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甘蔗ScCBLs和ScCIPKs基因家族的克隆与鉴定

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
第一章 前言第12-18页
   ·钙离子信号的产生与传递第12页
   ·Ca~(2+)信号感受器的特征和分类第12-14页
     ·CaM/CML信号系统第12-13页
     ·CDPK信号系统第13页
     ·CBL-CIPK信号系统第13-14页
   ·CBL-CIPK信号通路研究进展第14-16页
     ·CBL蛋白的结构特征第14页
     ·CIPK蛋白的结构特征第14-15页
     ·CBL-CIPK信号通路的激活及其相互作用第15页
     ·CBL-CIPK信号通路参与植物的逆境响应第15-16页
   ·本研究的目的及意义第16-17页
   ·本研究的技术路线图第17-18页
第二章 甘蔗ScCBLs基因家族的分离鉴定和表达分析第18-35页
   ·实验材料第18-19页
     ·植物材料处理第18-19页
     ·实验试剂第19页
   ·实验方法第19-22页
     ·甘蔗总RNA提取第19页
     ·cDNA第一条链合成第19-20页
     ·目的基因克隆第20-21页
       ·目的基因获得第20页
       ·引物设计第20-21页
       ·目的基因克隆第21页
     ·目的基因的生物信息学分析第21-22页
     ·目的基因表达分析第22页
   ·实验结果第22-33页
     ·4个甘蔗ScCBLs基因序列的获得第23-25页
     ·4个甘蔗ScCBLs基因生物信息学分析第25-27页
       ·4个甘蔗ScCBLs基因编码蛋白质一级结构预测第25-26页
       ·4个甘蔗ScCBLs蛋白二级结果预测与分析第26页
       ·4个甘蔗ScCBLs蛋白功能预测第26-27页
       ·4个甘蔗ScCBLs蛋白亚细胞定位预测第27页
     ·4个甘蔗ScCBLs蛋白的保守结构域分析第27-28页
     ·4个甘蔗ScCBLs基因编码蛋白的系统进化分析第28-31页
     ·4个甘蔗ScCBLs甘蔗基因的表达分析第31-33页
       ·4个ScCBLs基因在甘蔗中的组织特异性表达分析第31页
       ·生物胁迫下4个甘蔗ScCBLs基因表达特性第31-32页
       ·非生物胁迫下4个甘蔗ScCBLs基因的表达特性第32-33页
   ·讨论与结论第33-35页
     ·甘蔗ScCBLs的克隆与生物学分析第33-34页
     ·甘蔗ScCBLs组织特异性表达分析第34页
     ·甘蔗ScCBLs对生物胁迫和非生物胁迫的应答第34-35页
第三章 甘蔗ScCIPKs基因家族的分离鉴定和表达分析第35-61页
   ·实验材料第35页
     ·植物材料处理第35页
     ·实验试剂第35页
   ·实验方法第35-38页
     ·甘蔗总RNA提取第35页
     ·cDNA第—条链合成第35页
     ·目的基因克隆第35-37页
       ·目的基因获得第35-36页
       ·引物设计第36页
       ·目的基因克隆第36-37页
     ·目的基因的生物信息学分析第37页
     ·目的基因表达分析第37-38页
   ·实验结果第38-58页
     ·10个甘蔗ScCIPKs基因序列的获得第38-45页
     ·10个甘蔗ScCIPKs基因生物信息学分析第45-46页
       ·10个甘蔗ScCIPKs基因编码蛋白质一级结构预测第45页
       ·10个甘蔗ScCIPKs蛋白二级结果预测与分析第45-46页
       ·10个甘蔗ScCIPKs蛋白功能预测第46页
       ·10个甘蔗ScCIPKs蛋白亚细胞定位预测第46页
     ·10个甘蔗ScCIPKs蛋白的氨基酸序列保守结构域分析第46-50页
     ·10个甘蔗ScCIPKs基因编码蛋白的系统进化分析第50-53页
     ·10个甘蔗ScCIPKs基因的表达分析第53-58页
       ·10个ScCIPKs基因在甘蔗中组织特异性表达分析第53-54页
       ·生物胁迫下10个甘蔗ScCIPKs基因的表达特性第54-55页
       ·非生物胁迫下10个甘蔗ScCIPKs基因的表达特性第55-58页
   ·讨论与结论第58-61页
     ·甘蔗ScCIPKs家族基因的克隆与生物学分析第58-59页
     ·甘蔗ScCIPKs家族基因组织特异性表达分析第59页
     ·甘蔗ScCIPKs基因对生物胁迫和非生物胁迫的应答第59-61页
第四章 甘蔗ScCBL2与ScCIPK15蛋白的互作分析第61-68页
   ·实验材料第61-62页
     ·植物材料第61页
     ·菌种和质粒第61页
     ·工具酶和试剂盒第61-62页
   ·实验方法第62-63页
     ·甘蔗ScCBL2和ScCIPK15互作载体的构建第62页
     ·农杆菌感受态细胞的制备第62-63页
     ·重组质粒转化农杆菌第63页
     ·农杆菌侵染本氏烟及叶片观察第63页
   ·结果分析第63-66页
     ·甘蔗ScCBL2和ScCIPK15加接头引物PCR反应的鉴定第63-64页
     ·BP反应重组质粒pDNOR221-X的PCR鉴定第64页
     ·LR反应重组载体质粒鉴定第64-65页
     ·甘蔗ScCBL2和ScCIPK15的阳性农杆菌转化菌株PCR鉴定第65页
     ·甘蔗ScCBL2和ScCIPK15的BIFC互作结果第65-66页
   ·讨论与结论第66-68页
第五章 主要结论以及后续研究第68-70页
   ·主要结论第68-69页
   ·后续研究第69-70页
参考文献第70-78页
致谢第78页

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