| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-23页 |
| ·金线莲资源开发研究概况 | 第12-14页 |
| ·DNA分子遗传标记技术的概况 | 第14-21页 |
| ·DNA分子标记技术在生药鉴定中的优势 | 第14-15页 |
| ·DNA分子标记的主要方法及其技术特点 | 第15-19页 |
| ·DNA分子标记在金线莲上的运用背景 | 第19-20页 |
| ·RAPD-SCAR标记技术的运用背景 | 第20-21页 |
| ·本研究的意义 | 第21-22页 |
| ·技术路线 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-39页 |
| ·仪器与试剂 | 第23-25页 |
| ·试验涉及的仪器 | 第23页 |
| ·试验涉及的试剂 | 第23-25页 |
| ·金线莲种质资源的收集及离体保存技术研究 | 第25-32页 |
| ·金线莲种质资源的收集 | 第25-28页 |
| ·金线莲离体保存条件的优化 | 第28-32页 |
| ·MS培养基的配置 | 第28-30页 |
| ·外植体的脱毒 | 第30页 |
| ·金线莲茎段增殖培养 | 第30-32页 |
| ·金线莲基因组DNA提取方法的优化 | 第32-34页 |
| ·CTAB提取方法的条件优化 | 第33页 |
| ·RNA消化酶对DNA质量的影响 | 第33-34页 |
| ·金线莲基因组DNA的质量评价 | 第34页 |
| ·金线莲RAPD标记的开发 | 第34-37页 |
| ·不同金线莲基因组DNA的提取及质量检测 | 第34-35页 |
| ·PCR体系的优化 | 第35-36页 |
| ·RAPD引物多态性筛选及聚类分析 | 第36-37页 |
| ·将RAPD标记转化为SCAR标记 | 第37-39页 |
| ·RAPD特异性片段的回收 | 第37页 |
| ·特异性片段连接pMD-18T载体 | 第37页 |
| ·dH-5 α感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
| ·重组DNA的转化 | 第38页 |
| ·测序及SCAR引物设计 | 第38页 |
| ·SCAR-PCR特异性片段的验证与分析 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-61页 |
| ·金线莲快速离体保存条件的优化 | 第39-45页 |
| ·金线莲外植体脱毒条件优化 | 第39-41页 |
| ·金线莲茎段增殖培养基体系优化 | 第41-45页 |
| ·金线莲基因组DNA提取方法的优化 | 第45-48页 |
| ·基于CTAB方法的改良对金线莲DNA质量的影响 | 第45-47页 |
| ·RNA酶对金线莲基因组DNA质量的影响 | 第47-48页 |
| ·金线莲RAPD标记的开发 | 第48-56页 |
| ·基因组DNA的质量检测 | 第48-49页 |
| ·RAPD-PCR体系的优化 | 第49-53页 |
| ·RAPD引物多态性筛选 | 第53-56页 |
| ·RAPD聚类分析 | 第56页 |
| ·将RAPD标记转化为SCAR标记 | 第56-61页 |
| ·RAPD特异性片段的测序结果 | 第56-58页 |
| ·SCAR引物设计结果 | 第58-59页 |
| ·SCAR标记在种质资源中的特异性验证 | 第59-61页 |
| 4 结论与讨论 | 第61-65页 |
| ·金线莲离体保存技术的优化 | 第61-63页 |
| ·高质量金线莲基因组DNA提取方法的改良 | 第63页 |
| ·金线莲RAPD-SCAR标记的开发及遗传多样性评价 | 第63-65页 |
| 展望 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 附录 | 第74-75页 |