摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
英文缩略词表 | 第14-15页 |
第1章 绪论 | 第15-21页 |
1.1 癌症及其治疗现状 | 第15页 |
1.2 光动力疗法(Photodynamic Therapy,PDT) | 第15-21页 |
1.2.1 光动力疗法简介 | 第15-17页 |
1.2.2 光敏剂 | 第17-18页 |
1.2.3 PDT抗肿瘤的作用机制 | 第18-21页 |
第2章 研究论文的立论依据、内容和目的意义 | 第21-23页 |
第3章 DVDMS介导的光动力疗法对人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖,凋亡,迁移能力的研究 | 第23-33页 |
3.1 实验材料和仪器 | 第23-25页 |
3.1.1 细胞来源与细胞培养 | 第23页 |
3.1.2 实验用仪器 | 第23-24页 |
3.1.3 光照装置 | 第24页 |
3.1.4 实验用试剂 | 第24-25页 |
3.2 实验方法 | 第25-28页 |
3.2.1 MTT法检测细胞毒效应 | 第25页 |
3.2.2 流式细胞仪结合ViaCount分析细胞存活 | 第25-26页 |
3.2.3 Annexin V-PE/7-AAD检测MDA-MB-231细胞凋亡 | 第26页 |
3.2.4 TUNEL染色检测细胞凋亡 | 第26-27页 |
3.2.5 划痕实验分析细胞迁移抑制 | 第27-28页 |
3.2.6 数据分析 | 第28页 |
3.3 实验结果 | 第28-31页 |
3.3.1 DVDMS-PDT对MDA-MB-231细胞的毒效应 | 第28-29页 |
3.3.2 DVDMS-PDT诱导MDA-MB-231细胞凋亡 | 第29-30页 |
3.3.3 DVDMS-PDT抑制MDA-MB-231细胞迁移 | 第30-31页 |
3.4 讨论 | 第31-33页 |
第4章 活性氧是DVDMS介导的光动力疗法引起F-actin微丝解聚和诱导细胞凋亡的关键因子 | 第33-39页 |
4.1 实验材料和仪器 | 第33页 |
4.1.1 实验用细胞系 | 第33页 |
4.1.2 实验用仪器 | 第33页 |
4.1.3 试验用试剂 | 第33页 |
4.2 实验方法 | 第33-35页 |
4.2.1 DCFH-DA检测细胞内活性氧 | 第33-34页 |
4.2.2 荧光显微镜观察DVDMS在MDA-MB-231中的亚细胞定位 | 第34页 |
4.2.3 FITC-phalloidin标记F-actin微丝 | 第34-35页 |
4.2.4 数据分析 | 第35页 |
4.3 实验结果 | 第35-38页 |
4.3.1 细胞内活性氧水平 | 第35-36页 |
4.3.2 DVDMS在MDA-MB-231细胞中的亚细胞定位 | 第36页 |
4.3.3 DVDMS-PDT处理后细胞微丝的形态变化 | 第36-37页 |
4.3.4 活性氧对F-actin微丝的影响 | 第37-38页 |
4.4 讨论 | 第38-39页 |
第5章 F-actin微丝对细胞凋亡和细胞迁移的影响 | 第39-45页 |
5.1 实验材料和仪器 | 第39页 |
5.1.1 实验用细胞系 | 第39页 |
5.1.2 实验用仪器 | 第39页 |
5.1.3 实验用试剂 | 第39页 |
5.2 实验方法 | 第39-41页 |
5.2.1 加入F-actin微丝稳定剂Jasplakinolide,荧光显微镜观察F-actin微丝 | 第39-40页 |
5.2.2 Jasplakinolide预处理后,Transwell小室检测细胞迁移 | 第40页 |
5.2.3 Jasplakinolide预处理后,Annexin V-PE/7-AAD检测细胞凋亡 | 第40-41页 |
5.2.4 数据分析 | 第41页 |
5.3 实验结果 | 第41-43页 |
5.3.1 Jasplakinolide预处理对微丝的影响 | 第41-42页 |
5.3.2 F-actin微丝对细胞迁移的影响 | 第42页 |
5.3.3 F-actin微丝对细胞凋亡的影响 | 第42-43页 |
5.4 讨论 | 第43-45页 |
第6章 DVDMS介导的光动力疗法诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡及自噬的研究 | 第45-57页 |
6.1 实验材料和仪器 | 第45-47页 |
6.1.1 细胞来源与细胞培养 | 第45页 |
6.1.2 实验用主要仪器 | 第45页 |
6.1.3 光照装置 | 第45-46页 |
6.1.4 实验用主要试剂 | 第46-47页 |
6.2 实验方法 | 第47-50页 |
6.2.1 MTT法检测细胞毒效应 | 第47-48页 |
6.2.2 Annexin V-PE/7-AAD检测细胞凋亡 | 第48页 |
6.2.3 MDC染色 | 第48-49页 |
6.2.4 蛋白免疫印迹法检测Caspase-3,LC3的表达变化 | 第49-50页 |
6.2.5 加入自噬抑制剂检测Caspase 3,LC3的表达变化 | 第50页 |
6.2.6 数据分析 | 第50页 |
6.3 实验结果 | 第50-55页 |
6.3.1 DVDMS-PDT对Eca-109细胞的毒效应 | 第50-51页 |
6.3.2 DVDMS-PDT诱导Eca-109细胞凋亡 | 第51-53页 |
6.3.3 DVDMS-PDT诱导Eca-109细胞自噬 | 第53-55页 |
6.4 讨论 | 第55-57页 |
第7章 活性氧是DVDMS-PDT诱导Eca-109细胞MAPK通路激活,HO-1表达上调的主要机制 | 第57-63页 |
7.1 实验材料和仪器 | 第57页 |
7.1.1 实验用细胞系 | 第57页 |
7.1.2 实验用主要仪器 | 第57页 |
7.1.3 实验用主要试剂 | 第57页 |
7.2 实验方法 | 第57-58页 |
7.2.1 蛋白免疫印迹法检测MAPK信号通路相关蛋白以及HO-1的表达变化 | 第57-58页 |
7.2.2 加入活性氧抑制剂检测p-p38MAPK以及HO-1的表达变化 | 第58页 |
7.2.3 数据分析 | 第58页 |
7.3 实验结果 | 第58-60页 |
7.3.1 DVDMS-PDT诱导了Eca-109细胞MAPK信号通路相关蛋白以及HO-1表达变化 | 第58-59页 |
7.3.2 活性氧与p-p38MAPK以及HO-1表达上调的关系探究 | 第59-60页 |
7.4 讨论 | 第60-63页 |
总结 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-73页 |
致谢 | 第73-75页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第75页 |