | 第60-61页 |
| 3.4.2.7 盐胁迫下拟南芥叶片叶绿素含量的变化 | 第61-62页 |
| 3.4.2.8 盐胁迫下拟南芥叶片抗氧化酶活性的变化 | 第62-65页 |
| 3.5 转Why拟南芥的抗旱性 | 第65-75页 |
| 3.5.1 干旱胁迫下转Why拟南芥的种子萌发与幼苗的相对根长 | 第65-66页 |
| 3.5.2 干旱胁迫下转Why拟南芥的生理生化的分析 | 第66-75页 |
| 3.5.2.1 干旱胁迫下拟南芥相对含水量的变化 | 第66-67页 |
| 3.5.2.2 干旱胁迫下拟南芥相对电导率的变化 | 第67-68页 |
| 3.5.2.3 干旱胁迫下拟南芥丙二醛含量的变化 | 第68-69页 |
| 3.5.2.4 干旱胁迫下拟南芥可溶性糖含量的变化 | 第69-70页 |
| 3.5.2.5 干旱胁迫下拟南芥脯氨酸含量的变化 | 第70页 |
| 3.5.2.6 干旱胁迫下拟南芥可溶性蛋白含量的变化 | 第70-71页 |
| 3.5.2.7 干旱胁迫下拟南芥叶绿素含量的变化 | 第71-72页 |
| 3.5.2.8 干旱胁迫下拟南芥抗氧化酶活性的变化 | 第72-75页 |
| 4. 讨论 | 第75-78页 |
| 4.1 农杆菌介导转化油菜和拟南芥 | 第75-76页 |
| 4.1.1 农杆菌介导法转化油菜 | 第75-76页 |
| 4.1.2 农杆菌介导法转化拟南芥 | 第76页 |
| 4.2 转Why拟 南芥的抗盐性和抗旱性 | 第76-78页 |
| 4.2.1 转Why拟 南芥的抗盐性 | 第76-77页 |
| 4.2.2 转Why拟 南芥的抗旱性 | 第77-78页 |
| 结论 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-90页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及研究成果 | 第90页 |
