摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
1 引言 | 第9-17页 |
·羊传染性脓疱概述 | 第9页 |
·羊传染性脓疱病原学 | 第9-11页 |
·形态结构 | 第9-10页 |
·理化特性 | 第10页 |
·培养特性 | 第10页 |
·基因组结构 | 第10-11页 |
·CEV编码蛋白及主要免疫原性蛋白功能 | 第11页 |
·羊传染性脓疱流行病学 | 第11-12页 |
·羊传染性脓疱临床症状 | 第12-13页 |
·羊传染性脓疱病理变化 | 第13页 |
·羊传染性脓疱诊断方法 | 第13-15页 |
·病原学诊断 | 第13-14页 |
·免疫学诊断 | 第14页 |
·分子生物学诊断 | 第14-15页 |
·羊传染性脓疱治疗方法 | 第15页 |
·羊传染性脓疱防控措施 | 第15-16页 |
·羊传染性脓疱疫苗研究 | 第16-17页 |
·研究目的和意义 | 第17页 |
2 材料与方法 | 第17-25页 |
·材料 | 第17-18页 |
·毒株 | 第17页 |
·临床病料 | 第17-18页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·主要仪器 | 第18页 |
·引物及探针 | 第18页 |
·方法 | 第18-25页 |
·病毒基因组DNA提取 | 第18-19页 |
·常规PCR扩增 | 第19-20页 |
·普通琼脂糖凝胶回收目的片段 | 第20页 |
·目的片段与载体pMD19-T的连接转化 | 第20-21页 |
·重组质粒提取及鉴定 | 第21-22页 |
·重组阳性质粒DNA浓度和纯度的测定 | 第22页 |
·CEV SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立 | 第22-24页 |
·CEV TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立 | 第24-25页 |
3 结果 | 第25-40页 |
·重组质粒鉴定结果 | 第25-27页 |
·重组阳性质粒PCR鉴定结果 | 第25-26页 |
·重组阳性质粒测序鉴定结果 | 第26-27页 |
·重组阳性质粒DNA浓度和纯度的测定结果 | 第27页 |
·CEV SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法的建立结果 | 第27-34页 |
·SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR反应体系的优化结果 | 第27页 |
·退火温度的优化结果 | 第27页 |
·最适DNA模板浓度筛选结果 | 第27-28页 |
·SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR标准曲线绘制结果 | 第28页 |
·SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR重复性试验结果 | 第28-29页 |
·SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR灵敏性试验结果 | 第29-30页 |
·SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR特异性试验结果 | 第30-31页 |
·SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR临床病料检测结果 | 第31-34页 |
·CEV TaqMan实时荧光定量PCR方法的建立结果 | 第34-40页 |
·TaqMan实时荧光定量PCR反应体系的优化结果 | 第34-35页 |
·退火温度的优化结果 | 第35页 |
·最佳DNA模板浓度筛选结果 | 第35页 |
·TaqMan实时荧光定量PCR标准曲线绘制结果 | 第35-36页 |
·TaqMan实时荧光定量PCR重复性试验结果 | 第36-37页 |
·TaqMan实时荧光定量PCR灵敏性试验结果 | 第37页 |
·TaqMan实时荧光定量PCR特异性试验结果 | 第37-38页 |
·TaqMan实时荧光定量PCR临床病料检测结果 | 第38-40页 |
4 讨论 | 第40-43页 |
5 结论 | 第43-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-51页 |
作者简介 | 第51页 |