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EHEC O157:H7和空肠弯曲菌氨基磁珠-LAMP检测方法的建立

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略词(Abbreviation)第11-12页
1 前言第12-22页
   ·EHEC O157:H7 和空肠弯曲菌的危害与流行第12-14页
     ·EHEC O157:H7 的危害与流行第12-13页
     ·空肠弯曲菌的危害与流行第13-14页
   ·检测方法第14-17页
     ·分离培养法第14-15页
     ·免疫学方法第15-16页
     ·分子生物学方法第16-17页
   ·LAMP技术第17-19页
     ·LAMP技术的优点第18-19页
     ·LAMP技术的应用第19页
   ·DNA提取方法第19-20页
   ·磁性分离技术第20-21页
   ·研究目的与意义第21-22页
2 实验材料第22-24页
   ·菌株第22页
   ·培养基第22页
   ·主要试剂第22-23页
   ·主要器材第23页
   ·主要溶液配制第23-24页
3 实验方法第24-31页
   ·细菌基因组提取第24页
     ·细菌基因组试剂盒法提取第24页
     ·细菌基因组热煮沸法提取第24页
   ·PCR引物设计与合成第24-25页
   ·HNB-LAMP检测方法的建立及评价第25-26页
     ·LAMP靶基因选择第25页
     ·LAMP引物设计第25页
     ·LAMP反应体系优化第25页
     ·HNB-LAMP检测方法的特异性试验第25-26页
     ·HNB-LAMP检测方法的灵敏度试验第26页
     ·HNB-LAMP方法检测EHEC O157:H7 临床分离株试验第26页
   ·氨基磁珠的合成第26-28页
     ·裸Fe_3O_4磁性纳米粒子的合成第26-27页
     ·二氧化硅包裹Fe_3O_4磁性纳米粒子的合成第27页
     ·去除未被硅包裹的Fe_3O_4磁性纳米粒子第27页
     ·氨基修饰的硅包Fe_3O_4磁性纳米粒子的合成第27-28页
   ·氨基磁珠的表征第28页
     ·傅里叶红外光谱分析第28页
     ·X射线衍射分析第28页
     ·透射电镜分析第28页
   ·氨基磁珠吸附DNA条件第28-29页
     ·氨基磁珠提取细菌基因组DNA第28页
     ·最佳吸附pH第28页
     ·最佳吸附温度第28-29页
     ·最佳吸附时间第29页
     ·最佳氨基磁珠添加量第29页
   ·人工污染样品检测第29-31页
     ·氨基磁珠提取人工污染牛奶DNA第29页
     ·氨基磁珠提取人工污染肉样DNA第29-30页
     ·PCR/LAMP检测第30-31页
4 结果与分析第31-49页
   ·LAMP检测方法的建立及评价第31-39页
     ·LAMP靶基因选择第31页
     ·LAMP引物设计第31-32页
     ·LAMP反应体系优化第32-36页
     ·HNB-LAMP检测方法的特异性试验第36-37页
     ·HNB-LAMP检测方法的灵敏度试验第37-39页
     ·HNB-LAMP方法检测EHEC O157:H7 临床分离株试验第39页
   ·氨基磁珠的表征第39-41页
     ·氨基磁珠的红外光谱分析第39-40页
     ·氨基磁珠的X射线衍射分析第40-41页
     ·氨基磁珠的TEM表征第41页
   ·氨基磁珠吸附DNA条件第41-44页
     ·最佳吸附pH第41-42页
     ·最佳吸附温度第42页
     ·最佳吸附时间第42-43页
     ·氨基磁珠添加量对PCR灵敏度的影响第43-44页
   ·人工污染样品检测第44-49页
     ·氨基磁珠-LAMP检测O157 人工污染牛奶样品第44-45页
     ·氨基磁珠-PCR检测O157 人工污染牛奶样品第45-46页
     ·氨基磁珠-LAMP检测O157 人工污染猪肉样品第46页
     ·氨基磁珠-PCR检测O157 人工污染猪肉样品第46-47页
     ·氨基磁珠-LAMP检测空肠弯曲菌人工污染鸡肉样品第47-48页
     ·氨基磁珠-PCR检测空肠弯曲菌人工污染鸡肉样品第48-49页
5 讨论第49-54页
   ·靶基因的选择第49-50页
   ·LAMP方法建立的思考第50-51页
     ·LAMP方法的选择第50页
     ·LAMP显色剂的选择第50-51页
   ·样品前处理方法第51-53页
     ·氨基磁珠与硫氰酸胍第51-52页
     ·不同样品处理方式第52-53页
   ·检测方法评价第53-54页
结论第54-55页
参考文献第55-61页
致谢第61页

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