摘要 | 第4-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第10-18页 |
1.1 叶绿体研究进展 | 第10-13页 |
1.1.1 叶绿体的起源 | 第10页 |
1.1.2 叶绿体的结构 | 第10-11页 |
1.1.3 叶绿体的发育 | 第11-13页 |
1.2 叶绿体基因组研究进展 | 第13-16页 |
1.2.1 叶绿体基因组的结构 | 第13页 |
1.2.2 叶绿体基因组用于竹系统进化的研究 | 第13-14页 |
1.2.3 叶绿体基因 | 第14-16页 |
1.3 研究目的与意义 | 第16页 |
1.4 技术路线 | 第16-18页 |
第二章 花叶矢竹叶绿体基因组的克隆及其进化分析 | 第18-40页 |
2.1 实验材料 | 第18页 |
2.2 实验试剂及器材 | 第18-19页 |
2.2.1 试剂 | 第18-19页 |
2.2.2 器材 | 第19页 |
2.3 实验方法 | 第19-30页 |
2.3.1 总DNA的提取 | 第19-20页 |
2.3.2 琼脂糖凝胶电泳 | 第20页 |
2.3.3 长片段扩增引物的设计 | 第20-21页 |
2.3.4 花叶矢竹叶绿体基因组长片段序列的扩增 | 第21-23页 |
2.3.5 短片段验证长片段扩增的正确性 | 第23-24页 |
2.3.6 花叶矢竹绿叶叶绿体基因组序列的获得 | 第24-25页 |
2.3.6.1 大肠杆菌(DH5α)感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
2.3.6.2 胶回收长片段产物与载体连接 | 第25页 |
2.3.6.3 重组载体的转化及阳性克隆的筛选 | 第25页 |
2.3.7 叶绿体基因组系统进化树的构建 | 第25-26页 |
2.3.8 叶绿体基因组简单重复序列(SSR)位点的搜寻 | 第26页 |
2.3.9 核基因GBSSI的获得 | 第26-27页 |
2.3.9.1 慈竹、金竹和早园竹总DNA的提取 | 第26页 |
2.3.9.2 GBSSI序列的扩增 | 第26页 |
2.3.9.3 胶回收产物与载体连接 | 第26页 |
2.3.9.4 重组载体的转化及阳性克隆的筛选 | 第26-27页 |
2.3.10 核基因GBSSI的分析及进化树的构建 | 第27页 |
2.3.11 叶绿体基因以及核基因GBSSI的多态性分析 | 第27-30页 |
2.4 结果与分析 | 第30-37页 |
2.4.1 花叶矢竹叶绿体基因组结构分析 | 第30-31页 |
2.4.2 花叶矢竹、早园竹、金竹和慈竹的GBSSI序列的获得 | 第31-32页 |
2.4.3 花叶矢竹的进化位置 | 第32-35页 |
2.4.4 叶绿体基因组之间的比对 | 第35-36页 |
2.4.5 叶绿体基因组中的SSR | 第36页 |
2.4.6 叶绿体基因和核基因GBSSI的多态性 | 第36-37页 |
2.5 讨论 | 第37-40页 |
2.5.1 花叶矢竹叶绿体基因组结构分析 | 第37-38页 |
2.5.2 花叶矢竹进化地位分析 | 第38-39页 |
2.5.3 叶绿体基因组进化模式分析 | 第39-40页 |
第三章 花叶矢竹正常绿叶叶绿体基因表达与叶绿体发育 | 第40-56页 |
3.1 实验材料 | 第40-41页 |
3.2 实验试剂及实验仪器 | 第41页 |
3.3 实验方法 | 第41-45页 |
3.3.1 叶绿体基因的选择 | 第41页 |
3.3.2 叶绿体基因荧光定量PCR引物的设计 | 第41页 |
3.3.3 花叶矢竹叶片RNA的提取 | 第41-43页 |
