| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 目录 | 第7-10页 |
| 第1章 前言 | 第10-18页 |
| ·生物固氮 | 第10-12页 |
| ·生物固氮的分类 | 第10-12页 |
| ·生物固氮的意义 | 第12页 |
| ·大豆血红蛋白 | 第12-14页 |
| ·大豆血红蛋白的结构与性质 | 第13页 |
| ·大豆血红蛋白的功能 | 第13-14页 |
| ·大豆血红蛋白基因的结构、组成及其时空特异性表达 | 第14页 |
| ·快生型大豆根瘤菌 | 第14-15页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第15-16页 |
| ·本研究的技术路线 | 第16-18页 |
| 第2章 材料与方法 | 第18-42页 |
| ·实验材料 | 第18-21页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·质粒载体 | 第18页 |
| ·供试菌株 | 第18页 |
| ·实验试剂 | 第18页 |
| ·引物 | 第18-20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-42页 |
| ·大豆根瘤cDNA的获得 | 第21-22页 |
| ·大豆血红蛋白基因全长的获得 | 第22-26页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第26-37页 |
| ·转基因大豆根瘤菌工程菌株的构建 | 第37-38页 |
| ·转基因工程菌株的检测 | 第38-40页 |
| ·质粒的遗传稳定性测定 | 第40页 |
| ·盆栽实验 | 第40页 |
| ·固氮酶活性的测定 | 第40-41页 |
| ·统计分析方法 | 第41-42页 |
| 第3章 结果与分析 | 第42-70页 |
| ·大豆根瘤总RNA的提取 | 第42页 |
| ·大豆血红蛋白基因的扩增及生物信息学分析 | 第42-46页 |
| ·大豆血红蛋白基因的PCR扩增 | 第42-43页 |
| ·目的基因的生物信息学分析 | 第43-46页 |
| ·表达载体的构建 | 第46-53页 |
| ·重组载体的构建 | 第46-50页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第50-53页 |
| ·大豆根瘤菌工程菌株的构建及检测 | 第53-59页 |
| ·大豆根瘤菌工程菌株的筛选 | 第53-54页 |
| ·转基因大豆根瘤菌工程菌株的检测 | 第54-59页 |
| ·质粒的遗传稳定性测定 | 第59-61页 |
| ·自生传代培养条件下质粒的稳定性检测 | 第59-60页 |
| ·共生条件下质粒的稳定性检测 | 第60-61页 |
| ·盆栽实验结果 | 第61-70页 |
| ·转化快生型大豆根瘤菌15067的工程菌株的盆栽实验结果 | 第61-65页 |
| ·转化土著大豆根瘤菌的工程菌株的盆栽实验结果 | 第65-70页 |
| 第4章 讨论 | 第70-72页 |
| ·原核表达载体的选择 | 第70页 |
| ·串联成簇基因表达载体的构建 | 第70页 |
| ·表达载体的转化 | 第70-71页 |
| ·不同表达载体的增效差异 | 第71页 |
| ·下一步实验设想 | 第71-72页 |
| 第5章 结论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 附录 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读学位期间发表论文 | 第82-83页 |