| 摘要 | 第6-7页 |
| 英文摘要 | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-23页 |
| 1.1 犬细小病毒病概述 | 第14-16页 |
| 1.1.1 犬细小病毒 | 第14页 |
| 1.1.2 犬细小病毒的流行与变异 | 第14-15页 |
| 1.1.3 犬细小病毒病致病机理及临床症状 | 第15-16页 |
| 1.1.3.1 致病机理 | 第15-16页 |
| 1.1.3.2 临床症状 | 第16页 |
| 1.1.4 犬细小病毒病的诊断与防治 | 第16页 |
| 1.1.4.1 犬细小病毒病的检测 | 第16页 |
| 1.1.4.2 犬细小病毒病的治疗 | 第16页 |
| 1.2 犬细小病毒的分子生物学特性 | 第16-18页 |
| 1.2.1 犬细小病毒形态结构 | 第16-17页 |
| 1.2.2 犬细小病毒基因组结构 | 第17页 |
| 1.2.3 犬细小病毒蛋白及其主要功能特点 | 第17-18页 |
| 1.3 犬细小病毒病疫苗研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3.1 商品化犬细小病毒病疫苗 | 第18页 |
| 1.3.2 新型疫苗的研究进展 | 第18-19页 |
| 1.4 密码子优化 | 第19-20页 |
| 1.5 犬瘟热概况 | 第20-21页 |
| 1.5.1 犬瘟热病毒 | 第20-21页 |
| 1.5.2 犬瘟热疫苗概况 | 第21页 |
| 1.5.3 犬瘟热病毒反向遗传技术研究进展 | 第21页 |
| 1.6 研究的目的与意义 | 第21-23页 |
| 第二章 实验部分 | 第23-35页 |
| 2.1 材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 病毒株和细胞 | 第23页 |
| 2.1.2 质粒 | 第23页 |
| 2.1.3 高免血清和实验动物 | 第23页 |
| 2.1.4 主要试剂和仪器 | 第23-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-27页 |
| 2.2.1 密码子优化CPVVP2蛋白基因的合成 | 第24页 |
| 2.2.2 引物设计与合成 | 第24页 |
| 2.2.3 包含目的基因的重组病毒基因组全长cDNA的构建 | 第24页 |
| 2.2.4 重组病毒的拯救 | 第24-25页 |
| 2.2.5 RT-PCR鉴定重组病毒 | 第25页 |
| 2.2.6 间接免疫荧光检测救获病毒 | 第25-26页 |
| 2.2.7 Western bloting | 第26页 |
| 2.2.8 重组病毒生长曲线的测定 | 第26页 |
| 2.2.9 在重组病毒r20/8-CPVVP2opti和r20/8-CPVVP2感染细胞中CPV VP2蛋白表达量的比较 | 第26页 |
| 2.2.10 重组病毒免疫小鼠 | 第26-27页 |
| 2.2.11 血凝抑制试验 | 第27页 |
| 2.2.12 中和试验 | 第27页 |
| 2.3 结果 | 第27-34页 |
| 2.3.0 表达密码子优化CPV VP2蛋白重组CDV基因组全长cDNA的构建 | 第27页 |
| 2.3.1 重组病毒的拯救 | 第27页 |
| 2.3.2 重组病毒的鉴定 | 第27-31页 |
| 2.3.2.1 RT-PCR鉴定 | 第27-28页 |
| 2.3.2.2 免疫荧光检测VP2的表达 | 第28-29页 |
| 2.3.2.3 WESTERN BLOT检测VP2蛋白的表达 | 第29-30页 |
| 2.3.2.4 重组病毒生长曲线的测定 | 第30-31页 |
| 2.3.3 两种重组病毒VP2蛋白表达量的比较 | 第31-32页 |
| 2.3.4 重组病毒的免疫效果评价 | 第32-34页 |
| 2.2.4.1 小鼠的免疫试验及血凝抑制抗体与中和抗体检测结果 | 第32-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 全文结论 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-41页 |
| 附录 | 第41-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 作者简历 | 第47页 |
