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拟南芥OFP1与BLH3、ATH1蛋白互作与相关功能分析

摘要第1-13页
英文摘要第13-17页
1 引言第17-34页
   ·拟南芥OFP家族研究概述第17-25页
     ·拟南芥OFP家族研究进展第17-18页
     ·At OFP1靶基因筛选与子叶发育调节第18-20页
     ·At OFP1与Ku蛋白互作调节DNA损伤修复第20页
     ·At OFPs与KNAT7蛋白互作调节植物次生细胞壁的形成第20-23页
     ·BLH家族和KNOX家族概述第23页
     ·拟南芥OFP家族与BLH家族和KNOX家族互作分析第23-25页
   ·蛋白互作研究方法概述与进展第25-28页
     ·酵母双杂交技术第25-26页
     ·双分子荧光互补(Bi FC)第26页
     ·免疫共沉淀(Co-IP)和pull down第26-28页
   ·拟南芥FLC基因作用机理与研究进展第28-29页
     ·FLC蛋白的结构特征第28页
     ·FLC蛋白的作用机制第28-29页
     ·影响FLC蛋白调控的因素第29页
   ·赤霉素(GA)功能与研究进展第29-31页
     ·GA的发现、结构与合成第30页
     ·赤霉素的信号转导研究第30页
     ·GA与其它激素及环境因子的互作第30-31页
   ·本研究的目的、意义及技术路线第31-34页
     ·研究的目的意义第31-33页
     ·技术路线第33-34页
2 材料与方法第34-42页
   ·试验材料第34页
   ·本试验涉及使用的主要仪器设备第34页
   ·BLH3和ATH1基因的克隆与载体构建第34-36页
   ·质粒构建和酵母双杂交检测蛋白互作关系第36-37页
   ·双分子荧光互补试验(Bi FC)第37页
   ·原生质体转化和蛋白提取第37-38页
   ·提取酵母质粒鉴定互作基因第38页
   ·原生质体瞬时转染与相关质粒构建第38-39页
   ·反转录PCR和GUS表达分析第39页
   ·Real-time PCR分析第39-40页
   ·免疫共沉淀(Co-IP)第40页
   ·扫描电镜第40-41页
   ·杂交实验第41-42页
3 结果与分析第42-77页
   ·酵母双杂交测试OFP1与BLH3之间的蛋白互作第42页
   ·通过酵母双杂交分析BLH3与OFP1发生相互作用的结构域第42-46页
   ·通过酵母双杂交测试ATH1与OFP1相互作用第46页
   ·通过酵母双杂交分析ATH1与OFP1发生相互作用的结构域第46-50页
   ·通过Bi FC分析OFP1与BLH3之间的蛋白相互作用第50-51页
   ·通过Bi FC分析OFP1与ATH1之间的蛋白相互作用第51-52页
   ·免疫共沉淀(Co-IP) 分析OFP1与BLH3之间的相互作用第52页
   ·免疫共沉淀(Co-IP) 分析OFP1与ATH1之间的相互作用第52-53页
   ·BLH3转录活性测试及OFP1对其转录活性的调节分析第53-55页
   ·BLH3转录激活域分析第55-56页
   ·ATH1转录活性测试及OFP1对其转录活性的调节分析第56-58页
   ·ATH1转录抑制域分析第58-60页
   ·BLH3基因在拟南芥中的表达第60-61页
   ·ATH1基因在拟南芥中的表达第61页
   ·BLH3-OFP1互作调控拟南芥从营养生长到生殖生长的转变第61-66页
     ·blh3突变体的鉴定与表型分析第61-62页
     ·不同遗传背景材料的性状分析第62-66页
   ·OFP1在ATH1-OFP1中的调节功能第66-77页
     ·ath1突变体的鉴定与表型分析第66-67页
     ·参与调节茎的伸长、开花时间第67-72页
     ·相关基因的Realtime-PCR分析第72-76页
     ·OFP1-ATH1复合物对花基边界的调控第76-77页
4 讨论第77-86页
   ·OFP-BLH-KNOX蛋白互作网络第77-79页
   ·OFP1与BLH3在体内的蛋白互作第79-80页
   ·BLH3-OFP1调控营养生长到生殖生长的转变时间第80-81页
   ·OFP1在OFP1-ATH1蛋白复合物中的作用第81-82页
   ·ATH1的抑制结构域第82-83页
   ·ATH1-OFP1调控拟南芥茎的生长、开花时间及花基边界第83-86页
5 结论第86-88页
   ·OFP1与BLH3互作调控营养生长到生殖生长的转变时间第86页
   ·OFP1与ATH1互作调控茎的生长、开花时间及花基边界第86-88页
6 创新点第88-89页
7 下一步工作设想第89-90页
致谢第90-91页
参考文献第91-104页
攻读博士学位期间发表的学术论文第104页

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