| 摘要 | 第3-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 第一章 前言 | 第14-21页 |
| 第一节 鼻咽癌与二亚硝基哌嗪概述 | 第14页 |
| 第二节 AKR1B10与肿瘤概述 | 第14-18页 |
| 第三节 技术路线 | 第18-21页 |
| 第二章 AKR1B10与鼻咽癌发生发展及转移的相关性研究 | 第21-39页 |
| 1 实验仪器与材料 | 第21-22页 |
| 1.1 实验仪器 | 第21页 |
| 1.2 材料与试剂 | 第21-22页 |
| 1.3 试剂溶液配制 | 第22页 |
| 2 实验方法 | 第22-27页 |
| 2.1 免疫组织化学法检测鼻咽癌病理组织切片中AKR1B10的表达情况 | 第22-24页 |
| 2.2 ELISA法检测鼻咽癌患者血清AKR1B10浓度 | 第24-27页 |
| 2.2.1 鼻咽癌患者血清AKR1B10浓度检测 | 第24-25页 |
| 2.2.2 鼻咽癌患者血清AKR1B10浓度检测与鼻咽癌临床特征的相关性分析 | 第25-27页 |
| 3 统计学分析 | 第27页 |
| 4 实验结果 | 第27-36页 |
| 4.1 AKR1B10在鼻咽癌病理组织和对照组织中的表达情况 | 第27-28页 |
| 4.2 血清中AKR1B10表达水平与鼻咽癌发生发展的关系 | 第28-36页 |
| 4.2.1 健康人群、鼻咽炎症患者、鼻咽癌患者血清中AKR1B10表达水平 | 第28-34页 |
| 4.2.2 鼻咽癌患者血清AKR1B10表达水平与鼻咽癌临床特征的相关性分析 | 第34-36页 |
| 5 分析讨论 | 第36-39页 |
| 第三章 DNP诱导AKR1B10表达参与鼻咽癌转移研究 | 第39-87页 |
| 1 主要实验材料 | 第40-48页 |
| 1.1 化学合成致癌物DNP | 第40页 |
| 1.2 细胞株 | 第40页 |
| 1.3 引物和表达载体 | 第40-42页 |
| 1.4 主要仪器与设备 | 第42-43页 |
| 1.5 主要材料与试剂 | 第43-44页 |
| 1.6 主要试剂配制 | 第44-48页 |
| 2 实验方法 | 第48-58页 |
| 2.1 MTT法检测DNP对6-10B、5-8F细胞的非毒性浓度 | 第48-50页 |
| 2.2 DNP处理6-10B细胞诱导AKR1B10表达 | 第50-51页 |
| 2.3 构建pc-DNA 3.1-AKR1B10过表达载体 | 第51-54页 |
| 2.4 pcDNA3.1(+)-AKR1B10重组质粒转染6-10B细胞诱导AKR1B10高表达 | 第54页 |
| 2.5 siRNA干扰6-10B和5-8F细胞沉默AKR1B10表达 | 第54页 |
| 2.6 siRNA干扰AKR1B10后加DNP处理6-10B、5-8F细胞 | 第54页 |
| 2.7 qPCR和Western Blotting检测不同处理条件下AKR1B10的表达情况 | 第54-56页 |
| 2.8 DNP诱导AKR1B10高表达对NPC生物学功能改变的影响研究 | 第56-57页 |
| 2.8.1 克隆形成实验 | 第56-57页 |
| 2.8.2 Transwell迁移实验 | 第57页 |
| 2.8.3 Transwell侵袭实验 | 第57页 |
| 2.9 细胞免疫荧光检测AKR1B10在鼻咽癌细胞6-10B、5-8F中的表达及定位 | 第57-58页 |
| 3 统计学分析 | 第58页 |
| 4 实验结果 | 第58-84页 |
| 4.1 MTT法检测DNP对6-10B、5-8F细胞的非毒性浓度 | 第58-60页 |
| 4.2 pcDNA 3.1-AKR1B10过表达载体构建与验证 | 第60-64页 |
| 4.3 qPCR法筛选对6-10B和5-8F细胞干扰效果最佳的siRNA | 第64-66页 |
| 4.4 qPCR和Western-blotting检测AKR1B10的表达情况 | 第66-74页 |
| 4.4.1 过表达和RNAiAKR1B10 mRNA表达的qPCR结果 | 第66-68页 |
| 4.4.2 siRNA+DNP处理后AKR1B10 mRNA表达的qPCR结果 | 第68-70页 |
| 4.4.3 DNP促进6-10B和5-8F细胞表达AKR1B10结果 | 第70-71页 |
| 4.4.4 siRNA干扰6-10B和5-8F细胞后加DNP处理检测AKR1B10表达结果 | 第71-74页 |
| 4.5 细胞免疫荧光检测AKR1B10在鼻咽癌细胞中的亚定位结果 | 第74-75页 |
| 4.6 AKR1B10表达水平对鼻咽癌6-10B、5-8F细胞迁移侵袭转移能力的影响 | 第75-84页 |
| 4.6.1 克隆形成实验结果 | 第75-78页 |
| 4.6.2 Transwell迁移实验结果 | 第78-81页 |
| 4.6.3 Transwell侵袭实验结果 | 第81-84页 |
| 5 分析讨论 | 第84-87页 |
| 全文总结 | 第87页 |
| 参考文献 | 第87-94页 |
| 附录1:文献综述一 | 第94-118页 |
| 参考文献 | 第112-118页 |
| 附录2:文献综述二 | 第118-138页 |
| 参考文献 | 第130-138页 |
| 缩词简表 | 第138-139页 |
| 在学期间发表论文清单 | 第139-140页 |
| 致谢 | 第140页 |
