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基于切刻酶的等温核酸扩增检测新技术的研究

摘要第3-4页
ABSTRACT第4-5页
第一章 文献综述第9-37页
    1.1 基于工具酶的DNA扩增检测技术第9-26页
        1.1.1 聚合酶链式反应第10-11页
        1.1.2 链置换扩增第11-13页
        1.1.3 滚环扩增第13-16页
        1.1.4 环介导等温扩增第16-18页
        1.1.5 交叉引物等温扩增第18-20页
        1.1.6 依赖解旋酶的等温扩增第20-21页
        1.1.7 重组酶聚合酶扩增技术第21-23页
        1.1.8 指数扩增技术第23-26页
    1.2 RNA检测技术第26-32页
        1.2.1 RNA印迹法第26-27页
        1.2.2 反转录聚合酶链式反应第27-28页
        1.2.3 基于核酸序列的扩增第28-29页
        1.2.4 转录介导的扩增第29-30页
        1.2.5 信号介导的RNA扩增技术第30-32页
    1.3 核酸检测的发展及市场需求第32-35页
        1.3.1 分子诊断的发展历程第32-33页
        1.3.2 分子诊断现状及未来市场第33-35页
    1.4 本论文的研究意义与主要内容第35-37页
第二章 基于双切口分子信标的等温扩增检测DNA新方法研究第37-55页
    2.1 引言第37-38页
    2.2 实验部分第38-44页
        2.2.1 仪器与试剂第38-40页
        2.2.2 基因组DNA的提取第40-41页
        2.2.3 荧光定量检测第41-43页
            2.2.3.1 实验条件第42-43页
        2.2.4 琼脂糖凝胶电泳第43-44页
            2.2.4.1 琼脂糖凝胶电泳的原理第43页
            2.2.4.2 琼脂糖凝胶电泳的制备及实验第43-44页
    2.3 结果与讨论第44-53页
        2.3.1 实验原理第44-46页
        2.3.2 DNA链的设计第46-47页
        2.3.3 副溶血弧菌基因组DNA的提取第47-48页
        2.3.4 条件优化第48-50页
            2.3.4.1 引物B1浓度优化第48页
            2.3.4.2 引物P1浓度优化第48-49页
            2.3.4.3 单切口分子信标与双切口分子信标的效率对比第49-50页
        2.3.5 方法灵敏度检测第50-51页
        2.3.6 方法特异性第51-53页
            2.3.6.1 方法特异性验证第51-52页
            2.3.6.2 不同位点错配相同碱基个数的特异性效果第52-53页
        2.3.7 实验抗干扰检测第53页
    2.4 小结第53-55页
第三章 基于等温扩增检测DNA及RNA新方法的研究第55-76页
    3.1 引言第55-56页
    3.2 实验设计第56-60页
        3.2.1 实验设计方案一第56-57页
            3.2.1.1 实验原理第56-57页
            3.2.1.2 DNA链的设计第57页
        3.2.2 实验设计方案二第57-59页
            3.2.2.1 实验原理第57-58页
            3.2.2.2 DNA链的设计第58-59页
        3.2.3 实验设计方案三第59-60页
            3.2.3.1 实验原理第59页
            3.2.3.2 DNA链的设计第59-60页
    3.3 实验部分第60-62页
        3.3.1 仪器与试剂第60-61页
        3.3.2 甜菜碱在核酸扩增实验中的应用第61-62页
        3.3.3 海藻糖在核酸扩增实验中的应用第62页
    3.4 结果与讨论第62-74页
        3.4.1 大肠杆菌 16S r RNA提取第62-65页
            3.4.1.1 RNA的表征第63-65页
        3.4.2 实时荧光检测第65-68页
            3.4.2.1 方案一实时荧光检测第66-67页
            3.4.2.2 方案二实时荧光检测第67-68页
            3.4.2.3 方案三实时荧光检测第68页
        3.4.3 实验条件优化第68-69页
        3.4.4 实验方案一DNA灵敏度检测第69-70页
        3.4.5 实验方案一RNA检测第70-71页
        3.4.6 实验方案二DNA灵敏度检测第71-72页
        3.4.7 实验方案二RNA检测第72页
        3.4.8 甜菜碱与海藻糖对等温实验的影响第72-73页
        3.4.9 实验方案三DNA灵敏度检测第73-74页
    3.5 实验方案三RNA检测第74-75页
    3.6 小结第75-76页
结论第76-77页
参考文献第77-87页
附录:论文中使用的缩略词第87-88页
致谢第88-89页
攻读硕士学位期间发表的论文目录第89-90页

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