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新型组蛋白去乙酰化酶抑制剂TCCT对U251和A549细胞的增殖、细胞周期及凋亡的影响

摘要第1-11页
Abstract第11-15页
引言第15-22页
第一部分 TCCT 对 U251 与 A549 细胞增殖的影响第22-32页
 1 材料、仪器与试剂第22-24页
   ·癌细胞与药物第22页
   ·主要试剂第22页
   ·主要仪器设备第22-23页
   ·主要工作液配制第23-24页
     ·TCCT 药物母液第23页
     ·磷酸盐缓冲液(PBS)第23页
     ·双抗储存液(1000×)第23页
     ·冻存液第23页
     ·MTT 溶液第23-24页
 2 实验方法第24-25页
   ·细胞培养第24页
   ·细胞种板第24页
   ·细胞加药第24-25页
   ·细胞活性测定及显微镜拍照第25页
   ·统计学处理第25页
 3 结果第25-30页
   ·MTT第25-28页
   ·镜下观察第28-30页
 4 讨论第30-32页
第二部分 TCCT 对 U251 与 A549 及细胞周期相关因子 mRNA 表达的影响第32-39页
 1 材料、仪器与试剂第32-33页
   ·癌细胞与药物第32页
   ·主要试剂第32页
   ·主要仪器设备第32-33页
 2 实验方法第33-36页
   ·细胞培养第33页
   ·细胞种板第33页
   ·细胞加药第33-34页
   ·RNA 提取第34页
   ·RNA 浓度及纯度检测第34页
   ·RT-PCR第34-36页
     ·引物设计第34-35页
     ·构建 PT-PCR 反应体系及反应程式,RT-PCR第35-36页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测 RT-PCR 产物第36页
 3 结果第36-37页
 4 讨论第37-39页
第三部分 TCCT 对 U251 与 A549 细胞周期的影响第39-49页
 1 材料、仪器与试剂第39-40页
   ·癌细胞与药物第39页
   ·主要试剂第39页
   ·主要仪器设备第39-40页
 2 实验方法第40-41页
   ·细胞培养第40页
   ·细胞种板第40页
   ·细胞加药第40-41页
   ·细胞固定第41页
   ·PI 单染及上机检测第41页
   ·统计学处理第41页
 3 结果第41-48页
 4 讨论第48-49页
第四部分 TCCT 对 U251 与 A549 细胞凋亡的影响第49-57页
 1 材料、仪器与试剂第49-50页
   ·癌细胞与药物第49页
   ·主要试剂第49页
   ·主要仪器设备第49-50页
 2 实验方法第50-51页
   ·细胞培养第50页
   ·细胞种板第50页
   ·细胞加药第50-51页
   ·细胞前处理及上机第51页
   ·统计学处理第51页
 3 结果第51-56页
 4 讨论第56-57页
第五部分 TCCT 对 U251 组蛋白乙酰化状态及细胞周期相关因子蛋白表达的影响第57-65页
 1 材料、仪器与试剂第57-60页
   ·癌细胞与药物第57页
   ·主要试剂第57-58页
   ·主要仪器设备第58页
   ·主要工作液配制第58-60页
     ·1.0M Tris-HCl(pH6.8)第58页
     ·1.5M Tris-HCl(pH8.8)第58页
     ·30%储备胶溶液第58页
     ·10%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液第58-59页
     ·10%过硫酸铵(AP)溶液第59页
     ·5×SDS-PAGE 电泳缓冲液第59页
     ·15%分离胶配方第59页
     ·5%浓缩胶配制第59页
     ·10×转移缓冲液第59-60页
     ·20%吐温(Tween)20 溶液第60页
     ·TBST 缓冲液第60页
     ·封闭液(5%脱脂奶粉)第60页
 2 实验方法第60-63页
   ·细胞培养第60页
   ·细胞种板第60页
   ·细胞加药第60-61页
   ·蛋白提取与定量第61页
     ·蛋白提取第61页
     ·蛋白定量第61页
   ·Western Blot第61-63页
     ·灌制 SDS-PAGE 凝胶第61页
     ·加样及电泳第61-62页
     ·转膜第62页
     ·封闭及抗体孵育第62页
     ·发光、曝光及显影第62-63页
 3 结果第63页
 4 讨论第63-65页
结论第65-66页
参考文献第66-70页
攻读学位期间发表的论文第70-71页
附录 缩略词表第71-72页
致谢第72页

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