| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第11-25页 |
| 1.1 苏云金芽胞杆菌 | 第11页 |
| 1.2 杀虫晶体蛋白的分类 | 第11页 |
| 1.3 杀虫晶体蛋白的结构与功能 | 第11-15页 |
| 1.3.1 杀虫晶体蛋白的结构 | 第11-13页 |
| 1.3.2 Domain I的结构特征与功能 | 第13-14页 |
| 1.3.3 DomainⅡ的结构特征与功能 | 第14-15页 |
| 1.3.4 Domain III的结构特征与功能 | 第15页 |
| 1.4 杀虫晶体蛋白的作用机制 | 第15-18页 |
| 1.4.1 穿孔模型 | 第15-16页 |
| 1.4.2 信号转导模型 | 第16-18页 |
| 1.5 Cry蛋白受体的研究进展 | 第18-23页 |
| 1.5.1 钙粘蛋白（Cadherin） | 第18-19页 |
| 1.5.2 氨肽酶（Aminopeptidase N，APN） | 第19-20页 |
| 1.5.3 碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase, ALP） | 第20-21页 |
| 1.5.4 糖脂（Glycolipid） | 第21页 |
| 1.5.5 ABC蛋白（ATP-binding cassette） | 第21-22页 |
| 1.5.6 其他受体 | 第22-23页 |
| 1.6 同源建模 | 第23页 |
| 1.7 课题研究内容和目的意义 | 第23-25页 |
| 1.7.1 课题研究内容 | 第23-24页 |
| 1.7.2 课题目的意义 | 第24-25页 |
| 第2章 Cry1Ab结构差异解析 | 第25-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 2.1.1 相关软件及服务器 | 第25-26页 |
| 2.1.2 蛋白序列 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-27页 |
| 2.2.1 Cry1Ab蛋白的同源建模 | 第26页 |
| 2.2.2 对Cry1Ab蛋白进行全序列对比 | 第26-27页 |
| 2.2.3 对Cry1Ab蛋白进行二级结构描述及分类 | 第27页 |
| 2.2.4 对Cry1Ab蛋白进行结构之间的比对 | 第27页 |
| 2.3 实验结果 | 第27-39页 |
| 2.3.1 Cry1Ab型蛋白活性区同源建模 | 第27-28页 |
| 2.3.2 基于二级结构的Cry1Ab型蛋白分类 | 第28-31页 |
| 2.3.3 基于三级结构对Cry1Ab型蛋白进一步分类 | 第31-33页 |
| 2.3.4 Cry1AbⅠ与Cry1AbⅢ的结构比对 | 第33-34页 |
| 2.3.5 Cry1AbⅠ与Cry1AbⅣ的结构比对 | 第34-35页 |
| 2.3.6 Cry1AbⅢ与Cry1AbⅣ的结构比对 | 第35-37页 |
| 2.3.7 Cry1AbⅠ、Cry1AbⅢ、Cry1AbⅣ与Cry1AbⅡ的结构比对 | 第37-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-40页 |
| 2.5 本章小结 | 第40-41页 |
| 第3章 Cry1Ab1与Cry1Ab7的结构差异与活性差异之间的关系 | 第41-61页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第41-44页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第41-42页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第42-43页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第43页 |
| 3.1.4 主要培养基 | 第43页 |
| 3.1.5 实验常用溶液的配制 | 第43-44页 |
| 3.1.6 供试昆虫 | 第44页 |
| 3.2 实验方法 | 第44-50页 |
| 3.2.1 质粒的提取 | 第44-45页 |
