| 缩略词表 | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 实验材料与方法 | 第17-28页 |
| 1. 材料与来源 | 第17-19页 |
| 1.1 菌株与质粒 | 第17页 |
| 1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
| 1.2.1 克隆构建相关试剂 | 第17页 |
| 1.2.2 免疫印记与免疫沉淀相关试剂 | 第17页 |
| 1.2.3 细胞培养所需试剂 | 第17-18页 |
| 1.2.4 实验所需抗体 | 第18页 |
| 1.3 实验仪器 | 第18-19页 |
| 1.4 主要试剂配方 | 第19页 |
| 2.实验方法 | 第19-28页 |
| 2.1 筛选PIM1分子 | 第19页 |
| 2.2 Flag-PIM1质粒构建 | 第19-25页 |
| 2.2.1 GFP-PIM1质粒测序 | 第19-20页 |
| 2.2.2 构建Flag-PIM1质粒 | 第20-24页 |
| 2.2.3 Flag-PIM1阳性克隆鉴定与测序 | 第24-25页 |
| 2.3 细胞培养和转染 | 第25页 |
| 2.4 免疫共沉淀实验 | 第25-26页 |
| 2.5 质谱鉴定 | 第26页 |
| 2.6 体外激酶实验 | 第26-27页 |
| 2.7 统计学处理 | 第27-28页 |
| 实验结果 | 第28-44页 |
| 1. 线性泛素化底物的筛选 | 第28页 |
| 2. 构建Flag-PIM1质粒 | 第28-31页 |
| 2.1 Flag-PIM1克隆的构建 | 第28-30页 |
| 2.2 检测PIM1基因表达 | 第30-31页 |
| 3. PIM1线性泛素化修饰的鉴定 | 第31-36页 |
| 3.1 PIM1与线性泛素化E3酶存在相互作用 | 第31页 |
| 3.2 PIM1是线性泛素化底物 | 第31-34页 |
| 3.3 PIM1线性泛素化修饰依赖于HOIP的E3酶活性 | 第34-35页 |
| 3.4 OTULIN导致PIM1发生去线性泛素化 | 第35-36页 |
| 4. 质谱方法鉴定PIM1线性泛素化修饰及位点 | 第36-42页 |
| 5. PIM1线性泛素化修饰抑制其激酶活性 | 第42-44页 |
| 讨论 | 第44-46页 |
| 总结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 文献综述 | 第52-58页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 个人简历 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |