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大肠杆菌不耐热肠毒素2型突变体的构建及其抗原性研究

摘要第9-10页
英文摘要第10-11页
1 引言第12-22页
    1.1 犊牛腹泻概述第12-13页
        1.1.1 细菌性腹泻第12页
        1.1.2 病毒性腹泻第12页
        1.1.3 寄生虫性腹泻第12-13页
        1.1.4 营养缺乏性腹泻第13页
    1.2 犊牛大肠杆菌性腹泻第13-14页
        1.2.1 病原学研究第13页
        1.2.2 抗原特性第13页
        1.2.3 流行特点第13-14页
        1.2.4 临床症状和病理变化第14页
    1.3 产肠毒素性大肠杆菌第14-19页
        1.3.1 耐热肠毒素第15页
        1.3.2 不耐热肠毒素第15-18页
        1.3.3 黏附因子第18-19页
    1.4 大肠杆菌性犊牛腹泻病的防治第19-20页
        1.4.1 药物防治第19页
        1.4.2 一般性预防措施第19页
        1.4.3 疫苗防治第19-20页
    1.5 研究目的与意义第20-22页
2 材料和方法第22-28页
    2.1 实验材料第22-23页
        2.1.1 菌株、实验动物、细胞系第22页
        2.1.2 主要试剂第22页
        2.1.3 主要仪器设备第22-23页
    2.2 实验方法第23-28页
        2.2.1 毒素突变体的表达与鉴定第23-25页
        2.2.2 毒素突变体的纯化第25-26页
        2.2.3 LT-Ⅱc1的提取与纯化第26页
        2.2.4 细胞毒性的检测第26页
        2.2.5 毒素诱导机体免疫的研究第26-27页
        2.2.6 体外中和实验第27-28页
3 结果第28-36页
    3.1 毒素突变体的表达与鉴定第28-29页
        3.1.1 突变基因的构建第28页
        3.1.2 毒素突变体的表达与鉴定第28-29页
    3.2 毒素突变体纯化与毒性检验第29-31页
        3.2.1 rLT-IIc1(T13I-T14I)的纯化第29-30页
        3.2.2 rLT-IIc1(T13I-T14I)细胞毒性检测第30-31页
    3.3 毒素突变体免疫原性检测第31-32页
        3.3.1 免疫特异性血清抗体Ig G测定第31-32页
        3.3.2 交叉反应检测第32页
    3.4 体外中和实验第32-36页
        3.4.1 细胞半数致死量(CD50)的测定第32-33页
        3.4.2 抗体的中和效价测定第33-36页
4 讨论第36-40页
    4.1 融合PCR技术第36页
    4.2 突变点的选取第36-37页
    4.3 其他可能影响LT-Iic毒力位点第37-38页
    4.4 口服减毒疫苗应用前景第38-40页
5 结论第40-41页
致谢第41-42页
参考文献第42-49页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第49页

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