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三种蛋白水解物对成骨细胞的促增殖和抗凋亡作用

摘要第8-9页
英文摘要第9-10页
1 引言第11-21页
    1.1 骨质疏松症的研究进展第11-13页
        1.1.1 骨质疏松症的定义第11-12页
        1.1.2 骨质疏松的危害第12页
        1.1.3 骨质疏松的发病机理第12-13页
        1.1.4 骨质疏松症的药物治疗弊端第13页
    1.2 蛋白质的摄入与骨质疏松症的关系第13-15页
        1.2.1 蛋白摄入量和骨密度的关系第14页
        1.2.2 蛋白摄入与骨折的关系第14页
        1.2.3 蛋白摄入与骨代谢的关系第14-15页
    1.3 明胶、大豆蛋白和酪蛋白概述第15-19页
        1.3.1 明胶的特性和应用第15页
        1.3.2 大豆蛋白的特性和应用第15-16页
        1.3.3 酪蛋白的特性和应用第16页
        1.3.4 明胶水解物的生物活性第16-17页
        1.3.5 大豆蛋白水解物的生物活性第17-18页
        1.3.6 酪蛋白水解物的生物活性第18-19页
        1.3.7 三种蛋白水解物的骨健康作用的研究进展第19页
    1.4 研究目的和意义第19-20页
    1.5 研究的主要内容第20-21页
2 材料与方法第21-30页
    2.1 试验材料第21-23页
        2.1.1 原料与试剂第21-22页
        2.1.2 主要仪器设备第22-23页
    2.2 研究技术路线第23页
    2.3 试验方法第23-28页
        2.3.1 蛋白水解前处理第23页
        2.3.2 木瓜蛋白酶活力的测定第23-25页
        2.3.3 蛋白水解物的制备第25页
        2.3.4 蛋白水解物的水解度(DH)测定第25-26页
        2.3.5 细胞培养第26页
        2.3.6 细胞增殖检测第26页
        2.3.7 细胞周期循环检测第26页
        2.3.8 细胞凋亡检测第26-27页
        2.3.9 氨基酸分析第27页
        2.3.10 基因芯片及荧光定量RT-PCR分析基因表达变化分析第27-28页
        2.3.11 Western-blot分析成骨细胞中蛋白表达变化第28页
    2.4 数据统计第28-30页
3 结果与分析第30-44页
    3.1 蛋白水解物的制备第30-32页
        3.1.1 木瓜蛋白酶活力的测定第30页
        3.1.2 游离氨基含量测定第30-31页
        3.1.3 蛋白质水解物水解度与时间曲线第31页
        3.1.4 蛋白质水解物的制备及水解度的测定第31-32页
    3.2 三种蛋白水解物对人成骨细胞的增殖影响第32-35页
        3.2.1 光学显微镜观察结果第32页
        3.2.2 CCK-8 法检测结果第32-35页
    3.3 三种蛋白水解物对人成骨细胞的周期循环的影响第35-36页
    3.4 三种蛋白水解物对人成骨细胞的凋亡的影响第36-40页
        3.4.1 依托泊苷和氟化钠IC50测定第36-37页
        3.4.2 三种蛋白水解物对成骨细胞凋亡的预防作用第37-38页
        3.4.3 三种蛋白水解物对成骨细胞凋亡的逆转作用第38-40页
    3.5 三种蛋白水解物氨基酸组分分析第40-41页
    3.6 基因芯片检测和荧光定量RT-PCR检测结果第41-42页
    3.7 Western-Blot检测结果第42-44页
4 讨论第44-48页
    4.1 三种蛋白水解物对成骨细胞增殖的影响第44-45页
    4.2 三种蛋白水解物对成骨细胞周期的影响第45页
    4.3 三种蛋白水解物对成骨细胞抗凋亡作用第45页
    4.4 三种蛋白水解物促骨健康作用与氨基酸组成的分析第45-46页
    4.5 明胶水解物作用成骨细胞分子机制第46-47页
    4.6 存在的问题第47-48页
5 结论第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-58页
附录A:细胞增殖作用的光镜观察结果第58-61页
附录B:目标基因的荧光定量RT-PCR结果第61-63页
攻读硕士期间发表的学术论文第63页

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