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Ⅰ型鸭肝炎病毒VP1基因重组腺病毒的构建及其免疫效果评价

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 绪论第13-21页
   ·DHV-I 的简述第14-15页
     ·分类地位第14页
     ·病变特征第14页
     ·流行病学第14-15页
   ·DHV-I 的基因组结构特点及其功能第15页
   ·DHV-I 的蛋白作用及其特性第15-16页
   ·DHV-I 的诊断方法第16-18页
     ·病毒分离第16-17页
     ·电镜检测第17页
     ·血清学检测第17页
     ·分子生物学检测第17-18页
   ·DHV-I 疫苗研发概况第18-19页
     ·弱毒苗的研发第18页
     ·灭活苗的研发第18-19页
     ·二联疫苗的研发第19页
   ·高免卵黄抗体第19页
   ·基因工程疫苗的研究第19-21页
     ·核酸疫苗第19-20页
     ·基因工程活载体疫苗第20-21页
第二章 材料方法第21-31页
   ·实验材料第21-22页
     ·病毒株、菌株、质粒、细胞第21页
     ·主要试剂第21页
     ·主要仪器第21-22页
   ·实验方法第22-31页
     ·穿梭质粒 pShuttle-CMV-VP1 的构建第22-26页
     ·同源重组获得重组腺病毒质粒 pAd-VP1第26-27页
     ·转染 AD293 细胞制备重组腺病毒第27-28页
     ·重组腺病毒 rAd-VP1 的鉴定与纯化第28-30页
     ·重组腺病毒 rAd-VP1 的鸭免疫以及免疫效果评价第30-31页
第三章 实验结果第31-38页
   ·重组穿梭质粒的构建第31-32页
     ·PCR 扩增和重组穿梭质粒双酶切鉴定第31页
     ·重组穿梭质粒的 PCR 验证第31-32页
   ·阳性重组腺病毒质粒 pAd-VP1 的鉴定第32-33页
   ·重组腺病毒 rAd-VP1 的获得第33页
   ·重组腺病毒 rAd-VP1 的 VP1 基因转录、表达的鉴定第33-35页
     ·RT-PCR 鉴定第33-34页
     ·IFA 鉴定第34页
     ·western blot 鉴定第34-35页
   ·重组腺病毒 rAd-VP1 的纯化及滴度测定第35-36页
   ·动物免疫及攻毒实验结果第36-38页
     ·重组腺病毒 rAd-VP1 可以刺激雏鸭产生特异性 IgG第36页
     ·肝脏剖检病变和 RT-PCR 检测结果第36-38页
第四章 讨论第38-41页
   ·鸭肝炎新型疫苗研制意义第38页
   ·重组腺病毒构建第38-40页
     ·插入基因的选择第38页
     ·腺病毒载体的选择第38-39页
     ·动物实验评价第39-40页
   ·实验操作注意事项第40-41页
     ·重组腺病毒构建的注意事项第40页
     ·RNA 提取第40页
     ·IFA 实验第40-41页
第五章 全文结论第41-42页
参考文献第42-47页
致谢第47-48页
作者简历第48页

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