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花叶矢竹叶绿体基因组的克隆及调控叶绿体发育的研究

摘要第4-5页
ABSTRACT第5-6页
第一章 文献综述第10-18页
    1.1 叶绿体研究进展第10-13页
        1.1.1 叶绿体的起源第10页
        1.1.2 叶绿体的结构第10-11页
        1.1.3 叶绿体的发育第11-13页
    1.2 叶绿体基因组研究进展第13-16页
        1.2.1 叶绿体基因组的结构第13页
        1.2.2 叶绿体基因组用于竹系统进化的研究第13-14页
        1.2.3 叶绿体基因第14-16页
    1.3 研究目的与意义第16页
    1.4 技术路线第16-18页
第二章 花叶矢竹叶绿体基因组的克隆及其进化分析第18-40页
    2.1 实验材料第18页
    2.2 实验试剂及器材第18-19页
        2.2.1 试剂第18-19页
        2.2.2 器材第19页
    2.3 实验方法第19-30页
        2.3.1 总DNA的提取第19-20页
        2.3.2 琼脂糖凝胶电泳第20页
        2.3.3 长片段扩增引物的设计第20-21页
        2.3.4 花叶矢竹叶绿体基因组长片段序列的扩增第21-23页
        2.3.5 短片段验证长片段扩增的正确性第23-24页
        2.3.6 花叶矢竹绿叶叶绿体基因组序列的获得第24-25页
            2.3.6.1 大肠杆菌(DH5α)感受态细胞的制备第24-25页
            2.3.6.2 胶回收长片段产物与载体连接第25页
            2.3.6.3 重组载体的转化及阳性克隆的筛选第25页
        2.3.7 叶绿体基因组系统进化树的构建第25-26页
        2.3.8 叶绿体基因组简单重复序列(SSR)位点的搜寻第26页
        2.3.9 核基因GBSSI的获得第26-27页
            2.3.9.1 慈竹、金竹和早园竹总DNA的提取第26页
            2.3.9.2 GBSSI序列的扩增第26页
            2.3.9.3 胶回收产物与载体连接第26页
            2.3.9.4 重组载体的转化及阳性克隆的筛选第26-27页
        2.3.10 核基因GBSSI的分析及进化树的构建第27页
        2.3.11 叶绿体基因以及核基因GBSSI的多态性分析第27-30页
    2.4 结果与分析第30-37页
        2.4.1 花叶矢竹叶绿体基因组结构分析第30-31页
        2.4.2 花叶矢竹、早园竹、金竹和慈竹的GBSSI序列的获得第31-32页
        2.4.3 花叶矢竹的进化位置第32-35页
        2.4.4 叶绿体基因组之间的比对第35-36页
        2.4.5 叶绿体基因组中的SSR第36页
        2.4.6 叶绿体基因和核基因GBSSI的多态性第36-37页
    2.5 讨论第37-40页
        2.5.1 花叶矢竹叶绿体基因组结构分析第37-38页
        2.5.2 花叶矢竹进化地位分析第38-39页
        2.5.3 叶绿体基因组进化模式分析第39-40页
第三章 花叶矢竹正常绿叶叶绿体基因表达与叶绿体发育第40-56页
    3.1 实验材料第40-41页
    3.2 实验试剂及实验仪器第41页
    3.3 实验方法第41-45页
        3.3.1 叶绿体基因的选择第41页
        3.3.2 叶绿体基因荧光定量PCR引物的设计第41页
        3.3.3 花叶矢竹叶片RNA的提取第41-43页
            3.3.3.1 Trizol法提取花叶矢竹叶片的RNA第42页
            3.3.3.2 试剂盒法提取花叶矢竹叶片的总RNA第42-43页
        3.3.4 RNA反转录成cDNA第43-44页
        3.3.5 透射电镜观察叶片的叶绿体超微结构第44页
            3.3.5.1 透射电镜实验样品的制备步骤第44页
            3.3.5.2 透射电镜观察第44页
        3.3.6 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第44-45页
    3.4 结果与分析第45-53页
        3.4.1 花叶矢竹叶绿体基因的选择第45-46页
        3.4.2 叶绿体基因引物的设计第46页
        3.4.3 花叶矢竹总RNA的提取第46-47页
        3.4.4 叶绿体超微结构观察第47-49页
            3.4.4.1 花叶矢竹不同发育阶段正常绿叶的叶绿体超微结构第47-48页
            3.4.4.2 花叶矢竹同一绿叶不同部位的叶绿体超微结构第48-49页
        3.4.5 叶绿体基因的表达模式第49-53页
            3.4.5.1 叶绿体基因在花叶矢竹不同发育阶段绿叶的表达模式第49-51页
            3.4.5.2 叶绿体基因在花叶矢竹绿叶不同部位的表达模式第51-53页
    3.5 讨论第53-56页
        3.5.1 正常叶片叶绿体发育过程结构变化第53页
        3.5.2 叶绿体基因表达与叶绿体发育的关系第53-56页
第四章 花叶矢竹变异叶叶绿体基因表达与叶绿体发育第56-72页
    4.1 实验材料第56-57页
    4.2 实验试剂及实验器材第57页
    4.3 实验方法第57-58页
    4.4 结果与分析第58-69页
        4.4.1 叶绿体基因第58页
        4.4.2 总RNA的提取第58页
        4.4.3 叶绿体超微结构观察第58-61页
            4.4.3.1 花叶矢竹不同发育阶段白化叶的叶绿体超微结构第58-60页
            4.4.3.2 花叶矢竹同一白化叶不同部位的叶绿体超微结构第60页
            4.4.3.3 花叶矢竹不同复绿叶的叶绿体超微结构第60-61页
        4.4.4 叶绿体基因的表达模式第61-69页
            4.4.4.1 叶绿体基因在花叶矢竹不同发育阶段白化叶的表达模式第61-63页
            4.4.4.2 白化叶与绿叶之间显著性差异表达的叶绿体基因第63-64页
            4.4.4.3 叶绿体基因在花叶矢竹同一片白化叶不同部位的表达模式第64-66页
            4.4.4.4 叶绿体基因在花叶矢竹不同复绿程度白化叶的表达模式第66-67页
            4.4.4.5 花叶矢竹不同复绿程度白化叶与发育相应阶段绿叶之间显著性差异表达的叶绿体基因第67-69页
    4.5 讨论第69-72页
        4.5.1 变异叶叶绿体结构的变化第69-70页
            4.5.1.1 白化叶叶绿体发育过程结构变化第69页
            4.5.1.2 叶片复绿过程中叶绿体结构变化第69-70页
        4.5.2 变异叶叶绿体基因表达特异性第70-72页
            4.5.2.1 白化叶叶绿体基因表达模式特异性第70页
            4.5.2.2 复绿叶叶绿体基因表达模式特异性第70-72页
第五章 结论与展望第72-73页
    5.1 结论第72页
    5.2 展望第72-73页
参考文献第73-81页
个人简介第81-82页
致谢第82页

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