| 中文摘要 | 第12-14页 |
| ABSTRACT | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-22页 |
| 1.1 黄连素 | 第16-18页 |
| 1.1.1 中药与肿瘤治疗 | 第16页 |
| 1.1.2 黄连素的特性 | 第16-17页 |
| 1.1.3 黄连素与肿瘤治疗 | 第17-18页 |
| 1.2 GRP78与肿瘤 | 第18-20页 |
| 1.2.1 GRP78的结构 | 第18-19页 |
| 1.2.2 GRP78的定位与功能 | 第19-20页 |
| 1.3 本论文的研究目的与意义 | 第20-22页 |
| 第二章 黄连素对肿瘤细胞的作用研究 | 第22-36页 |
| 2.1 引言 | 第22页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第22-24页 |
| 2.2.0 细胞株 | 第22页 |
| 2.2.1 材料及主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.2 主要实验设备与仪器 | 第23页 |
| 2.2.3 主要试剂配制方法 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-30页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第24-25页 |
| 2.3.2 MTT检测 | 第25-26页 |
| 2.3.3 细胞克隆形成实验 | 第26页 |
| 2.3.4 细胞凋亡检测 | 第26-27页 |
| 2.3.5 RNA的提取及cDNA的合成 | 第27-28页 |
| 2.3.6 qRT-PCR检测基因的表达情况 | 第28页 |
| 2.3.7 Western blotting检测蛋白表达量 | 第28-29页 |
| 2.3.8 统计学分析 | 第29-30页 |
| 2.4 结果与分析 | 第30-34页 |
| 2.4.1 黄连素可抑制肿瘤细胞的存活与增殖 | 第30-32页 |
| 2.4.2 黄连素诱导肿瘤细胞凋亡 | 第32-33页 |
| 2.4.3 黄连素对肿瘤凋亡相关因子表达的影响 | 第33-34页 |
| 2.5 小结 | 第34-36页 |
| 第三章 黄连素通过促进GRP78细胞膜转位诱导肿瘤细胞凋亡 | 第36-45页 |
| 3.1 引言 | 第36页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第36-37页 |
| 3.2.1 细胞株和质粒 | 第36页 |
| 3.2.2 材料及主要试剂 | 第36页 |
| 3.2.3 主要实验设备与仪器 | 第36-37页 |
| 3.3 实验方法 | 第37-39页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第37页 |
| 3.3.2 Western blotting检测蛋白表达 | 第37页 |
| 3.3.3 RNA的提取及cDNA的合成 | 第37页 |
| 3.3.4 qRT-PCR检测基因的表达情况 | 第37页 |
| 3.3.5 免疫荧光技术检测细胞内GRP78的分布 | 第37-38页 |
| 3.3.6 细胞膜蛋白、细胞浆蛋白的提取 | 第38页 |
| 3.3.7 细胞转染 | 第38页 |
| 3.3.8 MTT检测细胞存活 | 第38页 |
| 3.3.9 细胞凋亡检测 | 第38-39页 |
| 3.3.10 统计学分析 | 第39页 |
| 3.4 结果与分析 | 第39-44页 |
| 3.4.1 黄连素对肿瘤细胞内GRP78表达无明显影响 | 第39-40页 |
| 3.4.2 黄连素引起了肿瘤细胞内GRP78膜转位 | 第40-41页 |
| 3.4.3 肿瘤细胞内GRP78膜转位与其凋亡相关 | 第41-44页 |
| 3.5 小结 | 第44-45页 |
| 第四章 黄连素诱导肿瘤细胞内ROS升高对GRP78膜转位的影响 | 第45-51页 |
| 4.1 引言 | 第45页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第45-46页 |
| 4.2.1 细胞株 | 第45页 |
| 4.2.2 材料及主要试剂 | 第45页 |
| 4.2.3 主要实验设备与仪器 | 第45-46页 |
| 4.3 实验方法 | 第46-47页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第46页 |
| 4.3.2 ROS水平检测 | 第46页 |
| 4.3.3 免疫荧光染色检测GRP78的分布 | 第46页 |
| 4.3.4 细胞膜蛋白、细胞浆蛋白的提取 | 第46页 |
| 4.3.5 Western blotting检测蛋白表达 | 第46页 |
| 4.3.6 统计学分析 | 第46-47页 |
| 4.4 结果与分析 | 第47-49页 |
| 4.4.1 黄连素引起肿瘤细胞内ROS水平升高 | 第47页 |
| 4.4.2 黄连素引发ROS水平升高会诱导肿瘤细胞内GRP78发生膜转位 | 第47-49页 |
| 4.5 小结 | 第49-51页 |
| 总结与展望 | 第51-53页 |
| 1. 总结 | 第51-52页 |
| 2. 展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 个人简介及联系方式 | 第61-62页 |
