摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
第一章 文献综述 | 第9-37页 |
1.1 基于工具酶的DNA扩增检测技术 | 第9-26页 |
1.1.1 聚合酶链式反应 | 第10-11页 |
1.1.2 链置换扩增 | 第11-13页 |
1.1.3 滚环扩增 | 第13-16页 |
1.1.4 环介导等温扩增 | 第16-18页 |
1.1.5 交叉引物等温扩增 | 第18-20页 |
1.1.6 依赖解旋酶的等温扩增 | 第20-21页 |
1.1.7 重组酶聚合酶扩增技术 | 第21-23页 |
1.1.8 指数扩增技术 | 第23-26页 |
1.2 RNA检测技术 | 第26-32页 |
1.2.1 RNA印迹法 | 第26-27页 |
1.2.2 反转录聚合酶链式反应 | 第27-28页 |
1.2.3 基于核酸序列的扩增 | 第28-29页 |
1.2.4 转录介导的扩增 | 第29-30页 |
1.2.5 信号介导的RNA扩增技术 | 第30-32页 |
1.3 核酸检测的发展及市场需求 | 第32-35页 |
1.3.1 分子诊断的发展历程 | 第32-33页 |
1.3.2 分子诊断现状及未来市场 | 第33-35页 |
1.4 本论文的研究意义与主要内容 | 第35-37页 |
第二章 基于双切口分子信标的等温扩增检测DNA新方法研究 | 第37-55页 |
2.1 引言 | 第37-38页 |
2.2 实验部分 | 第38-44页 |
2.2.1 仪器与试剂 | 第38-40页 |
2.2.2 基因组DNA的提取 | 第40-41页 |
2.2.3 荧光定量检测 | 第41-43页 |
2.2.3.1 实验条件 | 第42-43页 |
2.2.4 琼脂糖凝胶电泳 | 第43-44页 |
2.2.4.1 琼脂糖凝胶电泳的原理 | 第43页 |
2.2.4.2 琼脂糖凝胶电泳的制备及实验 | 第43-44页 |
2.3 结果与讨论 | 第44-53页 |
2.3.1 实验原理 | 第44-46页 |
2.3.2 DNA链的设计 | 第46-47页 |
2.3.3 副溶血弧菌基因组DNA的提取 | 第47-48页 |
2.3.4 条件优化 | 第48-50页 |
2.3.4.1 引物B1浓度优化 | 第48页 |
2.3.4.2 引物P1浓度优化 | 第48-49页 |
2.3.4.3 单切口分子信标与双切口分子信标的效率对比 | 第49-50页 |
2.3.5 方法灵敏度检测 | 第50-51页 |
2.3.6 方法特异性 | 第51-53页 |
2.3.6.1 方法特异性验证 | 第51-52页 |
2.3.6.2 不同位点错配相同碱基个数的特异性效果 | 第52-53页 |
2.3.7 实验抗干扰检测 | 第53页 |
2.4 小结 | 第53-55页 |
第三章 基于等温扩增检测DNA及RNA新方法的研究 | 第55-76页 |
3.1 引言 | 第55-56页 |
3.2 实验设计 | 第56-60页 |
3.2.1 实验设计方案一 | 第56-57页 |
3.2.1.1 实验原理 | 第56-57页 |
3.2.1.2 DNA链的设计 | 第57页 |
3.2.2 实验设计方案二 | 第57-59页 |
3.2.2.1 实验原理 | 第57-58页 |
3.2.2.2 DNA链的设计 | 第58-59页 |
3.2.3 实验设计方案三 | 第59-60页 |
3.2.3.1 实验原理 | 第59页 |
3.2.3.2 DNA链的设计 | 第59-60页 |
3.3 实验部分 | 第60-62页 |
3.3.1 仪器与试剂 | 第60-61页 |
3.3.2 甜菜碱在核酸扩增实验中的应用 | 第61-62页 |
3.3.3 海藻糖在核酸扩增实验中的应用 | 第62页 |
3.4 结果与讨论 | 第62-74页 |
3.4.1 大肠杆菌 16S r RNA提取 | 第62-65页 |
3.4.1.1 RNA的表征 | 第63-65页 |
3.4.2 实时荧光检测 | 第65-68页 |
3.4.2.1 方案一实时荧光检测 | 第66-67页 |
3.4.2.2 方案二实时荧光检测 | 第67-68页 |
3.4.2.3 方案三实时荧光检测 | 第68页 |
3.4.3 实验条件优化 | 第68-69页 |
3.4.4 实验方案一DNA灵敏度检测 | 第69-70页 |
3.4.5 实验方案一RNA检测 | 第70-71页 |
3.4.6 实验方案二DNA灵敏度检测 | 第71-72页 |
3.4.7 实验方案二RNA检测 | 第72页 |
3.4.8 甜菜碱与海藻糖对等温实验的影响 | 第72-73页 |
3.4.9 实验方案三DNA灵敏度检测 | 第73-74页 |
3.5 实验方案三RNA检测 | 第74-75页 |
3.6 小结 | 第75-76页 |
结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-87页 |
附录:论文中使用的缩略词 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第89-90页 |