摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 引言 | 第11-21页 |
1.1 骨质疏松症的研究进展 | 第11-13页 |
1.1.1 骨质疏松症的定义 | 第11-12页 |
1.1.2 骨质疏松的危害 | 第12页 |
1.1.3 骨质疏松的发病机理 | 第12-13页 |
1.1.4 骨质疏松症的药物治疗弊端 | 第13页 |
1.2 蛋白质的摄入与骨质疏松症的关系 | 第13-15页 |
1.2.1 蛋白摄入量和骨密度的关系 | 第14页 |
1.2.2 蛋白摄入与骨折的关系 | 第14页 |
1.2.3 蛋白摄入与骨代谢的关系 | 第14-15页 |
1.3 明胶、大豆蛋白和酪蛋白概述 | 第15-19页 |
1.3.1 明胶的特性和应用 | 第15页 |
1.3.2 大豆蛋白的特性和应用 | 第15-16页 |
1.3.3 酪蛋白的特性和应用 | 第16页 |
1.3.4 明胶水解物的生物活性 | 第16-17页 |
1.3.5 大豆蛋白水解物的生物活性 | 第17-18页 |
1.3.6 酪蛋白水解物的生物活性 | 第18-19页 |
1.3.7 三种蛋白水解物的骨健康作用的研究进展 | 第19页 |
1.4 研究目的和意义 | 第19-20页 |
1.5 研究的主要内容 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-30页 |
2.1 试验材料 | 第21-23页 |
2.1.1 原料与试剂 | 第21-22页 |
2.1.2 主要仪器设备 | 第22-23页 |
2.2 研究技术路线 | 第23页 |
2.3 试验方法 | 第23-28页 |
2.3.1 蛋白水解前处理 | 第23页 |
2.3.2 木瓜蛋白酶活力的测定 | 第23-25页 |
2.3.3 蛋白水解物的制备 | 第25页 |
2.3.4 蛋白水解物的水解度(DH)测定 | 第25-26页 |
2.3.5 细胞培养 | 第26页 |
2.3.6 细胞增殖检测 | 第26页 |
2.3.7 细胞周期循环检测 | 第26页 |
2.3.8 细胞凋亡检测 | 第26-27页 |
2.3.9 氨基酸分析 | 第27页 |
2.3.10 基因芯片及荧光定量RT-PCR分析基因表达变化分析 | 第27-28页 |
2.3.11 Western-blot分析成骨细胞中蛋白表达变化 | 第28页 |
2.4 数据统计 | 第28-30页 |
3 结果与分析 | 第30-44页 |
3.1 蛋白水解物的制备 | 第30-32页 |
3.1.1 木瓜蛋白酶活力的测定 | 第30页 |
3.1.2 游离氨基含量测定 | 第30-31页 |
3.1.3 蛋白质水解物水解度与时间曲线 | 第31页 |
3.1.4 蛋白质水解物的制备及水解度的测定 | 第31-32页 |
3.2 三种蛋白水解物对人成骨细胞的增殖影响 | 第32-35页 |
3.2.1 光学显微镜观察结果 | 第32页 |
3.2.2 CCK-8 法检测结果 | 第32-35页 |
3.3 三种蛋白水解物对人成骨细胞的周期循环的影响 | 第35-36页 |
3.4 三种蛋白水解物对人成骨细胞的凋亡的影响 | 第36-40页 |
3.4.1 依托泊苷和氟化钠IC50测定 | 第36-37页 |
3.4.2 三种蛋白水解物对成骨细胞凋亡的预防作用 | 第37-38页 |
3.4.3 三种蛋白水解物对成骨细胞凋亡的逆转作用 | 第38-40页 |
3.5 三种蛋白水解物氨基酸组分分析 | 第40-41页 |
3.6 基因芯片检测和荧光定量RT-PCR检测结果 | 第41-42页 |
3.7 Western-Blot检测结果 | 第42-44页 |
4 讨论 | 第44-48页 |
4.1 三种蛋白水解物对成骨细胞增殖的影响 | 第44-45页 |
4.2 三种蛋白水解物对成骨细胞周期的影响 | 第45页 |
4.3 三种蛋白水解物对成骨细胞抗凋亡作用 | 第45页 |
4.4 三种蛋白水解物促骨健康作用与氨基酸组成的分析 | 第45-46页 |
4.5 明胶水解物作用成骨细胞分子机制 | 第46-47页 |
4.6 存在的问题 | 第47-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-58页 |
附录A:细胞增殖作用的光镜观察结果 | 第58-61页 |
附录B:目标基因的荧光定量RT-PCR结果 | 第61-63页 |
攻读硕士期间发表的学术论文 | 第63页 |