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GPS2影响丙型肝炎病毒复制的分子机制研究

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 绪论第11-47页
   ·HCV研究系统的发展历程和进展第11-25页
     ·HCV的发现及鉴定第11-12页
     ·HCV基因型的多样性及基因组第12-17页
     ·HCV体外研究模型的建立第17-25页
   ·HCV的生活周期第25-34页
     ·病毒粒子的结构第25-26页
     ·病毒进入第26-28页
     ·HCV RNA的复制第28-30页
     ·病毒粒子的组装与释放第30-34页
   ·HCV与宿主因子间的相互作用第34-39页
     ·miR-122第35-36页
     ·PI4KⅢα第36-37页
     ·ApoE第37-38页
     ·Viperin第38页
     ·VAP-A第38-39页
   ·HCV抗病毒药物研究进展第39-47页
     ·目前的标准疗法第40-41页
     ·靶向NS3/4A丝氨酸蛋白酶的药物第41-42页
     ·靶向NS5B RNA聚合酶的药物第42页
     ·靶向NS5A的药物第42-43页
     ·靶向NS4B的药物第43-44页
     ·靶向宿主因子的药物第44-47页
第二章 HCV扩增与荧光定量RT-PCR方法的建立第47-58页
   ·引言第47页
   ·实验材料第47-49页
   ·实验方法第49-53页
   ·结果与分析第53-58页
     ·HCV扩增与滴度测定第53-55页
     ·HCV RNA荧光定量RT-PCR方法的建立第55-58页
第三章 GPS2基因的克隆及多克隆抗体制备第58-66页
   ·引言第58页
   ·实验材料第58-59页
   ·实验方法第59-62页
   ·结果与分析第62-66页
     ·GPS2基因的克隆第62-63页
     ·GPS2重组蛋白的诱导表达第63-64页
     ·GPS2重组蛋白的纯化第64-65页
     ·GPS2多克隆抗体的制备与检测第65-66页
第四章 GPS2对HCV复制的影响及机制研究第66-88页
   ·引言第66页
   ·实验材料第66-69页
   ·实验方法第69-74页
     ·表达载体构建第69-70页
     ·细胞转染第70-71页
     ·免疫共沉淀及Western blot检测第71-72页
     ·稳定细胞系的建立第72页
     ·RNA提取及实时荧光定量RT-PCR实验第72-74页
   ·结果与分析第74-84页
     ·GPS2与NS5A相互作用第74-76页
     ·NS5A的Domain Ⅰ与GPS2的N端coiled-coil结构域负责两者的相互作用第76-77页
     ·GPS2为HCV复制所必需第77-80页
     ·外源导入GPS2可提高HCV在GPS2 Knockdown细胞中的复制水平第80-82页
     ·GPS2为HCV NS5A与宿主因子VAP-A相互作用所必需第82-84页
   ·实验总结与讨论第84-86页
   ·实验展望第86-88页
参考文献第88-104页
研究生期间发表和待发表论文第104-105页
致谢第105页

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