摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 前言 | 第8-30页 |
1 洋桔梗及其切花采后保鲜的研究 | 第8-10页 |
·洋桔梗简介 | 第8-9页 |
·洋桔梗切花采后的保鲜研究 | 第9-10页 |
2 ACC合酶基因的研究进展 | 第10-15页 |
·植物体内乙烯的生物合成途径 | 第10-12页 |
·乙烯合成中的关键酶 | 第12页 |
·ACC合酶基因及其克隆的研究进展 | 第12-14页 |
·抑制ACC合酶活性的基因工程策略及其展望 | 第14-15页 |
3 RNA干扰在植物基因工程中的应用 | 第15-20页 |
·RNAi现象的发现 | 第15-16页 |
·RNAi的作用机理 | 第16-18页 |
·RNAi的分子生物学特性 | 第18页 |
·RNAi在植物基因工程中的应用 | 第18-19页 |
·RNAi技术存在的问题及其展望 | 第19-20页 |
4 聚合酶链式反应(PCR)检测技术在转基因植物研究中的运用 | 第20-28页 |
·外源基因整合水平上的PCR检测 | 第20-21页 |
·外源基因转录水平上的RT-PCR检测 | 第21-28页 |
5 本研究的思路、目的和意义 | 第28-30页 |
第二章 重组子pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTⅡ化根癌农杆菌及其侵染洋桔梗 | 第30-43页 |
1 材料与方法 | 第30-37页 |
·材料 | 第30-32页 |
·方法 | 第32-37页 |
·大肠杆菌质粒的提取和鉴定 | 第32-34页 |
·pCAMBIA1301-gfp-(GUS+ACS)i-NPTⅡ转化农杆菌LBA4404 | 第34-35页 |
·重组菌落的鉴定与保存 | 第35-36页 |
·洋桔梗叶片的预培养 | 第36页 |
·农杆菌的活化与培养 | 第36-37页 |
·采用叶盘法转化洋桔梗 | 第37页 |
2 结果与分析 | 第37-42页 |
·大肠杆菌质粒的提取 | 第37-38页 |
·大肠杆菌质粒浓度的测定 | 第38-39页 |
·大肠杆菌质粒的PCR鉴定 | 第39页 |
·农杆菌LBA4404转化子的PCR鉴定 | 第39-40页 |
·洋桔梗叶片抗性芽的生长培养 | 第40-42页 |
3 讨论 | 第42-43页 |
第三章 转化洋桔梗植株的检测 | 第43-60页 |
1 材料与方法 | 第43-50页 |
·材料 | 第43-44页 |
·方法 | 第44-50页 |
·抗性苗的生根筛选培养 | 第44页 |
·抗性苗的PCR检测 | 第44-45页 |
·抗性苗的RT-PCR鉴定 | 第45-47页 |
·抗性苗的GFP荧光观察 | 第47页 |
·洋桔梗总蛋白质的提取 | 第47页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白的相对分子质量 | 第47-50页 |
2 结果与分析 | 第50-57页 |
·抗性苗的生根筛选培养 | 第50-51页 |
·抗性苗的PCR检测 | 第51-53页 |
·抗性苗的RT-PCR鉴定 | 第53-55页 |
·抗性苗的GFP荧光观察 | 第55-56页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第56-57页 |
3 讨论 | 第57-60页 |
第四章 洋桔梗转基因组培苗的花期研究 | 第60-65页 |
1 材料和方法 | 第60-62页 |
·材料 | 第60-61页 |
·方法 | 第61-62页 |
·洋桔梗组培苗的移栽方法 | 第61页 |
·组培苗根的条数对移栽成活率的影响 | 第61页 |
·移栽洋桔梗的花期统计 | 第61页 |
·实验数据的统计分析 | 第61-62页 |
2 结果与分析 | 第62-64页 |
·洋桔梗组培苗根的条数对移栽成活率的影响 | 第62页 |
·空白洋桔梗、反义ACS洋桔梗、干扰ACSi洋桔梗的花期研究 | 第62-64页 |
3 讨论 | 第64-65页 |
全文结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-76页 |
附录 | 第76-81页 |
附录1 主要缩略词表 | 第76-77页 |
附录2 MS培养基的配方 | 第77-78页 |
附录3 主要试剂的配制方法 | 第78-79页 |
附录4 植物基因组DNA提取试剂盒说明 | 第79-80页 |
附录5 发表的科研论文 | 第80-81页 |
致谢 | 第81页 |