摘要 | 第1-4页 |
abstract | 第4-12页 |
1 前言 | 第12-26页 |
·植物耐旱的机理 | 第12-13页 |
·植物对干旱胁迫的适应及相关信号的感知 | 第13页 |
·植物钙信号转导中的钙依赖蛋白激酶(CDPKs) | 第13-17页 |
·钙离子与钙依赖蛋白激酶的关系 | 第13-14页 |
·CDPKs的生理功能 | 第14-17页 |
·植物耐旱基因工程研究进展 | 第17-19页 |
·与植物响应干旱胁迫相关的蛋白激酶 | 第17页 |
·与渗透调节物质积累相关的基因 | 第17-19页 |
·编码转录因子的调节基因 | 第19页 |
·马铃薯基因工程研究进展 | 第19-22页 |
·马铃薯抗虫 | 第19页 |
·马铃薯抗病毒病 | 第19-20页 |
·马铃薯抗真菌和细菌病 | 第20页 |
·马铃薯抗除草剂 | 第20页 |
·马铃薯品质改良 | 第20-21页 |
·马铃薯抗逆性 | 第21页 |
·其他基因工程技术在马铃薯中的应用 | 第21-22页 |
·植物中应用的启动子研究进展 | 第22-24页 |
·组成型表达的启动子 | 第22页 |
·诱导型表达的启动子 | 第22-23页 |
·组织特异型启动子 | 第23-24页 |
·本研究的目的意义、研究内容及技术路线 | 第24-26页 |
2 马铃薯无毒试管微型薯的诱导及再生体系的建立 | 第26-32页 |
·材料与方法 | 第26-28页 |
·供试材料 | 第26页 |
·植物生长调节剂 | 第26页 |
·微型薯形成培养基的筛选 | 第26-27页 |
·影响微型薯形成的蔗糖浓度筛选 | 第27页 |
·影响微型薯形成的光照条件筛选 | 第27页 |
·微型薯再生体系中植物激素的筛选 | 第27-28页 |
·指标调查和统计分析 | 第28页 |
·结果与分析 | 第28-30页 |
·不同激素配比对微型薯形成的影响 | 第28-29页 |
·不同蔗糖浓度对微型薯形成的影响 | 第29页 |
·不同光照周期对微型薯形成的影响 | 第29-30页 |
·微型薯再生体系中植物激素对其的影响 | 第30页 |
·讨论 | 第30-31页 |
·微型薯形成与培养基激素成分 | 第30-31页 |
·微型薯形成与光周期 | 第31页 |
·微型薯形成与蔗糖浓度 | 第31页 |
·小结 | 第31-32页 |
3 拟南芥CDPK1基因和RD29A启动子的克隆及植物表达载体的构建 | 第32-46页 |
·材料与方法 | 第32-37页 |
·试验材料 | 第32页 |
·菌株与质粒 | 第32页 |
·酶和生化试剂 | 第32页 |
·PCR引物 | 第32-33页 |
·基因组DNA提取 | 第33页 |
·目的片段扩增 | 第33-34页 |
·目的片段回收及加尾 | 第34页 |
·PCR产物与p MD18-T载体的连接 | 第34页 |
·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第34-35页 |
·转化子蓝白斑筛选 | 第35页 |
·重组转化子鉴定 | 第35页 |
·构建植物表达载体 | 第35-36页 |
·农杆菌电感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
·重组的植物表达载体转化农杆菌 | 第37页 |
·结果与分析 | 第37-43页 |
·CDPK1基因的扩增与克隆 | 第37-39页 |
·Rd29A 5′端启动子序列的扩增与克隆 | 第39-40页 |
·Ca MV 35S启动子驱动CDPK1表达的植物表达载体的构建与鉴定 | 第40-41页 |
·Rd29A启动子驱动CDPK1表达的植物表达载体的构建与鉴定 | 第41-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
·小结 | 第44-46页 |
4 P35S:CDPK1和P29A:CDPK1转基因马铃薯的获得与鉴定 | 第46-56页 |
·材料与方法 | 第46-50页 |
·供试材料 | 第46页 |
·实验试剂 | 第46页 |
·试剂配制 | 第46-47页 |
·重组菌株的培养与活化 | 第47页 |
·马铃薯转化方法 | 第47页 |
·马铃薯转化植株的PCR检测 | 第47页 |
·转基因马铃薯Southern杂交检测 | 第47-50页 |
·结果与分析 | 第50-53页 |
·CDPK1基因转化马铃薯 | 第51页 |
·抗性马铃薯植株的PCR检测 | 第51-52页 |
·转基因马铃薯Southern杂交鉴定 | 第52-53页 |
·转基因马铃薯中CDPK1基因的表达 | 第53页 |
·讨论 | 第53-55页 |
·小结 | 第55-56页 |
5 转CDPK1基因的马铃薯抗旱性研究 | 第56-67页 |
·材料与方法 | 第56-59页 |
·供验材料 | 第56页 |
·转基因马铃薯的生理指标测定 | 第56-58页 |
·转基因马铃薯的转录表达分析 | 第58-59页 |
·结果与分析 | 第59-64页 |
·转CDPK1基因马铃薯抗旱性外部形态表现 | 第59-61页 |
·转CDPK1基因马铃薯抗旱性生理指标的变化 | 第61-63页 |
·干旱胁迫对转基因马铃薯中CDPK1、P5CS和Pro DH基因表达的影响 | 第63-64页 |
·讨论 | 第64-66页 |
·小结 | 第66-67页 |
6 结论与创新点 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-83页 |
作者简介 | 第83页 |