| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第9-11页 |
| 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 轮状病毒病原学特征 | 第11-12页 |
| 1.1 轮状病毒的形态结构和理化性质 | 第11-12页 |
| 1.2 轮状病毒的培养特性 | 第12页 |
| 2 轮状病毒的分型 | 第12-13页 |
| 3 轮状病毒的基因组结构、蛋白及功能 | 第13-15页 |
| 3.1 轮状病毒的基因组结构特征 | 第13页 |
| 3.2 轮状病毒的蛋白及其作用 | 第13-15页 |
| 4 猪轮状病毒的致病机理 | 第15-16页 |
| 5 猪轮状病毒的诊断技术 | 第16-17页 |
| 5.1 猪轮状病毒临床诊断 | 第16页 |
| 5.2 猪轮状病毒实验室诊断 | 第16-17页 |
| 6 抗猪轮状病毒单克隆抗体的研究进展 | 第17-18页 |
| 7 研究目的和意义 | 第18-19页 |
| 研究内容一 猪轮状病毒GD-01-2015的全基因序列分析 | 第19-50页 |
| 1 实验材料 | 第19页 |
| 1.1 主要试剂和生物材料 | 第19页 |
| 1.2 主要仪器 | 第19页 |
| 2 方法 | 第19-24页 |
| 2.1 病毒的分离与增殖 | 第19-21页 |
| 2.2 病毒的全基因测序 | 第21-23页 |
| 2.3 病毒全基因测序结果分析 | 第23-24页 |
| 3 结果 | 第24-48页 |
| 3.1 病毒的分离与增殖 | 第24-25页 |
| 3.2 PoRV-GD-01-2015全基因测序 | 第25-27页 |
| 3.3 PoRV-GD-01-2015测序分析 | 第27-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 研究内容二 猪轮状病毒单克隆抗体的制备 | 第50-60页 |
| 1 实验材料 | 第50-51页 |
| 1.1 病毒、实验动物和细胞 | 第50页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第50-51页 |
| 1.3 主要实验仪器 | 第51页 |
| 2 实验方法 | 第51-55页 |
| 2.1 PoRV病毒的扩增 | 第51页 |
| 2.2 PoRV病毒的浓缩 | 第51-52页 |
| 2.3 透射电镜观察病毒 | 第52页 |
| 2.4 动物免疫 | 第52页 |
| 2.5 细胞融合 | 第52-53页 |
| 2.6 间接免疫荧光法(IFA)筛选阳性杂交瘤细胞 | 第53页 |
| 2.7 阳性细胞的亚克隆 | 第53页 |
| 2.8 杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第53-54页 |
| 2.9 腹水的制备及抗体的纯化 | 第54页 |
| 2.10 单克隆抗体的生物学特性鉴定 | 第54-55页 |
| 3 结果 | 第55-58页 |
| 3.1 透射电镜观察结果 | 第55-56页 |
| 3.2 阳性杂交瘤细胞株的建立 | 第56-57页 |
| 3.3 单克隆抗体亚类鉴定 | 第57页 |
| 3.4 Western-blot鉴定 | 第57页 |
| 3.5 单克隆抗体的特异性鉴定 | 第57-58页 |
| 3.6 单克隆抗体纯化效果 | 第58页 |
| 4 讨论 | 第58-60页 |
| 研究内容三 猪轮状病毒双夹心ELISA方法的建立 | 第60-72页 |
| 1 实验材料 | 第60-61页 |
| 1.1 病毒和抗体 | 第60页 |
| 1.2 主要实验试剂 | 第60-61页 |
| 1.3 主要实验仪器 | 第61页 |
| 2 实验方法 | 第61-64页 |
| 2.1 单克隆抗体的相加ELISA实验 | 第61页 |
| 2.2 抗体的标记 | 第61-62页 |
| 2.3 双夹心ELISA方法的建立 | 第62-63页 |
| 2.4 检测限的摸索 | 第63页 |
| 2.5 交叉反应实验 | 第63页 |
| 2.6 批内重复性和批间重复性实验 | 第63-64页 |
| 3 结果 | 第64-71页 |
| 3.1 相加ELISA实验结果 | 第64页 |
| 3.2 双夹心ELISA方法的建立 | 第64-68页 |
| 3.3 检测限的摸索 | 第68-69页 |
| 3.4 交叉反应实验结果 | 第69页 |
| 3.5 批内重复性和批间重复性实验结果 | 第69-71页 |
| 4 讨论 | 第71-72页 |
| 全文总结 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-78页 |
| 附录 | 第78-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第82-83页 |