| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 主要符号说明 | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-18页 |
| 1.1 AMPK的结构与功能 | 第12-14页 |
| 1.1.1 AMPK的分子结构 | 第12页 |
| 1.1.2 AMPK的活性调节 | 第12-13页 |
| 1.1.3 AMPK的功能 | 第13-14页 |
| 1.2 FOXO3的结构与功能 | 第14-16页 |
| 1.2.1 FOXO3的分子结构 | 第14页 |
| 1.2.2 FOXO3的功能 | 第14-16页 |
| 1.3 AMPK/FOXO3通路调控细胞凋亡 | 第16-17页 |
| 1.4 AMPK/FOXO3通路调节细胞分化 | 第17页 |
| 1.5 本研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-31页 |
| 2.1 试验材料 | 第18页 |
| 2.2 主要试剂与实验仪器 | 第18-21页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第18-19页 |
| 2.2.2 试剂配制 | 第19页 |
| 2.2.3 试剂盒 | 第19-20页 |
| 2.2.4 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.2.5 应用软件 | 第21页 |
| 2.3 试验方法 | 第21-31页 |
| 2.3.1 总RNA提取 | 第21页 |
| 2.3.2 总RNA检测 | 第21-22页 |
| 2.3.3 反转录PCR | 第22-23页 |
| 2.3.4 鸭FOXO3基因真核表达载体的构建及酶切鉴定 | 第23-26页 |
| 2.3.5 成肌细胞原代培养步骤 | 第26-27页 |
| 2.3.6 CCK-8法检测细胞增殖 | 第27页 |
| 2.3.7 实时荧光定量PCR | 第27-29页 |
| 2.3.8 总蛋白浓度测定 | 第29-30页 |
| 2.3.9 ELISA检测 | 第30页 |
| 2.3.10 目的蛋白含量百分比 | 第30页 |
| 2.3.11 细胞周期检测 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-48页 |
| 3.1 AMPK抑制剂(Dorsomorphin 2HCl)和激活剂(AICAR)最佳浓度筛选 | 第31-35页 |
| 3.1.1 不同浓度抑制剂和激活剂处理后细胞活性 | 第31-32页 |
| 3.1.2 不同浓度抑制剂和激活剂处理后AMPKα1和FOXO3 mRNA表达量 | 第32-34页 |
| 3.1.3 不同浓度抑制剂和激活剂处理后AMPK和FOXO3蛋白表达量 | 第34-35页 |
| 3.2 鸭pEGFP-N1-FOXO3真核表达载体构建及其转染检测 | 第35-38页 |
| 3.2.1 鸭FOXO3全长CDS的获得 | 第35-36页 |
| 3.2.2 鸭pEGFP-N1-FOXO3真核表达载体转染效率检测 | 第36-38页 |
| 3.3 地塞米松(DEX)抑制鸭成肌细胞增殖 | 第38页 |
| 3.4 不同浓度地塞米松(DEX)处理后各基因mRNA表达量 | 第38-39页 |
| 3.5 不同浓度地塞米松处理后AMPK和FOXO3蛋白表达量 | 第39-40页 |
| 3.6 AMPK抑制剂减弱DEX诱导的成肌细胞凋亡 | 第40-42页 |
| 3.6.1 细胞周期变化 | 第40页 |
| 3.6.2 基因表达量变化 | 第40-42页 |
| 3.7 激活AMPK/FOXO3通路促进鸭成肌细胞凋亡 | 第42-44页 |
| 3.7.1 激活AMPK/FOXO3通路对细胞周期的影响 | 第42页 |
| 3.7.2 激活AMPK/FOXO3信号通路后鸭成肌细胞凋亡相关基因表达量 | 第42-44页 |
| 3.8 AMPK/FOXO3对鸭成肌细胞分化的调控 | 第44-48页 |
| 3.8.1 诱导分化不同时间点(24h、48h、72h)基因表达量变化 | 第44-45页 |
| 3.8.2 抑制AMPK/FOXO3信号通路调控减弱鸭成肌细胞分化 | 第45-47页 |
| 3.8.3 AMPK/FOXO3信号通路促进鸭成肌细胞分化 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-52页 |
| 4.1 AMPK/FOXO3信号通路正向调控鸭成肌细胞凋亡 | 第48-50页 |
| 4.2 AMPK/FOXO3信号通路正向调控鸭成肌细胞分化 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 硕士研究生学习期间发表文章 | 第63页 |
