摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
第一章 绪论 | 第11-47页 |
·HCV研究系统的发展历程和进展 | 第11-25页 |
·HCV的发现及鉴定 | 第11-12页 |
·HCV基因型的多样性及基因组 | 第12-17页 |
·HCV体外研究模型的建立 | 第17-25页 |
·HCV的生活周期 | 第25-34页 |
·病毒粒子的结构 | 第25-26页 |
·病毒进入 | 第26-28页 |
·HCV RNA的复制 | 第28-30页 |
·病毒粒子的组装与释放 | 第30-34页 |
·HCV与宿主因子间的相互作用 | 第34-39页 |
·miR-122 | 第35-36页 |
·PI4KⅢα | 第36-37页 |
·ApoE | 第37-38页 |
·Viperin | 第38页 |
·VAP-A | 第38-39页 |
·HCV抗病毒药物研究进展 | 第39-47页 |
·目前的标准疗法 | 第40-41页 |
·靶向NS3/4A丝氨酸蛋白酶的药物 | 第41-42页 |
·靶向NS5B RNA聚合酶的药物 | 第42页 |
·靶向NS5A的药物 | 第42-43页 |
·靶向NS4B的药物 | 第43-44页 |
·靶向宿主因子的药物 | 第44-47页 |
第二章 HCV扩增与荧光定量RT-PCR方法的建立 | 第47-58页 |
·引言 | 第47页 |
·实验材料 | 第47-49页 |
·实验方法 | 第49-53页 |
·结果与分析 | 第53-58页 |
·HCV扩增与滴度测定 | 第53-55页 |
·HCV RNA荧光定量RT-PCR方法的建立 | 第55-58页 |
第三章 GPS2基因的克隆及多克隆抗体制备 | 第58-66页 |
·引言 | 第58页 |
·实验材料 | 第58-59页 |
·实验方法 | 第59-62页 |
·结果与分析 | 第62-66页 |
·GPS2基因的克隆 | 第62-63页 |
·GPS2重组蛋白的诱导表达 | 第63-64页 |
·GPS2重组蛋白的纯化 | 第64-65页 |
·GPS2多克隆抗体的制备与检测 | 第65-66页 |
第四章 GPS2对HCV复制的影响及机制研究 | 第66-88页 |
·引言 | 第66页 |
·实验材料 | 第66-69页 |
·实验方法 | 第69-74页 |
·表达载体构建 | 第69-70页 |
·细胞转染 | 第70-71页 |
·免疫共沉淀及Western blot检测 | 第71-72页 |
·稳定细胞系的建立 | 第72页 |
·RNA提取及实时荧光定量RT-PCR实验 | 第72-74页 |
·结果与分析 | 第74-84页 |
·GPS2与NS5A相互作用 | 第74-76页 |
·NS5A的Domain Ⅰ与GPS2的N端coiled-coil结构域负责两者的相互作用 | 第76-77页 |
·GPS2为HCV复制所必需 | 第77-80页 |
·外源导入GPS2可提高HCV在GPS2 Knockdown细胞中的复制水平 | 第80-82页 |
·GPS2为HCV NS5A与宿主因子VAP-A相互作用所必需 | 第82-84页 |
·实验总结与讨论 | 第84-86页 |
·实验展望 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-104页 |
研究生期间发表和待发表论文 | 第104-105页 |
致谢 | 第105页 |