| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-18页 |
| ·仔鱼的免疫防御 | 第11页 |
| ·基因文库 | 第11-12页 |
| ·cDNA 文库构建策略 | 第12-13页 |
| ·经典cDNA 文库 | 第12页 |
| ·cDNA 全长文库 | 第12页 |
| ·均一化cDNA 文库 | 第12-13页 |
| ·cDNA 差减文库 | 第13页 |
| ·差异基因的高通量筛选 | 第13-17页 |
| ·差异显示反转录PCR | 第13页 |
| ·抑制消减杂交 | 第13-14页 |
| ·基因表达系列分析 | 第14页 |
| ·微阵列技术 | 第14页 |
| ·代表性差异分析法 | 第14页 |
| ·杂交监控差异分析法 | 第14页 |
| ·抑制性消减杂交(SSH)技术的基本原理 | 第14-15页 |
| ·进行抑制性消减杂交的技术要点 | 第15-17页 |
| ·研究背景、进展、目的及意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与实验方法 | 第18-28页 |
| ·红笛鲷的孵化 | 第18页 |
| ·溶藻弧菌培养 | 第18页 |
| ·样品的处理 | 第18页 |
| ·总RNA 提取及mRNA 纯化 | 第18-20页 |
| ·总RNA 的提取 | 第18-19页 |
| ·mRNA 的纯化 | 第19-20页 |
| ·SSH 差减文库的构建 | 第20-25页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第20页 |
| ·cDNA 第二链的合成 | 第20-21页 |
| ·Rsa Ⅰ酶切 | 第21页 |
| ·接头连接 | 第21-22页 |
| ·接头连接效率检测 | 第22-23页 |
| ·一次杂交 | 第23页 |
| ·二次杂交 | 第23页 |
| ·两轮PCR 扩增 | 第23-24页 |
| ·差减效率的检测 | 第24-25页 |
| ·PCR 产物的分子克隆 | 第25-26页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第25页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·PCR 产物与载体的连接 | 第25页 |
| ·转化 | 第25-26页 |
| ·阳性克隆的PCR 鉴定 | 第26页 |
| ·测序 | 第26页 |
| ·文库质量评价 | 第26-27页 |
| ·生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 3 实验结果 | 第28-36页 |
| ·总 RNA 质量鉴定 | 第28页 |
| ·mRNA 的纯化 | 第28-29页 |
| ·双链 cDNA 的合成及 RsaⅠ 酶切 | 第29页 |
| ·接头连接效率的检测 | 第29-30页 |
| ·差减杂交PCR 产物分析 | 第30页 |
| ·差减效率的检测 | 第30-31页 |
| ·阳性克隆的PCR 鉴定 | 第31-32页 |
| ·文库质量评价 | 第32页 |
| ·ESTs 生物信息学分析及功能分类 | 第32-33页 |
| ·差减文库中分离得到的ESTs | 第33-36页 |
| 4 讨论 | 第36-42页 |
| ·抑制性消减杂交技术(SSH) | 第36-37页 |
| ·文库质量检测 | 第37页 |
| ·测序结果讨论 | 第37-42页 |
| ·免疫防御应激蛋白 | 第38页 |
| ·细胞骨架相关蛋白 | 第38-39页 |
| ·核糖体相关蛋白 | 第39页 |
| ·能量和基础代谢相关蛋白 | 第39页 |
| ·细胞信号转导/粘附相关蛋白 | 第39-40页 |
| ·细胞周期/DNA 复制/蛋白调控/转录/翻译相关蛋白 | 第40页 |
| ·其他类蛋白 | 第40-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49-50页 |
| 导师简介 | 第50页 |