| 摘要 | 第11-13页 |
| ABSTRACT | 第13-15页 |
| 注释表 | 第16-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-39页 |
| 1 概述 | 第17-19页 |
| 1.1 功能性油脂简介 | 第17页 |
| 1.2 香榧及香榧籽油营养功能成分 | 第17-18页 |
| 1.3 香榧资源开发局限性及解决方法 | 第18-19页 |
| 2 内生真菌发酵产油脂优点 | 第19-24页 |
| 2.1 产生和宿主相同或相似的功能性油脂产物 | 第19-20页 |
| 2.2 利用纤维素降低发酵成本 | 第20-21页 |
| 2.3 代谢产物特殊作用 | 第21-24页 |
| 2.3.1 抗菌抑菌作用 | 第22页 |
| 2.3.2 抗肿瘤作用 | 第22页 |
| 2.3.3 抗虫作用 | 第22-23页 |
| 2.3.4 其他活性产物作用 | 第23-24页 |
| 3 内生真菌发酵产油脂国内外研究现状 | 第24-30页 |
| 3.1 脂肪酸合成机制研究 | 第24-27页 |
| 3.1.1 乙酰辅酶A羧化酶(ACC) | 第25-27页 |
| 3.1.2 脂肪酸脱氢酶 | 第27页 |
| 3.2 油脂产量影响因素研究 | 第27-30页 |
| 3.2.1 菌种对油脂产量的影响 | 第27-28页 |
| 3.2.2 发酵条件对油脂产量的影响 | 第28-29页 |
| 3.2.3 提取方法对油脂产量的影响 | 第29-30页 |
| 4 本研究的意义和主要研究内容 | 第30-32页 |
| 4.1 意义 | 第30-31页 |
| 4.2 主要研究内容 | 第31-32页 |
| 参考文献 | 第32-39页 |
| 第二章 产油脂香榧内生真菌的分离鉴定 | 第39-53页 |
| 1 引言 | 第39-40页 |
| 2 材料和方法 | 第40-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第40-41页 |
| 2.1.1 分离源 | 第40页 |
| 2.1.2 培养基及染色液 | 第40页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第40页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第40-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-42页 |
| 2.2.1 内生真菌分离 | 第41页 |
| 2.2.2 内生真菌的液体培养及发酵液预处理 | 第41页 |
| 2.2.3 产油脂内生真菌的筛选 | 第41-42页 |
| 2.2.4 油脂含量的测定 | 第42页 |
| 2.2.5 产油菌株形态学鉴定 | 第42页 |
| 2.2.6 基因组提取 | 第42页 |
| 2.2.7 PCR扩增和测序 | 第42页 |
| 3 结果和分析 | 第42-48页 |
| 3.1 香榧内生真菌的分离 | 第42-43页 |
| 3.2 内生真菌产油脂性能测定 | 第43页 |
| 3.3 产油脂香榧内生真菌的鉴定 | 第43-44页 |
| 3.3.1 形态学鉴定 | 第43-44页 |
| 3.3.2 XF-38菌株ITS序列测定 | 第44页 |
| 3.4 产油脂香榧内生真菌多样性分析 | 第44-48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 5 本章小结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 第三章 香榧内生真菌油脂的脂肪酸及不皂化物成分分析 | 第53-67页 |
| 1 引言 | 第53-54页 |
| 2 材料和方法 | 第54-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第54-55页 |
| 2.1.1 实验菌种 | 第54页 |
| 2.1.2 培养基 | 第54页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第54页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第54-55页 |
| 2.2 实验方法 | 第55-56页 |
| 2.2.1 油脂的提取及脂肪酸甲酯化 | 第55页 |
| 2.2.2 脂肪酸成分分析 | 第55页 |
| 2.2.3 不皂化物分离 | 第55页 |
| 2.2.4 不皂化物成分分析 | 第55-56页 |
| 2.2.5 脂肪酸的分离 | 第56页 |
| 3 结果和分析 | 第56-61页 |
| 3.1 脂肪酸成分分析 | 第56-58页 |
| 3.2 不皂化物成分分析及比较 | 第58页 |
| 3.3 特殊功能性脂肪酸的分离 | 第58-61页 |