| 3.2.2 突变质粒的构建 | 第45页 |
| 3.2.3 突变体质粒转化 | 第45页 |
| 3.2.4 突变质粒的筛选及鉴定 | 第45-46页 |
| 3.2.5 目的基因的扩增 | 第46-47页 |
| 3.2.6 DNA凝胶回收 | 第47页 |
| 3.2.7 表达载体的构建 | 第47-48页 |
| 3.2.8 质粒转化Rosetta | 第48页 |
| 3.2.9 蛋白的诱导表达与蛋白提取 | 第48页 |
| 3.2.10 蛋白质浓度测定 | 第48-49页 |
| 3.2.11 小菜蛾（Plutella xylostella）生物活性测定 | 第49页 |
| 3.2.12 分子对接分析蛋白与受体之间的关系 | 第49-50页 |
| 3.3 实验结果 | 第50-58页 |
| 3.3.1 Cry1Ab1-AP和Cry1Ab1-AG突变体的构建 | 第50-51页 |
| 3.3.2 表达载体的构建 | 第51-52页 |
| 3.3.3 突变蛋白的诱导表达和SDS-PAGE检测 | 第52-53页 |
| 3.3.4 蛋白浓度标准曲线的绘制 | 第53-54页 |
| 3.3.5 小菜蛾生物活性测定 | 第54页 |
| 3.3.6 Cry1Ab1和Cry1Ab7分别与小菜蛾受体的分子对接分析 | 第54-56页 |
| 3.3.7 Cry1Ab1和Cry1Ab7分别与埃及伊蚊受体的分子对接分析 | 第56-58页 |
| 3.4 讨论 | 第58-59页 |
| 3.5 本章小结 | 第59-61页 |
| 第4章 害虫中肠中结合Cry1Ab1的非受体蛋白的分离与鉴定 | 第61-77页 |
| 4.1 实验材料与试剂 | 第61-63页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第61页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第61-62页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第62页 |
| 4.1.4 主要培养基 | 第62页 |
| 4.1.5 实验常用溶液的配制 | 第62-63页 |
| 4.1.6 供试昆虫 | 第63页 |
| 4.2 实验方法 | 第63-66页 |
| 4.2.1 重组蛋白的收集 | 第63页 |
| 4.2.2 包涵体的洗涤与变性 | 第63页 |
| 4.2.3 包涵体的复性 | 第63-64页 |
| 4.2.4 Cry1Ab1重组蛋白的纯化 | 第64页 |
| 4.2.5 镍柱再生 | 第64-65页 |
| 4.2.6 蛋白浓度测定 | 第65页 |
| 4.2.7 小菜蛾（Plutella xylostella）生物活性测定 | 第65页 |
| 4.2.8 埃及伊蚊（A. aegypti）生物活性测定 | 第65页 |
| 4.2.9 昆虫中肠肠腔液的提取 | 第65页 |
| 4.2.10 Cry蛋白的偶联 | 第65页 |
| 4.2.11 配体垂钓平台分析结合蛋白 | 第65-66页 |
| 4.2.12 蛋白喂食后不同时间下小菜蛾中肠肠腔液中结合蛋白的分析 | 第66页 |
| 4.3 实验结果 | 第66-73页 |
| 4.3.1 重组蛋白包涵体洗涤条件的优化 | 第66-67页 |
| 4.3.2 Cry1Ab1和突变体Cry1Ab1-AP重组蛋白复性后生物活性检测 | 第67-68页 |
| 4.3.3 Cry1Ab1-AP重组蛋白复性后埃及伊蚊生物活性检测 | 第68页 |
| 4.3.4 Cry1Ab1重组蛋白的纯化 | 第68-69页 |
| 4.3.5 昆虫中肠肠腔液蛋白的提取 | 第69-70页 |
| 4.3.6 配体垂钓平台分析Cry1Ab1蛋白在小菜蛾中肠肠腔液的结合蛋白 | 第70-71页 |
| 4.3.7 蛋白喂食后不同时间下小菜蛾中肠肠腔液中结合蛋白的分析 | 第71-73页 |
| 4.4 讨论 | 第73-75页 |
| 4.5 本章小结 | 第75-77页 |
| 第5章 结论与展望 | 第77-79页 |
| 5.1 结论 | 第77-78页 |
| 5.2 展望 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第91页 |
