中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
略缩语 | 第12-14页 |
前言 | 第14-19页 |
研究现状与成果 | 第14-17页 |
研究目的与方法 | 第17-19页 |
一、RASAL2在卵巢癌临床样本中的表达 | 第19-26页 |
1.1 对象和方法 | 第19-22页 |
1.1.1 卵巢组织样本 | 第19-20页 |
1.1.2 主要试剂 | 第20页 |
1.1.3 主要仪器 | 第20页 |
1.1.4 肿瘤细胞总RNA提取 | 第20-21页 |
1.1.5 逆转合成第一链cDNA | 第21-22页 |
1.1.6 实时定量荧光PCR | 第22页 |
1.1.7 统计学分析 | 第22页 |
1.2 结果 | 第22-23页 |
1.2.1 RASAL2在卵巢癌组织中下调并且与临床数据相关 | 第22-23页 |
1.3 讨论 | 第23-26页 |
二、RASAL2负向调控卵巢癌细胞成瘤与侵袭迁移能力 | 第26-38页 |
2.1 对象和方法 | 第26-33页 |
2.1.1 细胞培养 | 第26页 |
2.1.2 主要试剂 | 第26-27页 |
2.1.3 主要仪器 | 第27页 |
2.1.4 慢病毒感染与细胞筛选 | 第27-28页 |
2.1.5 软琼脂集落形成实验 | 第28页 |
2.1.6 基于Transwell小室的侵袭与迁移实验 | 第28-29页 |
2.1.7 划痕实验 | 第29-30页 |
2.1.8 肿瘤细胞总RNA提取 | 第30页 |
2.1.9 逆转合成第一链cDNA | 第30-31页 |
2.1.10 实时定量荧光PCR | 第31-32页 |
2.1.11 免疫印迹分析 | 第32页 |
2.1.12 动物模型 | 第32-33页 |
2.1.13 统计学分析 | 第33页 |
2.2 结果 | 第33-35页 |
2.2.1 RASAL2敲低可以促进卵巢癌非锚定状态下集落形成能力 | 第33-34页 |
2.2.2 RASAL2敲低可以促进卵巢癌细胞的迁移与侵袭能力 | 第34-35页 |
2.2.3 RASAL2敲低可以促进卵巢癌细胞体内成瘤 | 第35页 |
2.3 讨论 | 第35-38页 |
三、RASAL2负向调控卵巢癌细胞EMT | 第38-50页 |
3.1 对象和方法 | 第38-44页 |
3.1.1 细胞培养 | 第38-39页 |
3.1.2 主要试剂 | 第39页 |
3.1.3 主要仪器 | 第39页 |
3.1.4 肿瘤细胞总RNA提取 | 第39-40页 |
3.1.5 逆转合成第一链cDNA | 第40-41页 |
3.1.6 实时荧光定量PCR | 第41-42页 |
3.1.7 免疫荧光分析 | 第42页 |
3.1.8 免疫印迹分析 | 第42-43页 |
3.1.9 免疫组织化学分析 | 第43-44页 |
3.1.10 统计学分析 | 第44页 |
3.2 结果 | 第44-48页 |
3.2.1 在体外RASAL2调控卵巢癌EMT标志的表达 | 第44-46页 |
3.2.2 在体外RASAL2调控卵巢癌EMT标志的表达 | 第46-47页 |
3.2.3 RASAL2表达与E-cadherin表达正相关 | 第47-48页 |
3.3 讨论 | 第48-50页 |
四、RASAL2抑制Ras-ERK通路在卵巢癌中的活化 | 第50-58页 |
4.1 对象和方法 | 第50-54页 |
4.1.1 细胞培养 | 第50页 |
4.1.2 主要试剂 | 第50-51页 |
4.1.3 主要仪器 | 第51页 |
4.1.4 Ras活性检测 | 第51-52页 |
4.1.5 免疫印迹分析 | 第52-53页 |
4.1.6 免疫组织化学分析 | 第53-54页 |
4.1.7 统计学分析 | 第54页 |
4.2 结果 | 第54-56页 |
4.2.1 在体外RASAL2敲低促进Ras-ERK通路活化 | 第54-55页 |
4.2.2 在体内RASAL2敲低促进Ras-ERK通路活化 | 第55-56页 |
4.3 讨论 | 第56-58页 |
五、RASAL2抑癌作用依赖于Ras-ERK通路 | 第58-68页 |
5.1 对象和方法 | 第58-64页 |
5.1.1 细胞培养 | 第58页 |
5.1.2 主要试剂 | 第58-59页 |
5.1.3 主要仪器 | 第59页 |
5.1.4 软琼脂集落形成实验 | 第59-60页 |
5.1.5 基于transwell小室的侵袭与迁移实验 | 第60-61页 |
5.1.6 划痕实验 | 第61页 |
5.1.7 免疫荧光分析 | 第61-62页 |
5.1.8 免疫印迹分析 | 第62-63页 |
5.1.9 统计学分析 | 第63-64页 |
5.2 结果 | 第64-65页 |
5.2.1 抑制ERK通路逆转RASAL2敲低介导的EMT | 第64-65页 |
5.2.2 抑制ERK通路逆转RASAL2敲低介导的促癌作用 | 第65页 |
5.3 讨论 | 第65-68页 |
全文结论 | 第68-69页 |
论文创新点 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-76页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第76-77页 |
综述 Ras通路在信号转导以及抗癌治疗中的研究进展 | 第77-96页 |
综述参考文献 | 第89-96页 |
致谢 | 第96页 |