| 3.3.1 亚油酸的分离 | 第59-60页 |
| 3.3.2 金松酸的分离 | 第60页 |
| 3.3.3 亚油酸和金松酸样品GC-MS质谱分析 | 第60-61页 |
| 4 讨论 | 第61-62页 |
| 5 本章小结 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 第四章 XF-38菌株发酵条件的优化 | 第67-83页 |
| 1 引言 | 第67-68页 |
| 2 材料和方法 | 第68-70页 |
| 2.1 实验材料 | 第68-69页 |
| 2.1.1 实验菌种 | 第68页 |
| 2.1.2 培养基 | 第68页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第68页 |
| 2.1.4 主要试剂和原料 | 第68-69页 |
| 2.2 实验方法 | 第69-70页 |
| 2.2.1 种子液制备 | 第69页 |
| 2.2.2 XF-38株生长曲线测定 | 第69页 |
| 2.2.3 发酵条件优化 | 第69-70页 |
| 2.2.4 纤维素作碳源发酵产油脂 | 第70页 |
| 2.2.5 最优发酵条件下XF-38菌株的金松酸含量测定 | 第70页 |
| 3 结果和分析 | 第70-78页 |
| 3.1 XF-38菌株生长曲线的测定 | 第70-71页 |
| 3.2 XF-38株发酵条件优化 | 第71-76页 |
| 3.2.1 最佳培养温度确定 | 第71页 |
| 3.2.2 最佳初始pH确定 | 第71-72页 |
| 3.2.3 最佳转速确定 | 第72-73页 |
| 3.2.4 最佳碳源确定 | 第73-74页 |
| 3.2.5 最佳氮源确定 | 第74-75页 |
| 3.2.6 碳氮比确定 | 第75页 |
| 3.2.7 补加葡萄糖发酵试验 | 第75页 |
| 3.2.8 最优发酵条件下菌丝体干重及油脂产量测定 | 第75-76页 |
| 3.3 纤维素作碳源发酵XF-38试验 | 第76-78页 |
| 3.3.1 酶处理前纤维素作碳源发酵试验 | 第76-77页 |
| 3.3.2 酶处理后纤维素作碳源发酵试验 | 第77-78页 |
| 3.4 最优发酵条件下XF-38菌株的金松酸含量测定 | 第78页 |
| 4 讨论 | 第78-79页 |
| 5 本章小结 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-83页 |
| 第五章 产功能性油脂香榧内生真菌脂肪酸合成关键酶的克隆表达研究 | 第83-99页 |
| 1 引言 | 第83-84页 |
| 2 材料和方法 | 第84-87页 |
| 2.1 实验材料 | 第84-85页 |
| 2.1.1 实验菌种 | 第84页 |
| 2.1.2 培养基 | 第84页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第84-85页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第85页 |
| 2.2 实验方法 | 第85-87页 |
| 2.2.1 乙酰辅酶A羧化酶活性测定 | 第85页 |
| 2.2.2 4-苯甲酰基-2,2,6,6-四甲基哌啶抑制ACC酶活实验 | 第85-86页 |
| 2.2.3 XF-38乙酰辅酶A羧化酶CT功能域基因的扩增 | 第86页 |
| 2.2.4 原核表达载体构建 | 第86-87页 |
| 2.2.5 目的蛋白在BL21中的表达 | 第87页 |
| 2.2.6 抑制剂对重组蛋白表达的影响 | 第87页 |
| 3 结果和分析 | 第87-93页 |
| 3.1 乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性 | 第87-88页 |
| 3.2 4-苯甲酰基-2,2,6,6-四甲基哌啶抑制ACC酶活测定 | 第88-89页 |
| 3.3 乙酰辅酶A羧化酶的CT功能域基因扩增 | 第89页 |
| 3.4 原核表达载体构建 | 第89-92页 |
| 3.5 目的蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达 | 第92页 |
| 3.6 抑制剂对重组蛋白表达的影响 | 第92-93页 |
| 4 讨论 | 第93-95页 |
| 5 本章小结 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-99页 |
| 全文总结与展望 | 第99-101页 |
| 论文创新点 | 第101-103页 |
| 附录Ⅰ | 第103-109页 |
| 附录Ⅱ | 第109-115页 |
| 附录Ⅲ | 第115-117页 |
| 致谢 | 第117-119页 |
| 攻读博士学位期间的相关研究论文 | 第119页 |
