摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-24页 |
第一章 绪论 | 第24-34页 |
·沙门菌属简介 | 第24页 |
·伤寒沙门菌简介 | 第24-25页 |
·RPoE因子 | 第25-28页 |
·sigma因子 | 第25-26页 |
·RpoE | 第26-28页 |
·本研究的立项依据及意义 | 第28-30页 |
参考文献 | 第30-34页 |
第二章 本论文研究的目标、内容、特色、实验方案 | 第34-42页 |
·研究目标 | 第34页 |
·研究内容 | 第34-35页 |
·高渗应激下RpoE对伤寒沙门菌基因和蛋白表达的影响 | 第34-35页 |
·高渗应激条件下RpoE参与鞭毛相关基因的表达调控机制研究 | 第35页 |
·RpoE在伤寒沙门菌侵袭上皮细胞中的作用研究 | 第35页 |
·高渗应激早期RpoE与RpoS对基因表达的共调节研究 | 第35页 |
·本研究的特色和创新之处 | 第35-36页 |
·本研究的实验方案 | 第36-42页 |
·DNA芯片筛选分析RpoE对伤寒沙门菌高渗应激下转录组的影响 | 第36-37页 |
·双向电泳-质谱技术筛选分析RpoE对高渗应激下伤寒沙门菌蛋白质组的影响 | 第37-38页 |
·高渗应激条件下RpoE参与鞭毛基因调控研究 | 第38-39页 |
·RpoE参与调控伤寒沙门菌侵袭能力研究 | 第39-40页 |
·高渗应激早期RpoE与RpoS对基因表达的共调节研究 | 第40-42页 |
第三章 高渗应激下RpoE对伤寒沙门菌基因和蛋白表达的影响 | 第42-74页 |
·材料与方法 | 第42-54页 |
·材料 | 第42-46页 |
·基因芯片分析操作流程 | 第46-48页 |
·rpoE基因缺陷回补株的制备 | 第48-51页 |
·实时定量PCR分析(Quantitative Real-Time PCR;qRT-PCR) | 第51-53页 |
·蛋白质二维电泳和质谱分析 | 第53-54页 |
·结果 | 第54-66页 |
·芯片分析结果 | 第54-57页 |
·rpoE缺陷回补株的成功构建 | 第57-59页 |
·qRT-PCR验证部分表达差异基因 | 第59-62页 |
·菌体蛋白差异 | 第62-65页 |
·分泌蛋白差异 | 第65-66页 |
·讨论 | 第66-71页 |
参考文献 | 第71-74页 |
第四章 高渗应激条件下RpoE参与鞭毛相关基因的表达调控研究 | 第74-98页 |
·材料与方法 | 第76-83页 |
·材料 | 第76-77页 |
·细菌动力测定 | 第77-78页 |
·基因表达谱分析 | 第78页 |
·qRT-PCR分析 | 第78-79页 |
·Western免疫印迹分析 | 第79-80页 |
·凝胶阻滞试验分析 | 第80-83页 |
·结果 | 第83-91页 |
·高渗应激下rpoE缺陷株的生长能力明显弱于野生株 | 第83页 |
·高渗条件下RpoE影响伤寒沙门菌动力 | 第83-84页 |
·基因芯片筛选RpoE调控鞭毛相关基因表达 | 第84-86页 |
·qRT-PCR分析三级鞭毛基因表达差异 | 第86-89页 |
·Western-blot分析鞭毛蛋白F1jB:Z66差异 | 第89-90页 |
·凝胶阻滞试验分析发现RpoE直接与认基因启动子区域结合 | 第90-91页 |
·讨论 | 第91-94页 |
参考文献 | 第94-98页 |
第五章 RpoE在伤寒沙门菌侵袭上皮细胞中的作用研究 | 第98-114页 |
·材料与方法 | 第98-101页 |
·材料 | 第98-99页 |
·基因芯片分析 | 第99页 |
·qRT-PCR分析 | 第99-101页 |
·细胞侵袭实验 | 第101页 |
·结果 | 第101-110页 |
·高渗应激情况下rpoE基因缺陷株和野生株侵袭毒力相关基因表达差异分析结果 | 第102-103页 |
·qRT-PCR分析侵袭毒力基因表达结果 | 第103-108页 |
·RpoE影响伤寒沙门菌侵袭HeLa细胞 | 第108-110页 |
·讨论 | 第110-112页 |
参考文献 | 第112-114页 |
第六章 伤寒沙门菌高渗应激早期RpoE与RpoS对基因表达的共调节研究 | 第114-140页 |
·材料与方法 | 第114-122页 |
·材料 | 第114-115页 |
·rpoS缺陷株的制备 | 第115-120页 |
·rpoE/rpoS双缺陷株的制备 | 第120页 |
·生长曲线分析 | 第120页 |
·基因组芯表达谱分析 | 第120-121页 |
·qRT-PCR分析 | 第121-122页 |
·结果 | 第122-134页 |
·rpoS基因缺陷变异株的成功制备 | 第122-126页 |
·rpoE/rpoS双缺陷变异株的成功制备 | 第126-127页 |
·rpoE缺陷株、rpoS缺陷株、rpoE/rpoS双缺陷株及野生株在高渗条件下的生长差异 | 第127-128页 |
·基因表达谱分析结果 | 第128-131页 |
·qRT-PCR验证分析结果 | 第131-134页 |
·讨论 | 第134-136页 |
参考文献 | 第136-140页 |
第七章 主要结论与展望 | 第140-142页 |
·主要结论 | 第140页 |
·创新点 | 第140-141页 |
·展望 | 第141-142页 |
博士期间发表论文及学术交流 | 第142-144页 |
一、发表论文 | 第142-143页 |
二、学术会议交流 | 第143-144页 |
致谢 | 第144页 |