| 中英文缩略写 | 第6-7页 |
| 第一部分 CD45异构体对HIV-1 gp120蛋白介导T细胞凋亡的影响 | 第7-47页 |
| 中文摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 材料与方法 | 第13-22页 |
| 1. 材料 | 第13-15页 |
| 2. 方法 | 第15-22页 |
| 2.1 Jurkat和J45.01细胞表面CD45表达的流式检测 | 第15-16页 |
| 2.2 gp120诱导细胞凋亡实验 | 第16页 |
| 2.3 细胞调亡的流式检测 | 第16页 |
| 2.4 质粒提取和测序鉴定 | 第16-17页 |
| 2.5 慢病毒包装并感染靶细胞 | 第17-18页 |
| 2.6 CD45异构体稳定表达细胞株的流式检测 | 第18页 |
| 2.7 Western Blot | 第18-20页 |
| 2.8 O-糖基化抑制实验 | 第20页 |
| 2.9 Lck活性抑制实验 | 第20-21页 |
| 2.10 统计学分析 | 第21-22页 |
| 实验结果 | 第22-38页 |
| 1. Jurkat和J45.01细胞表面CD45表达量的检测 | 第22页 |
| 2. CD45调节gp120介导的细胞凋亡 | 第22-25页 |
| 2.1 gp120对Jurkat和J45.01凋亡的影响 | 第22-24页 |
| 2.2 gp120浓度对细胞凋亡的影响 | 第24-25页 |
| 2.3 gp120不同抗体对细胞凋亡的影响 | 第25页 |
| 3. CD45RA/CD45RB/CD45RC/CD45RABC/CD45RO-J45.01稳转细胞系构建 | 第25-28页 |
| 3.1 CD45质粒提取鉴定 | 第26页 |
| 3.2 阳性对照质粒转染观察结果 | 第26页 |
| 3.3 CD45慢病毒感染Jurkat细胞鉴定结果 | 第26-27页 |
| 3.4 CD45异构体的表达鉴定 | 第27-28页 |
| 4. CD45异构体调节gp120诱导细胞凋亡能力比较 | 第28-29页 |
| 5. O-糖基化对细胞凋亡的影响 | 第29-31页 |
| 5.1 BG浓度对细胞凋亡的影响 | 第29-30页 |
| 5.2 CD45异构体细胞凋亡率比较 | 第30-31页 |
| 6. CD45异构体活性比较 | 第31-34页 |
| 6.1 Lck去磷酸化程度分析 | 第31-32页 |
| 6.2 Lck磷酸化程度分析 | 第32-34页 |
| 7. Lck抑制剂对凋亡的影响 | 第34-38页 |
| 7.1 PP2和HBA使用浓度的确定 | 第35页 |
| 7.2 PP2和HBA对凋亡的影响 | 第35-38页 |
| 讨论 | 第38-41页 |
| 研究结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 第二部分 携带GFP的SIV病毒株的构建 | 第47-77页 |
| 中文摘要 | 第47-48页 |
| Abstract | 第48-49页 |
| 引言 | 第49-51页 |
| 主要材料 | 第51-53页 |
| 实验方法 | 第53-66页 |
| 1. 载体构建方案 | 第53-56页 |
| 1.1 嵌合GFP的SIVmac239前病毒骨架构建技术路线 | 第53-54页 |
| 1.2 定点突变的位置分析及引物设计 | 第54页 |
| 1.3 SIV mac239-GFP 的鉴定方法 | 第54-56页 |
| 2. 载体构建方法 | 第56-59页 |
| 2.1 GFP片段的获取 | 第56页 |
| 2.2 定点突变实验 | 第56-57页 |
| 2.3 GFP片段与点突变后质粒连接 | 第57-58页 |
| 2.4 载体p239SpE3'-GFP与p239SpSp5,连接 | 第58-59页 |
| 3. 病毒的包装 | 第59-60页 |
| 4. 病毒的鉴定 | 第60-62页 |
| 4.1 P27蛋白含量测定 | 第60页 |
| 4.2 p27基因mRNA鉴定 | 第60-62页 |
| 4.3 病毒感染靶细胞 | 第62页 |
| 5. 常规实验方法 | 第62-66页 |
| 5.1 DNA凝胶回收 | 第62-63页 |
| 5.2 质粒小量提取 | 第63-64页 |
| 5.3 质粒小提中量提取 | 第64页 |
| 5.4 细胞培养 | 第64-66页 |
| 实验结果 | 第66-72页 |
| 1. 载体构建结果 | 第66-70页 |
| 1.1 GFP基因扩增 | 第66页 |
| 1.2 定点突变测序结果 | 第66-67页 |
| 1.3 GFP/质粒酶切结果 | 第67页 |
| 1.4 p239SpE3'-GFP质粒鉴定结果 | 第67-68页 |
| 1.5 质粒p239SpE3'-GFP和p239SpSp5,酶切连接 | 第68-69页 |
| 1.6 SIVmac239-GFP的酶切鉴定 | 第69页 |
| 1.7 测序鉴定结果 | 第69-70页 |
| 2. 病毒活性鉴定 | 第70-72页 |
| 2.1 GFP在293T细胞中表达 | 第70页 |
| 2.2 P27蛋白含量测定结果 | 第70页 |
| 2.3 p27基因mRNA鉴定结果 | 第70-71页 |
| 2.4 病毒感染活性鉴定 | 第71-72页 |
| 讨论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-77页 |
| 文献综述 | 第77-96页 |
| CD45分子在HIV-1感染中的作用研究进展 | 第77-85页 |
| 参考文献 | 第81-85页 |
| 唾液酸黏附素Siglec-1在疾病中作用的研究进展 | 第85-96页 |
| 参考文献 | 第91-96页 |
| 致谢 | 第96-97页 |
| 个人基本情况 | 第97-98页 |
