| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 文献回顾 | 第9-18页 |
| 1. 胸腺肽β4的发现 | 第9-10页 |
| 2. Tβ4的结构 | 第10-11页 |
| 3. 免疫调节作用 | 第11页 |
| 4. 促进血管形成作用 | 第11-12页 |
| 5. 促进创伤愈合作用 | 第12-13页 |
| 6. 抑制细胞凋亡和促进细胞成活作用 | 第13页 |
| 7. 促进毛发再生作用 | 第13-14页 |
| 8. 对肿瘤进展和转移的作用 | 第14-15页 |
| 9. 胸腺肽β4的制备 | 第15-18页 |
| 第一部分 重组人胸腺肽β4三倍体原核表达载体构建与诱导表达 | 第18-37页 |
| 1. 材料和方法 | 第18-29页 |
| ·设备 | 第18-19页 |
| ·试剂和配方 | 第19-24页 |
| ·方法 | 第24-29页 |
| 2 实验结果 | 第29-35页 |
| ·串联三倍体胸腺肽β4基因片段的酶切检测及回收 | 第29页 |
| ·pET22b(+)质粒DNA的酶切与回收 | 第29-31页 |
| ·XXT原核表达载体的构建 | 第31页 |
| ·pET22b-XXT重组质粒的序列测定分析 | 第31-34页 |
| ·XXT在BL21(DE3)中的诱导表达 | 第34页 |
| ·XXT的Western鉴定分析 | 第34-35页 |
| 3 小结与讨论 | 第35-37页 |
| ·小结 | 第35页 |
| ·人胸腺肽β4编码基因的密码子优化 | 第35页 |
| ·串联多倍体序列设计与柔性接头的使用 | 第35-37页 |
| 第二部分 重组人胸腺肽β4三倍体表达条件的优化和分离纯化 | 第37-49页 |
| 1. 材料和方法 | 第37-41页 |
| ·设备 | 第37页 |
| ·试剂和配方 | 第37页 |
| ·方法 | 第37-41页 |
| 2 结果 | 第41-47页 |
| ·培养基对BL21(DE3)中XXT表达效果的影响 | 第41-42页 |
| ·不同诱导剂对BL21(DE3)中XXT表达效果的影响 | 第42-43页 |
| ·温度对BL21(DE3)中XXT表达效果的影响 | 第43-44页 |
| ·诱导时间对BL21(DE3)中XXT表达效果的影响 | 第44页 |
| ·5L发酵罐培养表达分析 | 第44-45页 |
| ·XXT蛋白粗纯化 | 第45页 |
| ·亲和层析纯化XXT | 第45-47页 |
| 3 小结与讨论 | 第47-49页 |
| ·小结 | 第47页 |
| ·诱导剂的选择 | 第47-48页 |
| ·目的蛋白的纯化策略 | 第48-49页 |
| 第三部分 重组人胸腺肽β4三倍体的活性测定 | 第49-60页 |
| 1 实验材料 | 第49-50页 |
| ·实验动物 | 第49页 |
| ·主要试剂、实验器械及实验耗材 | 第49页 |
| ·主要实验设备 | 第49页 |
| ·试剂配制 | 第49-50页 |
| 2 实验方法 | 第50-51页 |
| ·淋巴细胞增殖实验 | 第50页 |
| ·玫瑰花环形成实验 | 第50-51页 |
| ·细胞迁移实验 | 第51页 |
| ·小鼠毛发再生实验 | 第51页 |
| 3 实验结果 | 第51-58页 |
| ·淋巴细胞增殖实验 | 第51-53页 |
| ·促进玫瑰花环形成实验结果 | 第53页 |
| ·成纤维细胞迁移实验 | 第53-56页 |
| ·小鼠毛发再生实验 | 第56-58页 |
| 4. 小结与讨论 | 第58-60页 |
| 全文总结 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 附录 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70页 |
