摘要 | 第9-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 引言 | 第12-22页 |
1.1 犊牛腹泻概述 | 第12-13页 |
1.1.1 细菌性腹泻 | 第12页 |
1.1.2 病毒性腹泻 | 第12页 |
1.1.3 寄生虫性腹泻 | 第12-13页 |
1.1.4 营养缺乏性腹泻 | 第13页 |
1.2 犊牛大肠杆菌性腹泻 | 第13-14页 |
1.2.1 病原学研究 | 第13页 |
1.2.2 抗原特性 | 第13页 |
1.2.3 流行特点 | 第13-14页 |
1.2.4 临床症状和病理变化 | 第14页 |
1.3 产肠毒素性大肠杆菌 | 第14-19页 |
1.3.1 耐热肠毒素 | 第15页 |
1.3.2 不耐热肠毒素 | 第15-18页 |
1.3.3 黏附因子 | 第18-19页 |
1.4 大肠杆菌性犊牛腹泻病的防治 | 第19-20页 |
1.4.1 药物防治 | 第19页 |
1.4.2 一般性预防措施 | 第19页 |
1.4.3 疫苗防治 | 第19-20页 |
1.5 研究目的与意义 | 第20-22页 |
2 材料和方法 | 第22-28页 |
2.1 实验材料 | 第22-23页 |
2.1.1 菌株、实验动物、细胞系 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂 | 第22页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第22-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-28页 |
2.2.1 毒素突变体的表达与鉴定 | 第23-25页 |
2.2.2 毒素突变体的纯化 | 第25-26页 |
2.2.3 LT-Ⅱc1的提取与纯化 | 第26页 |
2.2.4 细胞毒性的检测 | 第26页 |
2.2.5 毒素诱导机体免疫的研究 | 第26-27页 |
2.2.6 体外中和实验 | 第27-28页 |
3 结果 | 第28-36页 |
3.1 毒素突变体的表达与鉴定 | 第28-29页 |
3.1.1 突变基因的构建 | 第28页 |
3.1.2 毒素突变体的表达与鉴定 | 第28-29页 |
3.2 毒素突变体纯化与毒性检验 | 第29-31页 |
3.2.1 rLT-IIc1(T13I-T14I)的纯化 | 第29-30页 |
3.2.2 rLT-IIc1(T13I-T14I)细胞毒性检测 | 第30-31页 |
3.3 毒素突变体免疫原性检测 | 第31-32页 |
3.3.1 免疫特异性血清抗体Ig G测定 | 第31-32页 |
3.3.2 交叉反应检测 | 第32页 |
3.4 体外中和实验 | 第32-36页 |
3.4.1 细胞半数致死量(CD50)的测定 | 第32-33页 |
3.4.2 抗体的中和效价测定 | 第33-36页 |
4 讨论 | 第36-40页 |
4.1 融合PCR技术 | 第36页 |
4.2 突变点的选取 | 第36-37页 |
4.3 其他可能影响LT-Iic毒力位点 | 第37-38页 |
4.4 口服减毒疫苗应用前景 | 第38-40页 |
5 结论 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-49页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第49页 |