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BRCA1对S期DNA-PKcs自磷酸化的调控作用研究

致谢第5-7页
中文摘要第7-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第12-15页
1. 引言第15-19页
2. 材料和方法第19-51页
    2.1 细胞培养第19页
    2.2 质粒第19-25页
    2.3 质粒的抽提第25-27页
    2.4 细胞转染第27-28页
    2.5 构建稳转株细胞第28-29页
    2.6 活细胞成像及激光微辐射第29-33页
    2.7 蛋白表达纯化第33-36页
    2.8 核蛋白提取和Western Blot第36-42页
    2.9 免疫共沉淀(Immunoprecipitation,IP)及体外结合实验第42-44页
    2.10 体外酶活性实验第44-46页
    2.11 RPA及Rad51的荧光免疫染色第46-47页
    2.12 激光划痕及免疫荧光第47-48页
    2.13 流式细胞检测第48-49页
    2.14 IR敏感性试验第49-51页
3. 实验结果第51-81页
    3.1 DNA-PKcs在S期和非S期都可聚集到DNA损伤位点第51-54页
    3.2 DNA-PKcs 2056 的自磷酸化水平在S期降低第54-56页
    3.3 BRCA1抑制DNA-PKcs S2056在S期的自磷酸化第56-59页
    3.4 BRCA1和DNA-PKcs存在相互作用第59-61页
    3.5 BRCA1和DNA-PKcs的相互作用具有细胞周期依赖性第61-62页
    3.6 BRCA1的羧基端与DNA-PKcs相互作用第62-64页
    3.7 DNA-PKcs特异性地与BRCA1的BRCT结构域发生相互作用第64-65页
    3.8 BRCA1的BRCT结构域与DNA-PKcs的氨基端S2056簇附近发生相互作用第65-68页
    3.9 BRCA1的BRCT结构域与DNA-PKcs的相互作用是非磷酸化依赖的第68-70页
    3.10 BRCA1在体内和体外抑制DNA-PKcs S2056的自磷酸化第70-74页
    3.11 抑制DNA-PKcs S2056簇的磷酸化可增加细胞的辐射敏感性并促进HR修复通路的发生第74-81页
4. 讨论第81-86页
5. 结论第86-87页
参考文献第87-96页
综述第96-114页
    参考文献第104-114页
作者简历及所取得的科研成果第114页

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