| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-24页 |
| ·引言 | 第10-11页 |
| ·降解有机磷农药的微生物及其降解酶的研究进展 | 第11-14页 |
| ·降解有机磷农药的微生物 | 第11-12页 |
| ·有机磷降解酶 | 第12页 |
| ·有机磷降解酶编码基因 | 第12-14页 |
| ·有机磷降解酶（OpdA）的简介 | 第14页 |
| ·有机磷降解酶 OpdA 的作用机理 | 第14-16页 |
| ·OpdA 活性位点与金属配位 | 第14-15页 |
| ·OpdA 的作用机制 | 第15-16页 |
| ·大肠杆菌表达系统的研究进展 | 第16-18页 |
| ·食品级表达系统 | 第18页 |
| ·枯草芽孢杆菌分泌表达系统的研究进展 | 第18-23页 |
| ·立文依据与研究内容 | 第23-24页 |
| 第二章 有机磷降解酶基因(opdA)在大肠杆菌中的高效表达与酶学研究 | 第24-47页 |
| ·引言 | 第24-25页 |
| ·实验材料、仪器与试剂 | 第25-27页 |
| ·菌株与质粒 | 第25页 |
| ·试剂 | 第25页 |
| ·培养基及有关溶液的配制 | 第25-26页 |
| ·主要仪器 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27-39页 |
| ·有机磷降解酶基因（opdA）大肠杆菌表达载体的构建 | 第27-33页 |
| ·有机磷降解酶基因（opdA）在大肠杆菌 BL21 中诱导表达及条件的优化 | 第33-35页 |
| ·OpdA 重组蛋白的纯化与复性 | 第35-36页 |
| ·复性后蛋白含量的测定 | 第36-37页 |
| ·有机磷降解酶(OpdA) 酶活力的测定与动力学分析 | 第37-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-45页 |
| ·opdA 基因克隆及表达载体的构建 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白的诱导表达及条件优化 | 第40-44页 |
| ·纯化后蛋白含量的测定 | 第44页 |
| ·复性后重组蛋白的活力测定与动力学分析 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第三章 枯草芽孢杆菌的电转化条件的优化研究 | 第47-58页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·实验材料、仪器与试剂 | 第47-48页 |
| ·菌株与质粒 | 第47页 |
| ·试剂 | 第47页 |
| ·培养基及有关溶液的配制 | 第47-48页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-52页 |
| ·培养基的配置 | 第48-49页 |
| ·宿主菌 DH5α中抽提质粒 pHY300PLK | 第49页 |
| ·GM 培养基的优化 | 第49-51页 |
| ·EM 培养基的优化 | 第51页 |
| ·RM 培养基的优化 | 第51页 |
| ·电击电压的优化 | 第51页 |
| ·质粒浓度的优化 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-56页 |
| ·质粒 pHY300PLK 的提取 | 第52页 |
| ·GM 培养基对电转化率的影响 | 第52-53页 |
| ·EM 培养基对电转化率的影响 | 第53-54页 |
| ·RM 培养基对电转化率的影响 | 第54-55页 |
| ·电击电压对电转化率的影响 | 第55页 |
| ·质粒浓度对电转化率的影响 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 有机磷降解酶基因在枯草芽孢杆菌中的分泌表达与酶学性质 | 第58-77页 |
| ·引言 | 第58-59页 |
| ·实验材料、仪器与试剂 | 第59-60页 |
| ·菌株与质粒 | 第59页 |
| ·试剂 | 第59页 |
| ·培养基及有关溶液的配制 | 第59-60页 |
| ·主要仪器 | 第60页 |
| ·实验方法 | 第60-66页 |
| ·有机磷水解酶基因（opdA）枯草芽孢杆菌表达载体的构建 | 第60-64页 |
| ·有机磷降解酶基因（opdA）在枯草芽孢杆菌中的诱导表达及其条件优化 | 第64-66页 |
| ·结果和分析 | 第66-75页 |
| ·opdA 基因克隆及表达载体的构建 | 第66-67页 |
| ·重组菌株 WB800N/pHT43-opdA 的诱导表达及条件优化 | 第67-71页 |
| ·重组蛋白含量的测定 | 第71页 |
| ·有机磷降解酶（OpdA）酶活力的测定与动力学分析 | 第71-72页 |
| ·诱导条件对有机磷降解酶（OpdA）酶活力的影响 | 第72-74页 |
| ·有机磷降解酶（OpdA）的反应动力学分析 | 第74-75页 |
| ·讨论 | 第75-77页 |
| 全文小结 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-85页 |
| 攻读硕士学位期间的论文及研究成果 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
