| 摘要 | 第2-4页 |
| Summary | 第4-5页 |
| 缩写词（Abbreviation） | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-26页 |
| 1 苜蓿的遗传转化研究 | 第11-16页 |
| 1.1 苜蓿组织培养的研究 | 第11-14页 |
| 1.1.1 苜蓿组织培养中基因型的选择 | 第11-12页 |
| 1.1.2 苜蓿组织培养中培养基的选择 | 第12页 |
| 1.1.3 苜蓿组织培养中外植体的选择 | 第12-13页 |
| 1.1.4 苜蓿组织培养中细胞生长调节物质的应用 | 第13-14页 |
| 1.2 苜蓿遗传转化受体的研究 | 第14-16页 |
| 1.2.1 直接分化转化受体系统 | 第14页 |
| 1.2.2 外植体转化受体系统 | 第14-15页 |
| 1.2.3 愈伤组织转化受体系统 | 第15页 |
| 1.2.4 原生质体转化受体系统 | 第15页 |
| 1.2.5 胚状体转化受体系统 | 第15-16页 |
| 2 苜蓿转基因工程 | 第16-21页 |
| 2.1 苜蓿转基因方法 | 第16-18页 |
| 2.1.1 农杆菌介导法 | 第16-17页 |
| 2.1.2 基因枪法 | 第17页 |
| 2.1.3 花粉管通道法 | 第17-18页 |
| 2.1.4 电击法 | 第18页 |
| 2.1.5 PEG法 | 第18页 |
| 2.2 苜蓿基因工程研究进展 | 第18-21页 |
| 2.2.1 抗非生物胁迫转基因苜蓿的研究 | 第19页 |
| 2.2.2 抗生物胁迫转基因苜蓿的研究 | 第19页 |
| 2.2.3 抗除草剂转基因苜蓿的研究 | 第19-20页 |
| 2.2.4 优良品质转基因苜蓿的研究 | 第20-21页 |
| 3 苜蓿抗臌胀病育种研究进展 | 第21-24页 |
| 3.1 臌胀病发生机理 | 第21页 |
| 3.2 臌胀病引起因子 | 第21-23页 |
| 3.2.1 初始消化速率 | 第21-22页 |
| 3.2.2 可溶性蛋白 | 第22页 |
| 3.2.3 类脂物 | 第22页 |
| 3.2.4 皂素 | 第22-23页 |
| 3.2.5 果胶物质 | 第23页 |
| 3.2.6 缩合单宁 | 第23页 |
| 3.3 低初始消化速率选择的苜蓿选择育种 | 第23-24页 |
| 3.4 生物技术在苜蓿抗臌胀病育种中的应用 | 第24页 |
| 3.5 基因工程在苜蓿抗臌胀病育种中的应用 | 第24页 |
| 4 本课题的研究目的与意义 | 第24-26页 |
| 第二章 紫花苜蓿高效再生体系的优化 | 第26-36页 |
| 2.1 试验材料 | 第26页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 2.1.2 试验试剂与植物激素 | 第26页 |
| 2.1.3 主要试验仪器 | 第26页 |
| 2.1.4 主要培养基 | 第26页 |
| 2.2 试验方法 | 第26-29页 |
| 2.2.1 无菌苗的获得 | 第26页 |
| 2.2.2 愈伤组织的诱导 | 第26-28页 |
| 2.2.3 愈伤组织的分化培养 | 第28页 |
| 2.2.4 生根培养 | 第28-29页 |
| 2.2.5 生长发育 | 第29页 |
| 2.3 结果与分析 | 第29-34页 |
| 2.3.1 愈伤组织诱导 | 第29-31页 |
| 2.3.2 愈伤组织分化 | 第31-33页 |
| 2.3.3 芽生根 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 2.5 小结 | 第35-36页 |
| 第三章 农杆菌介导的BAN基因在紫花苜蓿中的转化研究 | 第36-46页 |
| 3.1 试验材料 | 第36-37页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第36页 |
| 3.1.2 质粒和农杆菌菌株 | 第36页 |
| 3.1.3 试验试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.4 农杆菌培养基 | 第37页 |
| 3.1.5 主要试验仪器 | 第37页 |
| 3.2 试验方法 | 第37-39页 |
| 3.2.1 筛选培养中草铵膦选择压得确定 | 第37页 |
| 3.2.2 筛选培养中抗生素种类及其浓度的确定 | 第37-38页 |
| 3.2.3 农杆菌介导的基因转化方法 | 第38页 |
| 3.2.4 转化体系的建立 | 第38-39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-44页 |
| 3.3.1 选择培养中草铵膦选择压的确定 | 第39页 |
| 3.3.2 选择培养中抗生素种类及其浓度的确定 | 第39-41页 |
| 3.3.3 转化体系的建立 | 第41-44页 |
| 3.4 讨论 | 第44-45页 |
| 3.5 小结 | 第45-46页 |
| 第四章 转基因苜蓿的分子检测及表达分析 | 第46-58页 |
| 4.1 试验材料 | 第46页 |
| 4.1.1 材料 | 第46页 |
| 4.1.2 试验试剂 | 第46页 |
| 4.1.3 主要试验仪器 | 第46页 |
| 4.2 试验方法 | 第46-51页 |
| 4.2.1 T_0代转基因植株的草铵膦筛选 | 第46页 |
| 4.2.2 植物DNA提取及工程菌质粒DNA的提取 | 第46-47页 |
| 4.2.3 转基因植株PCR检测 | 第47-48页 |
| 4.2.4 转基因植株的Southern blot检测 | 第48-49页 |
| 4.2.5 植物总RNA提取及c DNA制备 | 第49页 |
| 4.2.6 RT-PCR检测 | 第49-50页 |
| 4.2.7 q RT-PCR检测 | 第50页 |
| 4.2.8 转基因苜蓿ANR酶活性及缩合单宁含量测定 | 第50-51页 |
| 4.3 结果与分析 | 第51-56页 |
| 4.3.1 草铵膦筛选结果 | 第51页 |
| 4.3.2 转基因植株PCR检测结果 | 第51页 |
| 4.3.3 转基因植株Southern blot检测结果 | 第51-53页 |
| 4.3.4 转基因植株BAN基因表达分析 | 第53-54页 |
| 4.3.5 转基因苜蓿ANR酶活性及缩合单宁含量测定结果 | 第54-56页 |
| 4.4 讨论 | 第56-57页 |
| 4.5 小结 | 第57-58页 |
| 第五章 结论及展望 | 第58-60页 |
| 5.1 结论 | 第58页 |
| 5.2 展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 附图 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 导师简介 | 第72-73页 |
| 个人简介 | 第73-74页 |
