| 摘要 | 第5-9页 |
| ABSTRACT | 第9-13页 |
| 缩略词表 | 第17-19页 |
| 第一章 文献综述 着丝粒蛋白F研究进展 | 第19-32页 |
| 1.1 引言 | 第19页 |
| 1.2 CENPF结构 | 第19-21页 |
| 1.3 CENPF在有丝分裂中的作用 | 第21-24页 |
| 1.3.1 CENPF在有丝分裂各时期表达及定位 | 第21页 |
| 1.3.2 CENPF缺失造成有丝分裂缺陷 | 第21-24页 |
| 1.4 法尼基化对CENPF的转译后修饰 | 第24-25页 |
| 1.5 CENPF与肿瘤发生 | 第25-26页 |
| 1.6 展望 | 第26页 |
| 参考文献 | 第26-32页 |
| 第二章 实验研究 CENPF在小鼠卵母细胞减数分裂中的功能研究 | 第32-76页 |
| 2.1 引言 | 第32-33页 |
| 2.2 实验材料与研究方法 | 第33-41页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第33-36页 |
| 2.2.1.1 实验动物 | 第33页 |
| 2.2.1.2 实验仪器设备 | 第33-34页 |
| 2.2.1.3 实验相关试剂 | 第34-35页 |
| 2.2.1.4 抗体 | 第35-36页 |
| 2.2.2 研究方法 | 第36-41页 |
| 2.2.2.1 免疫印迹 | 第36-37页 |
| 2.2.2.2 免疫荧光染色 | 第37-38页 |
| 2.2.2.3 Cenpf-siRNA及CENPF-morpholino (MO)显微注射 | 第38-39页 |
| 2.2.2.4 药物处理 | 第39页 |
| 2.2.2.5 活细胞观察 | 第39-41页 |
| 2.2.2.6 统计学方法 | 第41页 |
| 2.3 实验结果及分析 | 第41-71页 |
| 2.3.1 CENPF在小鼠卵母细胞减数分裂过程中的蛋白表达及定位研究 | 第41-52页 |
| 2.3.1.1 Western Blot检测小鼠卵母细胞成熟各时期CENPF蛋白表达 | 第41-42页 |
| 2.3.1.2 免疫荧光检测CENPF在小鼠卵母细胞成熟各时期定位 | 第42-45页 |
| 2.3.1.3 微管干扰药物Nocodazole及Taxol处理卵母细胞后CENPF蛋白表达及定位研究 | 第45-48页 |
| 2.3.1.4 FTI SCH66336处理卵母细胞后CENPF蛋白表达及定位研究 | 第48-52页 |
| 2.3.2 CENPF在小鼠卵母细胞减数分裂过程中的功能研究 | 第52-71页 |
| 2.3.2.1 利用特异性Cenpf-siRNA敲减CENPF对卵母细胞成熟的影响 | 第52-55页 |
| 2.3.2.1.1 Cenpf-siRNA敲减效率检测 | 第52-53页 |
| 2.3.2.1.2 Cenpf-siRNA敲减造成卵母细胞GVBD及PBE失败 | 第53-54页 |
| 2.3.2.1.3 利用Cenpf-siRNA敲减CENPF导致MⅡ期卵母细胞染色体中期板集合及纺锤体组装异常 | 第54-55页 |
| 2.3.2.2 利用特异性CENPF-MO敲减CENPF对卵母细胞成熟的影响 | 第55-63页 |
| 2.3.2.2.1 CENPF-MO敲减效率检测 | 第56-57页 |
| 2.3.2.2.2 CENPF-MO敲减导致卵母细胞GVBD失败 | 第57-58页 |
| 2.3.2.2.3 特异性CENPF-MO敲减CENPF导致卵母细胞PB1排放失败 | 第58-59页 |
| 2.3.2.2.4 特异性CENPF-MO敲减CENPF导致纺锤体组装及染色体中期板集合异常 | 第59-63页 |
| 2.3.2.3 CENPF敲减后MⅠ期及MⅡ期卵母细胞染色体分析 | 第63-66页 |
| 2.3.2.3.1 CENPF敲减导致MⅡ期卵母细胞异倍性的增加 | 第63-64页 |
| 2.3.2.3.2 CENPF敲减导致MⅠ期卵母细胞姐妹染色单体动粒间距变宽 | 第64-66页 |
| 2.3.2.4 CENPF在减数分裂中作用机理的初步探究 | 第66-71页 |
| 2.3.2.4.1 CENPF缺失导致纺锤体抓取染色体失败 | 第66-68页 |
| 2.3.2.4.2 CENPF缺失激活SAC | 第68-71页 |
| 2.4 讨论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-76页 |
| 第三章 实验研究 CENPF在小鼠早期胚胎发育过程中的功能研究 | 第76-102页 |
| 3.1 引言 | 第76-77页 |
| 3.2 实验材料与研究方法 | 第77-79页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第77页 |
| 3.2.1.1 实验动物 | 第77页 |
| 3.2.1.2 实验仪器设备 | 第77页 |
| 3.2.1.3 实验相关试剂 | 第77页 |
| 3.2.2 研究方法 | 第77-79页 |
| 3.2.2.1 Western Blot免疫印迹 | 第77页 |
| 3.2.2.2 免疫荧光染色 | 第77-78页 |
| 3.2.2.3 体外受精及早期胚胎发育 | 第78页 |
| 3.2.2.4 MⅡ期卵母细胞、PN期胚胎及2-cell期胚胎的CENPF-morpholino (MO)显微注射 | 第78页 |
| 3.2.2.5 SCH66336药物处理 | 第78-79页 |
| 3.2.2.6 活细胞观察 | 第79页 |
| 3.2.2.7 统计学方法 | 第79页 |
| 3.3 实验结果及分析 | 第79-99页 |
| 3.3.1 CENPF在小鼠早期胚胎发育过程中的蛋白表达及定位研究 | 第79-88页 |
| 3.3.1.1 Western Blot检测CENPF在小鼠早期胚胎发育各个时期的表达 | 第79-80页 |
| 3.3.1.2 免疫荧光检测CENPF在小鼠早期胚胎发育各个时期定位 | 第80-82页 |
| 3.3.1.3 FTI (SCH66336)处理小鼠早期胚胎后CENPF蛋白表达及定位研究 | 第82-88页 |
| 3.3.2 CENPF在小鼠早期胚胎发育过程中的功能研究 | 第88-99页 |
| 3.3.2.1 MⅡ期卵母细胞注射CENPF-MO对小鼠早期胚胎发育的影响 | 第88-91页 |
| 3.3.2.2 PN期胚胎注射CENPF-MO对小鼠早期胚胎发育的影响 | 第91-94页 |
| 3.3.2.3 2-cell期胚胎注射CENPF-MO对小鼠早期胚胎发育的影响 | 第94-99页 |
| 3.4 讨论 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-102页 |
| 结论 | 第102-103页 |
| 附录 | 第103-109页 |
| 致谢 | 第109-112页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第112页 |
