| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 1. 引言 | 第12-24页 |
| ·国内外研究现状与评述 | 第13-22页 |
| ·松材线虫病发生及其危害情况概述 | 第13-16页 |
| ·Ca~(2+)参与诱导植物细胞程序化死亡的发生 | 第16-18页 |
| ·“Ca~(2+)-CaM-CaMBP”信号通路参与植物抗病反应 | 第18-22页 |
| ·研究目标和主要研究内容 | 第22-23页 |
| ·研究目标 | 第22-23页 |
| ·主要研究内容 | 第23页 |
| ·研究技术路线 | 第23-24页 |
| 2. 马尾松响应松材线虫侵染的Ca~(2+)流特征及基于SSH文库的Ca~(2+)相关差异基因分析 | 第24-50页 |
| ·供试材料 | 第24页 |
| ·供试苗木 | 第24页 |
| ·供试苗木响应松材线虫侵染的马尾松SSH文库 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-28页 |
| ·松材线虫侵染后马尾松的Ca~(2+)流特征 | 第24-28页 |
| ·基于马尾松响应松材线虫侵染SSH文库的Ca~(2+)相关差异基因分析 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-43页 |
| ·供试松材线虫的鉴定和致病性测定 | 第28-36页 |
| ·松材线虫侵染后马尾松Ca~(2+)流特征 | 第36-38页 |
| ·基于SSH分析马尾松响应松材线虫侵染的早期分子特征 | 第38-43页 |
| ·小结 | 第43-50页 |
| 3. 马尾松钙调素与钙调素结合蛋白基因克隆及序列分析 | 第50-68页 |
| ·实验材料 | 第50页 |
| ·实验方法 | 第50-56页 |
| ·引物合成 | 第50页 |
| ·总RNA的提取 | 第50-51页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第51-52页 |
| ·RACE扩增 | 第52-53页 |
| ·PCR产物电泳检测及凝胶回收 | 第53-54页 |
| ·PCR纯化产物与pGM-T克隆载体连接、转化 | 第54-55页 |
| ·菌落PCR检测及测序 | 第55页 |
| ·序列和生物信息学分析 | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-66页 |
| ·总RNA纯度和完整性检测 | 第56页 |
| ·钙相关基因的克隆获得 | 第56-59页 |
| ·CBP100蛋白基因序列分析 | 第59-60页 |
| ·CBP153蛋白基因序列分析 | 第60页 |
| ·CaM cDNA克隆获得与序列分析 | 第60-63页 |
| ·CaMBP165 cDNA克隆获得与序列分析 | 第63-66页 |
| ·小结 | 第66-68页 |
| 4. 马尾松响应松材线虫侵染的pmCaM与pmCaMBP表达模式研究 | 第68-84页 |
| ·试验材料 | 第68页 |
| ·试验虫株与供试苗木 | 第68页 |
| ·试剂与耗材 | 第68页 |
| ·试验方法 | 第68-72页 |
| ·松材线虫过滤 | 第68页 |
| ·接种与取材 | 第68-69页 |
| ·完整的RNA获得 | 第69-70页 |
| ·cDNA获得 | 第70页 |
| ·荧光定量PCR | 第70-72页 |
| ·结果与分析 | 第72-80页 |
| ·病症和松材线虫迁移检测 | 第72-73页 |
| ·松材线虫侵染马尾松苗不同时间点,不同器官pmCaM、pmCaMBP、18SrRNA检测 | 第73-75页 |
| ·半年生马尾松苗不同器官响应松材线虫侵染的pmCaM、pmCaMBP表达模式研究 | 第75-80页 |
| ·小结 | 第80-84页 |
| 5. 总结与展望 | 第84-88页 |
| ·总结 | 第84-85页 |
| ·创新点 | 第85-86页 |
| ·展望 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-96页 |
| 个人简介 | 第96-97页 |
| 博士在读期间成果清单 | 第97-98页 |
| 导师简介 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
