| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-15页 |
| 引言 | 第15-22页 |
| 第一部分 TCCT 对 U251 与 A549 细胞增殖的影响 | 第22-32页 |
| 1 材料、仪器与试剂 | 第22-24页 |
| ·癌细胞与药物 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-23页 |
| ·主要工作液配制 | 第23-24页 |
| ·TCCT 药物母液 | 第23页 |
| ·磷酸盐缓冲液(PBS) | 第23页 |
| ·双抗储存液(1000×) | 第23页 |
| ·冻存液 | 第23页 |
| ·MTT 溶液 | 第23-24页 |
| 2 实验方法 | 第24-25页 |
| ·细胞培养 | 第24页 |
| ·细胞种板 | 第24页 |
| ·细胞加药 | 第24-25页 |
| ·细胞活性测定及显微镜拍照 | 第25页 |
| ·统计学处理 | 第25页 |
| 3 结果 | 第25-30页 |
| ·MTT | 第25-28页 |
| ·镜下观察 | 第28-30页 |
| 4 讨论 | 第30-32页 |
| 第二部分 TCCT 对 U251 与 A549 及细胞周期相关因子 mRNA 表达的影响 | 第32-39页 |
| 1 材料、仪器与试剂 | 第32-33页 |
| ·癌细胞与药物 | 第32页 |
| ·主要试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32-33页 |
| 2 实验方法 | 第33-36页 |
| ·细胞培养 | 第33页 |
| ·细胞种板 | 第33页 |
| ·细胞加药 | 第33-34页 |
| ·RNA 提取 | 第34页 |
| ·RNA 浓度及纯度检测 | 第34页 |
| ·RT-PCR | 第34-36页 |
| ·引物设计 | 第34-35页 |
| ·构建 PT-PCR 反应体系及反应程式,RT-PCR | 第35-36页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测 RT-PCR 产物 | 第36页 |
| 3 结果 | 第36-37页 |
| 4 讨论 | 第37-39页 |
| 第三部分 TCCT 对 U251 与 A549 细胞周期的影响 | 第39-49页 |
| 1 材料、仪器与试剂 | 第39-40页 |
| ·癌细胞与药物 | 第39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·主要仪器设备 | 第39-40页 |
| 2 实验方法 | 第40-41页 |
| ·细胞培养 | 第40页 |
| ·细胞种板 | 第40页 |
| ·细胞加药 | 第40-41页 |
| ·细胞固定 | 第41页 |
| ·PI 单染及上机检测 | 第41页 |
| ·统计学处理 | 第41页 |
| 3 结果 | 第41-48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 第四部分 TCCT 对 U251 与 A549 细胞凋亡的影响 | 第49-57页 |
| 1 材料、仪器与试剂 | 第49-50页 |
| ·癌细胞与药物 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·主要仪器设备 | 第49-50页 |
| 2 实验方法 | 第50-51页 |
| ·细胞培养 | 第50页 |
| ·细胞种板 | 第50页 |
| ·细胞加药 | 第50-51页 |
| ·细胞前处理及上机 | 第51页 |
| ·统计学处理 | 第51页 |
| 3 结果 | 第51-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 第五部分 TCCT 对 U251 组蛋白乙酰化状态及细胞周期相关因子蛋白表达的影响 | 第57-65页 |
| 1 材料、仪器与试剂 | 第57-60页 |
| ·癌细胞与药物 | 第57页 |
| ·主要试剂 | 第57-58页 |
| ·主要仪器设备 | 第58页 |
| ·主要工作液配制 | 第58-60页 |
| ·1.0M Tris-HCl(pH6.8) | 第58页 |
| ·1.5M Tris-HCl(pH8.8) | 第58页 |
| ·30%储备胶溶液 | 第58页 |
| ·10%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液 | 第58-59页 |
| ·10%过硫酸铵(AP)溶液 | 第59页 |
| ·5×SDS-PAGE 电泳缓冲液 | 第59页 |
| ·15%分离胶配方 | 第59页 |
| ·5%浓缩胶配制 | 第59页 |
| ·10×转移缓冲液 | 第59-60页 |
| ·20%吐温(Tween)20 溶液 | 第60页 |
| ·TBST 缓冲液 | 第60页 |
| ·封闭液(5%脱脂奶粉) | 第60页 |
| 2 实验方法 | 第60-63页 |
| ·细胞培养 | 第60页 |
| ·细胞种板 | 第60页 |
| ·细胞加药 | 第60-61页 |
| ·蛋白提取与定量 | 第61页 |
| ·蛋白提取 | 第61页 |
| ·蛋白定量 | 第61页 |
| ·Western Blot | 第61-63页 |
| ·灌制 SDS-PAGE 凝胶 | 第61页 |
| ·加样及电泳 | 第61-62页 |
| ·转膜 | 第62页 |
| ·封闭及抗体孵育 | 第62页 |
| ·发光、曝光及显影 | 第62-63页 |
| 3 结果 | 第63页 |
| 4 讨论 | 第63-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第70-71页 |
| 附录 缩略词表 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |