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RpoE在伤寒沙门菌克服环境高渗应激中的基因表达调节机制研究

摘要第1-12页
ABSTRACT第12-24页
第一章 绪论第24-34页
   ·沙门菌属简介第24页
   ·伤寒沙门菌简介第24-25页
   ·RPoE因子第25-28页
     ·sigma因子第25-26页
     ·RpoE第26-28页
   ·本研究的立项依据及意义第28-30页
 参考文献第30-34页
第二章 本论文研究的目标、内容、特色、实验方案第34-42页
   ·研究目标第34页
   ·研究内容第34-35页
     ·高渗应激下RpoE对伤寒沙门菌基因和蛋白表达的影响第34-35页
     ·高渗应激条件下RpoE参与鞭毛相关基因的表达调控机制研究第35页
     ·RpoE在伤寒沙门菌侵袭上皮细胞中的作用研究第35页
     ·高渗应激早期RpoE与RpoS对基因表达的共调节研究第35页
   ·本研究的特色和创新之处第35-36页
   ·本研究的实验方案第36-42页
     ·DNA芯片筛选分析RpoE对伤寒沙门菌高渗应激下转录组的影响第36-37页
     ·双向电泳-质谱技术筛选分析RpoE对高渗应激下伤寒沙门菌蛋白质组的影响第37-38页
     ·高渗应激条件下RpoE参与鞭毛基因调控研究第38-39页
     ·RpoE参与调控伤寒沙门菌侵袭能力研究第39-40页
     ·高渗应激早期RpoE与RpoS对基因表达的共调节研究第40-42页
第三章 高渗应激下RpoE对伤寒沙门菌基因和蛋白表达的影响第42-74页
   ·材料与方法第42-54页
     ·材料第42-46页
       ·基因芯片分析操作流程第46-48页
     ·rpoE基因缺陷回补株的制备第48-51页
     ·实时定量PCR分析(Quantitative Real-Time PCR;qRT-PCR)第51-53页
     ·蛋白质二维电泳和质谱分析第53-54页
   ·结果第54-66页
     ·芯片分析结果第54-57页
     ·rpoE缺陷回补株的成功构建第57-59页
     ·qRT-PCR验证部分表达差异基因第59-62页
     ·菌体蛋白差异第62-65页
     ·分泌蛋白差异第65-66页
   ·讨论第66-71页
 参考文献第71-74页
第四章 高渗应激条件下RpoE参与鞭毛相关基因的表达调控研究第74-98页
   ·材料与方法第76-83页
     ·材料第76-77页
       ·细菌动力测定第77-78页
     ·基因表达谱分析第78页
     ·qRT-PCR分析第78-79页
     ·Western免疫印迹分析第79-80页
     ·凝胶阻滞试验分析第80-83页
   ·结果第83-91页
       ·高渗应激下rpoE缺陷株的生长能力明显弱于野生株第83页
       ·高渗条件下RpoE影响伤寒沙门菌动力第83-84页
       ·基因芯片筛选RpoE调控鞭毛相关基因表达第84-86页
       ·qRT-PCR分析三级鞭毛基因表达差异第86-89页
       ·Western-blot分析鞭毛蛋白F1jB:Z66差异第89-90页
       ·凝胶阻滞试验分析发现RpoE直接与认基因启动子区域结合第90-91页
   ·讨论第91-94页
 参考文献第94-98页
第五章 RpoE在伤寒沙门菌侵袭上皮细胞中的作用研究第98-114页
   ·材料与方法第98-101页
     ·材料第98-99页
       ·基因芯片分析第99页
       ·qRT-PCR分析第99-101页
       ·细胞侵袭实验第101页
   ·结果第101-110页
     ·高渗应激情况下rpoE基因缺陷株和野生株侵袭毒力相关基因表达差异分析结果第102-103页
     ·qRT-PCR分析侵袭毒力基因表达结果第103-108页
     ·RpoE影响伤寒沙门菌侵袭HeLa细胞第108-110页
   ·讨论第110-112页
 参考文献第112-114页
第六章 伤寒沙门菌高渗应激早期RpoE与RpoS对基因表达的共调节研究第114-140页
   ·材料与方法第114-122页
     ·材料第114-115页
     ·rpoS缺陷株的制备第115-120页
     ·rpoE/rpoS双缺陷株的制备第120页
     ·生长曲线分析第120页
     ·基因组芯表达谱分析第120-121页
       ·qRT-PCR分析第121-122页
   ·结果第122-134页
       ·rpoS基因缺陷变异株的成功制备第122-126页
     ·rpoE/rpoS双缺陷变异株的成功制备第126-127页
     ·rpoE缺陷株、rpoS缺陷株、rpoE/rpoS双缺陷株及野生株在高渗条件下的生长差异第127-128页
       ·基因表达谱分析结果第128-131页
       ·qRT-PCR验证分析结果第131-134页
   ·讨论第134-136页
 参考文献第136-140页
第七章 主要结论与展望第140-142页
   ·主要结论第140页
   ·创新点第140-141页
   ·展望第141-142页
博士期间发表论文及学术交流第142-144页
 一、发表论文第142-143页
 二、学术会议交流第143-144页
致谢第144页

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