摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-12页 |
1 绪论 | 第12-17页 |
·禽流感病毒 | 第12-13页 |
·新城疫病毒 | 第13-14页 |
·荧光定量PCR | 第14-15页 |
·生态位 | 第15-16页 |
·本课题研究的目的和意义 | 第16-17页 |
2 实验1 三江平原野生鸟类禽流感病毒与新城疫病毒的监测研究 | 第17-25页 |
·实验材料 | 第17-18页 |
·样品来源 | 第17页 |
·实验试剂 | 第17-18页 |
·实验仪器 | 第18页 |
·鸡胚及红细胞 | 第18页 |
·实验方法 | 第18-21页 |
·样品采集 | 第18-19页 |
·样品处理 | 第19页 |
·病毒的分离 | 第19页 |
·血凝实验 | 第19页 |
·引物 | 第19页 |
·提取病毒RNA | 第19页 |
·反转录 | 第19-20页 |
·PCR | 第20-21页 |
·AIV血凝素亚型及神经氨酸酶亚型鉴定 | 第21页 |
·实验结果 | 第21-23页 |
·病毒分离结果 | 第21-22页 |
·AIV亚型的鉴定结果 | 第22-23页 |
·HA和NA亚型分布 | 第23页 |
·讨论 | 第23-24页 |
·小结 | 第24-25页 |
3 实验2 AIV与NDV混合感染检测与分析 | 第25-61页 |
·标准品制备及标准曲线建立 | 第25-29页 |
·实验材料 | 第25页 |
·实验方法-AIV标准品制备 | 第25-27页 |
·实验方法-AIV标准曲线建立 | 第27-28页 |
·实验方法-NDV标准品制备 | 第28页 |
·实验方法-NDV标准曲线建立 | 第28-29页 |
·特异性、灵敏性、重复性验证 | 第29-30页 |
·实验方法-特异性实验 | 第29页 |
·实验方法-敏感性实验 | 第29-30页 |
·实验方法-重复性实验 | 第30页 |
·样品检测 | 第30-31页 |
·实验材料 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31页 |
·结果 | 第31-57页 |
·PCR鉴定结果 | 第31-32页 |
·PCR产物胶回收结果 | 第32页 |
·菌液鉴定结果 | 第32-33页 |
·菌液测序结果 | 第33页 |
·质粒酶切结果 | 第33页 |
·质粒单切胶回收纯化后浓度测定结果 | 第33-35页 |
·荧光定量PCR引物浓度优化结果 | 第35-36页 |
·荧光定量PCR标准曲线建立结果 | 第36-38页 |
·标准曲线数据分析 | 第38-39页 |
·特异性实验结果 | 第39-40页 |
·敏感性实验结果 | 第40-46页 |
·重复性实验结果 | 第46-47页 |
·样品荧光定量检测结果 | 第47-49页 |
·样品浓度 | 第49-55页 |
·生态位宽度及生态位重叠值 | 第55-57页 |
·讨论 | 第57-60页 |
·标准品及荧光染料的选择 | 第57页 |
·标准曲线满足特异性、敏感性及重复性 | 第57-58页 |
·AIV及NDV主要分布呼吸系统 | 第58-60页 |
·小结 | 第60-61页 |
结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-66页 |
附录:三江平原采样明细表 | 第66-68页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第68-69页 |
致谢 | 第69-70页 |