3.3.3.1 Trizol法提取花叶矢竹叶片的RNA | 第42页 |
3.3.3.2 试剂盒法提取花叶矢竹叶片的总RNA | 第42-43页 |
3.3.4 RNA反转录成cDNA | 第43-44页 |
3.3.5 透射电镜观察叶片的叶绿体超微结构 | 第44页 |
3.3.5.1 透射电镜实验样品的制备步骤 | 第44页 |
3.3.5.2 透射电镜观察 | 第44页 |
3.3.6 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第44-45页 |
3.4 结果与分析 | 第45-53页 |
3.4.1 花叶矢竹叶绿体基因的选择 | 第45-46页 |
3.4.2 叶绿体基因引物的设计 | 第46页 |
3.4.3 花叶矢竹总RNA的提取 | 第46-47页 |
3.4.4 叶绿体超微结构观察 | 第47-49页 |
3.4.4.1 花叶矢竹不同发育阶段正常绿叶的叶绿体超微结构 | 第47-48页 |
3.4.4.2 花叶矢竹同一绿叶不同部位的叶绿体超微结构 | 第48-49页 |
3.4.5 叶绿体基因的表达模式 | 第49-53页 |
3.4.5.1 叶绿体基因在花叶矢竹不同发育阶段绿叶的表达模式 | 第49-51页 |
3.4.5.2 叶绿体基因在花叶矢竹绿叶不同部位的表达模式 | 第51-53页 |
3.5 讨论 | 第53-56页 |
3.5.1 正常叶片叶绿体发育过程结构变化 | 第53页 |
3.5.2 叶绿体基因表达与叶绿体发育的关系 | 第53-56页 |
第四章 花叶矢竹变异叶叶绿体基因表达与叶绿体发育 | 第56-72页 |
4.1 实验材料 | 第56-57页 |
4.2 实验试剂及实验器材 | 第57页 |
4.3 实验方法 | 第57-58页 |
4.4 结果与分析 | 第58-69页 |
4.4.1 叶绿体基因 | 第58页 |
4.4.2 总RNA的提取 | 第58页 |
4.4.3 叶绿体超微结构观察 | 第58-61页 |
4.4.3.1 花叶矢竹不同发育阶段白化叶的叶绿体超微结构 | 第58-60页 |
4.4.3.2 花叶矢竹同一白化叶不同部位的叶绿体超微结构 | 第60页 |
4.4.3.3 花叶矢竹不同复绿叶的叶绿体超微结构 | 第60-61页 |
4.4.4 叶绿体基因的表达模式 | 第61-69页 |
4.4.4.1 叶绿体基因在花叶矢竹不同发育阶段白化叶的表达模式 | 第61-63页 |
4.4.4.2 白化叶与绿叶之间显著性差异表达的叶绿体基因 | 第63-64页 |
4.4.4.3 叶绿体基因在花叶矢竹同一片白化叶不同部位的表达模式 | 第64-66页 |
4.4.4.4 叶绿体基因在花叶矢竹不同复绿程度白化叶的表达模式 | 第66-67页 |
4.4.4.5 花叶矢竹不同复绿程度白化叶与发育相应阶段绿叶之间显著性差异表达的叶绿体基因 | 第67-69页 |
4.5 讨论 | 第69-72页 |
4.5.1 变异叶叶绿体结构的变化 | 第69-70页 |
4.5.1.1 白化叶叶绿体发育过程结构变化 | 第69页 |
4.5.1.2 叶片复绿过程中叶绿体结构变化 | 第69-70页 |
4.5.2 变异叶叶绿体基因表达特异性 | 第70-72页 |
4.5.2.1 白化叶叶绿体基因表达模式特异性 | 第70页 |
4.5.2.2 复绿叶叶绿体基因表达模式特异性 | 第70-72页 |
第五章 结论与展望 | 第72-73页 |
5.1 结论 | 第72页 |
5.2 展望 | 第72-73页 |
参考文献 | 第73-81页 |
个人简介 | 第81-82页 |
致谢 | 第82页 |